脊髓損傷后大鼠后肢運(yùn)動功能恢復(fù)不同評分標(biāo)準(zhǔn)的比較

1、脊髓損傷后大鼠后肢運(yùn)動功能恢復(fù)不同評分標(biāo)準(zhǔn)的比擬【關(guān)鍵詞】脊髓損傷；運(yùn)動功能；評分標(biāo)準(zhǔn)摘要：目的比擬脊髓損傷(SI)后大鼠后肢運(yùn)動功能恢復(fù)的不同評分標(biāo)準(zhǔn)的優(yōu)劣。方法40只SD成熟雌性大鼠隨機(jī)分為正常組(Nral組)、急性脊髓中度損傷組(SI組)及對照組(N組)，其中SI組采用改進(jìn)的Allen打擊法，N組僅行T10椎板切除術(shù)。術(shù)后1、2、3、4、6周觀察大鼠后肢神經(jīng)功能恢復(fù)的情況并記錄結(jié)果。評價標(biāo)準(zhǔn)分別為：斜板試驗(yàn)評分、改進(jìn)Tarlv評分及BBB評分。結(jié)果SI組與N組比擬，斜板試驗(yàn)臨界角度在1-6周時，均有所減小(P0.05)，尤以第1周時減少更甚(P0.01)；改進(jìn)Tarlv評分第1、2、3、

2、4周時，分值間的差異非常明顯(P0.01)，第6周時，未見變化(P0.05)；而BBB評分各時間點(diǎn)的區(qū)分程度非常明顯(P0.01)。結(jié)論BBB評分對SI模型運(yùn)動功能評價具有明顯優(yōu)勢，可作為今后研究的標(biāo)準(zhǔn)評分法。關(guān)鍵詞：脊髓損傷；運(yùn)動功能；評分標(biāo)準(zhǔn)AparefhindlibsltrfuntinreveryafterspinalrdinjuryinratsABSTRAT:bjetiveTntrastthedifferentsalerulefhindlibsltrfuntinreveryaftertheratspinalrdasinjured.ethdsAttalf40ratseredividedi

3、nt3grups:nralgrup,spinalrdinjurygrup(SI)(difiedAllenethd),andntrlgrup(N)(nlyT10lainety).Tbservenervefuntinalreveryfhindlibsafterperatinin1,2,3,4,6respetively.Srestandard:Inlinedplaneethd,difiedTarlvgrading,BBBsaleandrerdingresults.ResultsTntrastSIgrupandntrlgrup,ritialangleininlineplanetestasderease

4、din6eeks(P0.05),espeiallyin1eek(P0.01);difiedTarlvgradingaspared:1,2,3,4,thedifferenefsaleasgreatlydifferent(P0.01),butin6thishangedisappeared(P0.05);innvalesenestage(fr1t6),thedegreefeverynefBBBsalesasdistinguished(P0.01).nlusinItisreasnablethattheBBBsaleisastandardtestfrSIltrfuntinassessentinrats.

5、KEYRDS:spinalrdinjurygrup(SI);ltrfuntin;salerule建立脊髓損傷(spinalrdinjury,SI)后神經(jīng)功能評定的方法，是確定SI程度、觀察恢復(fù)情況及評價藥物的最根本要求。SI后神經(jīng)功能評價方法主要有神經(jīng)電生理、組織形態(tài)和功能評定。由于動物對檢測應(yīng)答具有局限性，所以多年來一直側(cè)重于SI后運(yùn)動功能的評估。1材料與方法1.1動物分組及模型的建立改進(jìn)的Allen打擊法1在硬膜外表墊一曲度與脊髓一致的2.25弧形光滑金屬墊片，用重15g的砝碼10處垂直落下打擊墊片致脊髓造成中度損傷(大鼠尾巴痙攣擺動及軀體回縮撲動后，雙下肢癱瘓，說明撞擊成功)；N組僅行T

6、10椎板切除術(shù)。術(shù)后3組均于1、2、3、4、6周觀察大鼠后肢神經(jīng)功能恢復(fù)的情況。SI組和N組術(shù)后每日協(xié)助排尿2-3次，預(yù)防性應(yīng)用青霉素肌肉注射。1.2評價標(biāo)準(zhǔn)改進(jìn)Rivlin和Tatr法2，將大鼠身體軸線與斜板縱軸垂直位放置，斜板每次升高5,以大鼠可以停留5s的最大角度為其功能值。改進(jìn)Tarlv評分標(biāo)準(zhǔn)3分級如下：0級：后肢無活動，不能負(fù)重；1級：后肢可見活動但不能負(fù)重；2級：后肢活動頻繁或有力，不能負(fù)重；3級：后肢可支持體重，能走1-2步；4級：可行走，僅有輕度障礙；5級：行走正常。根本內(nèi)容為：關(guān)節(jié)活動的數(shù)目和范圍，負(fù)重程度及前后肢協(xié)調(diào)性，前、后爪和尾部的活動情況。BBB評分觀察期為4in，

7、動物應(yīng)盡量保持在活動范圍的中心區(qū)域活動。1.3評價方法首先進(jìn)展改進(jìn)Tarlv或BBB評分，兩者可同時進(jìn)展。上述評分完畢30in后，再進(jìn)展斜板試驗(yàn)。觀察者為非本組實(shí)驗(yàn)人員，且對評分標(biāo)準(zhǔn)非常熟悉。因大鼠晝夜活動差異較大，評分均于800p進(jìn)展。評價前所有動物應(yīng)檢查膀胱是否充盈，以免因膀胱充盈而影響活動。1.4統(tǒng)計學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，采用SPSS12.0軟件進(jìn)展t檢驗(yàn)，以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1大體觀察40只大鼠中SI組1例術(shù)后6d因泌尿系感染死亡，N組1例術(shù)后3d因硬膜外血腫死亡，其余全部存活，死亡的大鼠后續(xù)補(bǔ)上。SI后大鼠均表現(xiàn)為截癱，后肢及尾部無活動，對針刺亦

8、無反響，排尿障礙，排便未見明顯障礙。傷后4d開場出現(xiàn)對針刺的回縮反響；2周開場出現(xiàn)后肢運(yùn)動；4周可見明顯后肢活動；6周后肢出現(xiàn)協(xié)調(diào)活動，排尿功能部分恢復(fù)，但仍有膀胱剩余尿。2.2不同評分標(biāo)準(zhǔn)的比擬圖1大鼠斜板實(shí)驗(yàn)評分結(jié)果略Fig.1SreresultfInlinedplaneethdinrat改進(jìn)Tarlv評分正常組大鼠改進(jìn)Tarlv評分為5分。SI組與N組改進(jìn)Tarlv評分比擬，第1、2、3、4周時，分值間的差異非常明顯(P0.01)；第6周時，兩組評分均在4.5分左右，未見變化(P0.05)，與前4周比擬區(qū)分跨度大(圖2)。圖2大鼠改進(jìn)的Tarlv評分實(shí)驗(yàn)結(jié)果略Fig.2Sreresult

9、fTarlvgradinginrat比擬，各時間點(diǎn)的區(qū)分程度非常明顯(P0.01，圖3)。圖3大鼠BBB評分實(shí)驗(yàn)評分結(jié)果略Fig.3SreresultfBBBgradingsysteinrat3討論對于脊髓損傷及其修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究來說，脊髓功能的正確評價是一項(xiàng)重要的內(nèi)容，它直接影響著對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。目前有關(guān)脊髓修復(fù)及其功能的評價方法包括后肢運(yùn)動功能、脊髓電生理、熒光示蹤技術(shù)及組織學(xué)和免疫組織化學(xué)觀察等方法。這些方法中尤其以后肢運(yùn)動功能評分最為常用,也最為方便客觀。Fehlings等5在斜板法中采用的橡膠墊厚度為0.6。我們采用的橡膠墊厚度為2,更有利于觀測動物。但測定值較以往文獻(xiàn)略高。Fehl

10、ings認(rèn)為斜板法的優(yōu)點(diǎn)主要有：設(shè)備簡單，費(fèi)用低；檢測方法簡單迅速，無創(chuàng)傷性，重復(fù)性好；與SI程度相關(guān)性高。斜板法簡單可靠，應(yīng)作為SI常規(guī)觀察指標(biāo)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，SI1周后(P0.05)神經(jīng)功能恢復(fù)進(jìn)入較緩慢期后，評分結(jié)果趨于平緩。該評分法對于提醒大鼠神經(jīng)功能的細(xì)微功能有缺乏之處，如爪的位置、尾的下垂或上翹等，而這些功能對于大鼠的整體功能具有重要作用。Tarlv等于1954年介紹了一種運(yùn)動功能評定方法，其根本內(nèi)容為關(guān)節(jié)活動度,能否行走、跑步等。這一方法為大多數(shù)文獻(xiàn)所采用,對靈長類動物較可靠,但對鼠、兔等低等哺乳動物,符合率較低，所以近年出現(xiàn)了許多改進(jìn)的Tarlv法，如Gale等6于1995年

11、提出的標(biāo)準(zhǔn),就是以大鼠為觀察對象。改進(jìn)Tarlv法雖然較為簡單，但各組評分呈跳躍性分布(6周，P0.05)，對于SI大鼠的損傷程度的差異性難以表達(dá)，對于神經(jīng)功能恢復(fù)的過程提醒缺乏。該方法僅能作為SI大鼠損傷程度的初步篩眩Bass等7認(rèn)為BBB評分有以下幾個特點(diǎn)：專門用于評價大鼠胸髓損傷后后肢功能恢復(fù)情況；記分不是以往累積求和的方法，而是每一個分?jǐn)?shù)都有一個獨(dú)立的標(biāo)準(zhǔn)；評分還包括許多動物行為評定細(xì)節(jié)和特征說明；評分的漸進(jìn)性排列，表達(dá)了SI恢復(fù)的全過程。宋煥瑾等8認(rèn)為采用斜板試驗(yàn)法和BBB評分法結(jié)合應(yīng)用,彌補(bǔ)了單一評定方法的缺乏，有效地進(jìn)步了評分的準(zhǔn)確性及敏感性。行為學(xué)研究說明，BBB評分較客觀，不

12、純熟的觀察者其評分差異在2分以內(nèi)，有經(jīng)歷者差異在1分以內(nèi)；6.5-15分范圍內(nèi)各組觀察人員一致性最高。該法無需特殊設(shè)備，易于推廣，但其標(biāo)準(zhǔn)較復(fù)雜，觀察人員應(yīng)進(jìn)展一定的訓(xùn)練，以盡量減少主觀因素的影響。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，BBB評分幾乎包括了SI后大鼠后肢恢復(fù)過程中所有行為變化，且與脊髓損傷的程度高度相符。BBB評分在SI后不同時間點(diǎn)均有明顯變化(1-6周，P0.01)，表達(dá)了恢復(fù)過程的細(xì)節(jié)。BBB評分為9分時，大鼠可以足背負(fù)重拖動身體，完成主動覓食的動作，這對于SI大鼠的存活具有重要意義。通過本實(shí)驗(yàn)，我們建議今后可將BBB評分，作為評價大鼠SI后神經(jīng)功能恢復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)評分方案。參考文獻(xiàn)：1AllenAR

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