分蘗蔥頭水溶性總黃酮含量測定方法的研究

1、分蘗蔥頭水溶性總黃酮含量測定方法的研究【摘要】目的采用比色法測定東北特產(chǎn)分蘗蔥頭中水溶性總黃酮的含量。方法以槲皮素為對照品，以三氯化鋁為顯色劑，檢測波長為431n。結果線性范圍為1.06812.816gl-1(r=0.9998)，平均回收率為99.8%，相對標準偏向為0.8%(n=9)。結論該法測定分蘗蔥頭中水溶性總黃酮的含量簡便可行，準確度高?！娟P鍵詞】分蘗蔥頭;水溶性總黃酮;槲皮素1材料與儀器1.1材料槲皮素對照品(99.54%，吉林大學藥學院藥物化學教研室提供);95%醫(yī)用酒精(吉林金鑫公司);其余試劑均為分析純。分蘗蔥頭購于長春市郊區(qū)，經(jīng)吉林大學藥學院生藥學教研室主任王廣樹教授鑒定為百

2、合科蔥屬植物分蘗蔥頭AlliuepaL.var.agrgatuDn.。1.2儀器FZ75型紫外可見分光光度計(上海光譜儀器)，SHB-III順循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào))，RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)，JT1001電子天平(上海精天電子天平儀器)，AR1140電子分析天平(奧豪斯國際貿(mào)易)，KQ3200DE醫(yī)用數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器)，HH-2恒溫數(shù)顯水浴鍋(常州國華電器)，101-1A電熱鼓風枯燥箱(天津市泰斯儀器)。2方法與結果2.1分蘗蔥頭總黃酮樣品的制備精細稱取100g分蘗蔥頭枯燥鱗莖，用3倍量70%乙醇加熱回流3次，1h/次，將3次溶液合并，減壓回

3、收得流浸膏，加水溶解，過濾，濾液備用。2.2最大吸收波長確實定分別準確稱取枯燥至恒重的槲皮素對照品和總黃酮樣品適量，分置50l容量瓶中，用無水乙醇溶解并配制成每毫升含槲皮素(或總黃酮)54g的溶液，分別精細量取此溶液4.0l，分置25l量瓶中，精細參加5%三氯化鋁8.0l，加無水乙醇溶液至刻度，搖勻放置10in。另取一25l量瓶，精細參加5%三氯化鋁8.0l，加無水乙醇溶液至刻度，以此為空白，在波長300500n之間進展掃描，確定槲皮素對照品和總黃酮樣品溶液的最大吸收波長均為431n，以此波長為測定波長。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3槲皮素標準曲線的制定精細稱取枯燥至恒重的槲皮素標準品適量，用無

4、水乙醇溶解并配制成每毫升含槲皮素54g的溶液，精細汲取該溶液的0.50，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0l，分置25l容量瓶中，各精細參加5%三氯化鋁的乙醇溶液8.0l，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻放置10in，另取一個25l容量瓶，精細參加5%三氯化鋁的乙醇溶液8.0l，用無水乙醇稀釋至刻度，以此為空白。在431n處測定吸光度。測定結果見表1。表1槲皮素標準曲線的測定由此可見，槲皮素濃度在1.06812.816gl-1范圍內(nèi)線性關系良好。2.4提取物中總黃酮的含量測定以水溶性黃酮的含量為考察指標，將乙醇浸膏加水溶解，測量總體積后以槲皮素為代表成分測定溶液中總黃酮的含量。勸2.1項下樣品，

5、加水溶解后過濾，濾液定容于50l置量瓶中，從中精細汲取5l于100l燒瓶中，加7.5%的硫酸10l，水浴加熱回流40in，取出冷卻后濾過，濾渣及濾紙洗至中性，剪碎后放入100l圓底燒瓶中加無水乙醇回流2次，各加無水乙醇25和15l，分別回流30和15in，取出濾液，定容在50l量瓶中，精細量取8l溶液2份，分置25l量瓶中，1份加無水乙醇至刻度作對照，另一份精細參加5%三氯化鋁乙醇溶液8.0l，再用無水乙醇定容至刻度，在431n處測定吸收度，根據(jù)標準曲線線性方程計算總黃酮含量。2.5精細度實驗按“2.1項下方法制備供試品溶液6份，按“2.4項進展測定。結果見表2。表2精細度實驗結果結果標明RS

6、D為1.1%，證明該含量測定方法精細度良好。2.6穩(wěn)定性實驗按“2.1項下方法制備供試品溶液1份，按“2.4項分別在0，10，20，30，40，50和60in進展測定，結果見表3。表3穩(wěn)定性實驗結果RSD為0.6%，標明供試品溶液在1h內(nèi)測定穩(wěn)定。2.7加樣回收率考察將3份不同濃度的乙醇浸膏加水溶解后過濾，濾液定容于50l容量瓶中，從中精細汲取5l溶液于100l燒瓶中，分別精細參加槲皮素對照品，按“2.4項制備樣品進展測定，計算回收率。結果見表4。平均回收率為99.8%，RSD為0.8%，可見該方法準確度較好。2.83批樣品中總黃酮的含量測定按“2.4項下測定3批樣品中分蘗蔥頭的總黃酮含量，平均每克枯燥分蘗蔥頭鱗莖中含有水溶性總黃酮為0.64g。表4加樣回收率實驗結果3討論分蘗蔥頭營養(yǎng)價值較高，在我國資源豐富，尤其在東北地區(qū)種植量很大，生長快，本錢較低。有關分蘗蔥頭的藥學研究在國內(nèi)外作者未見文獻報道，本實驗采用了比色法進展測定其水溶性總黃酮的含量，操作簡便，結果準確可靠，重復性好，為東北特產(chǎn)分蘗蔥頭的質(zhì)量控制提供了科學根據(jù)?！緟⒖嘉墨I】1XiahngYang,KazuyukiHri.,ikihikKbayashi,etal.FlavnidsislatedfrAlliuepaL.V