體液檢驗的質(zhì)量控制_第1頁
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文檔簡介

1、體液檢驗的質(zhì)量控制第1頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日體液學(xué)檢驗范疇體液學(xué)檢驗包括:尿液、腦脊液、胸腹水等各種體液及糞便的常規(guī)檢驗及形態(tài)學(xué)檢驗等。第2頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日體液檢驗質(zhì)量控制的技術(shù)要求1 、人員2、設(shè)施和環(huán)境:2.3、如使用尿干化學(xué)試條,其存放條件(如濕度)應(yīng)符合要求。用以保存臨床樣品和試劑的設(shè)施應(yīng)設(shè)置目標(biāo)溫度和允許范圍,并記錄。應(yīng)有溫濕度失控時的處理措施,并記錄。2.6、應(yīng)依據(jù)所用分析設(shè)備和實驗過程的要求,制定環(huán)境溫濕度控制要求并記錄。應(yīng)有溫濕度失控時的處理措施并記錄。第3頁,共93頁,2022年,5月20日,22點

2、59分,星期日3 、實驗室設(shè)備、試劑和耗材3.1.4 應(yīng)按國家法規(guī)要求對強(qiáng)檢設(shè)備進(jìn)行檢定。應(yīng)進(jìn)行外部校準(zhǔn)的設(shè)備,如果符合檢測目的和要求,可按制造商校準(zhǔn)程序進(jìn)行。應(yīng)至少對分析設(shè)備的加樣系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)(適用時)。分析設(shè)備和輔助設(shè)備的內(nèi)部校準(zhǔn)應(yīng)符合CNAS-CL 31內(nèi)部校準(zhǔn)要求。尿液有形成分分析的水平離心機(jī)應(yīng)有蓋;應(yīng)能提供400g的相對離心力(RCF)。應(yīng)每12個月對離心機(jī)進(jìn)行校準(zhǔn)。第4頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日實驗室設(shè)備、試劑和耗材3.1.5 設(shè)備故障后,應(yīng)首先分析故障原因,如果設(shè)備故障可能影響了方法學(xué)性能,故障修復(fù)后,可通過以下合適的方式進(jìn)行相

3、關(guān)的檢測、驗證: (a) 可校準(zhǔn)的項目實施校準(zhǔn)驗證,必要時,實施校準(zhǔn); (b) 質(zhì)控物檢驗; (c) 與其他儀器或方法比對; (d) 以前檢驗過的樣品再檢驗。第5頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日4 、檢驗前過程4.2、應(yīng)針對不同類型的體液樣品規(guī)定不同的采集方法和要求。-對自行采集樣品的患者,實驗室或相關(guān)醫(yī)護(hù)人員應(yīng)指導(dǎo)其正確采集樣品。-有特殊采集要求的樣品,應(yīng)在醫(yī)生或護(hù)士的協(xié)助下完成采集。4.5、所有體液樣品應(yīng)用密閉容器運送。第6頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日5、 檢驗過程、尿液干化學(xué)分析儀性能驗證的內(nèi)容至少應(yīng)包括陰性和陽性符合率;-尿液有形

4、成分分析儀性能驗證的內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、攜帶污染率和可報告范圍。第7頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日檢驗過程、如可行,尿液樣品應(yīng)全部進(jìn)行顯微鏡有形成分檢查;如使用自動化儀器做有形成分篩檢,實驗室應(yīng)制定尿液有形成分分析的顯微鏡復(fù)檢程序,并進(jìn)行確認(rèn): (a) 明確顯微鏡復(fù)檢程序制定的依據(jù)、方法; (b) 規(guī)定驗證方法及標(biāo)準(zhǔn),對復(fù)檢程序進(jìn)行驗證,假陰性率應(yīng)5%。5.5.2 應(yīng)至少使用20份健康人尿樣品驗證尿液有形成分分析儀檢驗項目的生物參考區(qū)間。第8頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日6 、檢驗結(jié)果質(zhì)量的保證6.2.2 、尿液有形成分分析儀紅細(xì)胞、白

5、細(xì)胞計數(shù)檢驗項目,可參照GB/T 20468 -2006臨床實驗室定量測定室內(nèi)質(zhì)量控制指南進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。-應(yīng)至少使用2 個濃度水平(正常和異常水平)的質(zhì)控物,每檢測日至少檢測1次,應(yīng)至少使用13s、22s失控規(guī)則。-定性體液學(xué)檢驗項目應(yīng)至少使用陰性和陽性質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,每工作日至少檢測1次,偏差不超過1個等級,且陰性不可為陽性,陽性不可為陰性。第9頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日檢驗結(jié)果質(zhì)量的保證、 應(yīng)按照CNAS-RL02 能力驗證規(guī)則的要求參加相應(yīng)的能力驗證/室間質(zhì)評。應(yīng)保留參加能力驗證/室間質(zhì)評活動的結(jié)果和證書。實驗室負(fù)責(zé)人或指定人員應(yīng)監(jiān)控能力驗證/室間質(zhì)評

6、的結(jié)果,并在結(jié)果報告上簽字。第10頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日檢驗結(jié)果質(zhì)量的保證6.3.2 、通過與其他實驗室(如已獲認(rèn)可的實驗室或其它使用相同檢測方法的同級別或高級別實驗室)比對的方式確定檢驗結(jié)果的可接受性時,應(yīng)滿足如下要求: (a)規(guī)定比對實驗室的選擇原則; (b)樣品數(shù)量:至少5份,包括正常和異常水平;(c)頻率:至少每年2次; (d) 判定標(biāo)準(zhǔn):應(yīng)有80%的結(jié)果符合要求。第11頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日檢驗結(jié)果質(zhì)量的保證6.4、實驗室內(nèi)部結(jié)果比對應(yīng)符合如下要求: (a)檢驗同一項目的不同方法、不同檢測系統(tǒng)應(yīng)至少6個月進(jìn)行結(jié)果

7、的比對: 尿液分析儀的比對應(yīng)在確認(rèn)分析系統(tǒng)的有效性及其性能指標(biāo)符合要求后,至少使用5份臨床樣品(含正常和異常水平)進(jìn)行比對; -定性檢測偏差應(yīng)不超過1個等級,且陰性不可為陽性,陽性不可為陰性; -尿液干化學(xué)分析儀、尿液有形成分分析儀如型號不同,則不宜比對; 第12頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日檢驗結(jié)果質(zhì)量的保證(b) 對于尿液中有形成分檢查,尿液干化學(xué)分析儀、尿液有形成分分析儀、尿液沉渣顯微鏡檢查之間不宜進(jìn)行比對; (c) 應(yīng)定期(至少每6個月1次,每次至少5份臨床樣品)進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢驗人員的結(jié)果比對、考核并記錄; (d) 比對記錄應(yīng)由實驗室負(fù)責(zé)人審核并簽字,并應(yīng)保留

8、至少2年。第13頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿液檢驗質(zhì)量控制 分析前質(zhì)量控制 分析中質(zhì)量控制 分析后質(zhì)量控制 第14頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 分前質(zhì)量控制 病人準(zhǔn)備 標(biāo)本采集 標(biāo)本運送 檢驗流程的確定 質(zhì)量監(jiān)管第15頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 標(biāo)本采集前病人的準(zhǔn)備 告知病人檢測時間和方法 1。留尿時間:清晨第一次尿為宜。 急診病人可隨時留尿 2。留尿方法:清洗外陰,棄去前段尿,留中 段尿,避免經(jīng)血,白帶,糞便等混入 3。食物對結(jié)果的影響 過量飲水尿液稀釋,致假陰性 高蛋白飲食PH降低、NIT假陰性

9、提醒病人注意控制第16頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日藥物的影響:化驗單應(yīng)注明藥物對部分結(jié)果的影響 PH:碳酸氫鈉、乙酰唑胺等 糖:皮質(zhì)醇、阿司匹林、對氨基水楊酸等致假陽性; Vit C、左旋多巴、非那宗吡啶等致假陰性。 酮體:水楊酸鹽、苯乙雙胍等致假陽性。 蛋白:奎寧、等致假陽性、大量青霉素致假陰性。 隱血:大量Vit C致假陰性。 白細(xì)胞:呋喃妥因,慶大,頭孢氨芐等致假陽性; 管型:影響腎功能的抗生素、抗結(jié)核藥、抗腫瘤藥、 麻醉藥、疫苗、類毒素、免疫血清等均可能引 起假陽性。第17頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿液標(biāo)本的收集 留尿容器的

10、要求 1 新鮮的尿是分析的質(zhì)量保證 2 收集標(biāo)本的容器要求干凈 3 標(biāo)本容器上應(yīng)有標(biāo)簽:姓名、科室、 病床、 收集的時間等 4 容器應(yīng)為一次性用品 5 容器應(yīng)為50ml以上第18頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日容器要求:一次性潔凈容器,容積50ml,圓形口直徑4.0cm,底部較寬易于開啟的密封裝置第19頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日不同方式所采尿標(biāo)本的檢測應(yīng)用范圍尿標(biāo)本采尿的方式適用范圍不適用范圍中段尿第一次晨尿細(xì)菌檢驗試帶過篩亞硝酸鹽試驗?zāi)虺猎R檢蛋白檢驗臨床化學(xué)檢驗中段尿第二次晨尿試帶過篩亞硝酸鹽還原試驗葡萄糖,蛋白定量隨意尿餐后尿:測

11、尿糖尿細(xì)菌檢查膀胱穿刺尿細(xì)菌學(xué)檢查尿沉渣鏡檢定量標(biāo)本定時尿,3h,12h,24h尿沉渣人工定量尿細(xì)菌檢查臨床化學(xué)檢驗來源: Roche 尿液基礎(chǔ)與實驗診斷 2003版, P9.德文 Peter Hagemann, Horet Kimling ,Bernd Zawta 等 ,顧可梁 翻譯第20頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日男性患者尿標(biāo)本采集1、留尿前先洗手2、指導(dǎo)未行包皮切除的患者褪上包皮,露出尿道口 用消毒清潔的小布巾清潔陰莖頭,從尿道口開始向 上清潔3、前段尿去掉,采集中段尿到容器中,后段排掉4、避免前列腺液或精液混入。第21頁,共93頁,2022年,5月20日,

12、22點59分,星期日女性患者尿標(biāo)本采集1、留尿前先洗手 2、采用蹲式 3、用消毒清潔的小布巾清潔尿道口和周圍處 4、前段尿去掉,采集中段尿到容器中,后段排掉 避開月經(jīng)期,防止陰道分泌物混入尿內(nèi)第22頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日嬰幼兒尿標(biāo)本采集 國外推薦用尿標(biāo)本采集袋 分開兒童的雙腿 保證會陰部清潔、干燥、無黏液、勿施粉、油等 移去防護(hù)紙,拉緊皮膚,將采集袋緊貼于會陰/陰莖處 定時(如每15min)察看容器 將無污染尿液倒入采集杯中送檢第23頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿液標(biāo)本的種類 1、晨尿:清晨第一次尿為晨尿,這種尿標(biāo)本較為濃縮,

13、可用于腎臟濃縮能力評價,有利于尿液形態(tài)學(xué)和化學(xué)成分分析。 2、隨機(jī)尿:即隨時留取的尿,標(biāo)本新鮮,適合門診急診患者的尿液檢查。但此尿液易受多種因素影響,使尿檢成分濃度減低或增高,造成結(jié)果對比的混亂。 3、負(fù)荷尿:為特殊需要檢查一定負(fù)荷后的尿如葡萄糖負(fù)荷后的糖耐量試驗,運動負(fù)荷后的運動后血尿,起立活動后的直立性蛋白尿等。第24頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 4、餐后尿:通常收集午餐后至下午2時的尿, 有利于檢出病理性糖尿,蛋白尿,或尿膽 元 5、餐前尿:餐前半小時至一小時排尿棄去, 進(jìn)餐前再留尿檢測尿糖。尿糖濃度反映餐 前空腹血糖平均水平,用于糖尿病治療和 監(jiān)測 6 計

14、時尿:一般根據(jù)臨床診斷或疾病觀擦的需 要,按特定的時間采集尿液標(biāo)本第25頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 7、3小時尿;收集上午6-9時時段內(nèi)的尿液, 檢查尿液有形成分排泄率 8、12小時尿:晚8時至次晨8時之內(nèi)的12小時 全部尿液,用于愛迪氏計數(shù) 9、24小時尿:患者上午8時排尿,此后收集各 次排出的尿液,至次日上午8時最后一次排 尿的全部尿液第26頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 特殊試驗?zāi)?1、中段尿:適用于尿培養(yǎng)。先用肥皂和清水 清洗外陰及尿道口,無菌紗布擦干,在不 間斷排尿過程中棄去前段尿,以無菌帶蓋 杯留取中段尿 2、導(dǎo)管尿:患者

15、發(fā)生尿潴留或排尿困難時, 由醫(yī)護(hù)人員用導(dǎo)尿管取尿 3、病情需要膀胱穿刺取尿 第27頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 注意事項 1、最好使用一次性尿杯 2、留尿后2小時內(nèi)檢驗,否則應(yīng)冷藏, 測試前需復(fù)溫。 3、24小時尿測尿酸,肌酐,蛋白,鉀鈉 氯等成分按5毫升/升的尿量加入甲苯 4、測腎上腺皮質(zhì)激素,香草扁桃酸,鈣 磷等成分按1毫升/升尿加入濃鹽酸。第28頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 1、室溫下尿液成分隨著時間的延長而改變 紅細(xì)胞減少,皺縮,破碎,消失 白細(xì)胞減少 上皮細(xì)胞成為裸核 細(xì)菌增加 PH增高加速紅細(xì)胞溶解 2、冷藏影響 結(jié)晶和無

16、定型物質(zhì)增加,影響有形成分檢測 尿液標(biāo)本的存放時間標(biāo)本送檢:立即 2小時內(nèi)檢測第29頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿液分析流程(1)手工方法 尿液樣本尿液干化學(xué)離心 鏡檢所有樣本第30頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日方法學(xué)優(yōu)點:1、尿液分析流程完整2、尿有形成分分析方法符合標(biāo)準(zhǔn)化要求3、方法容易普及方法學(xué)缺點:1、工作效率低2、無法滿足高峰時或較大樣本的檢測需求3 干化學(xué)法存在較多假陽性,假陰性第31頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿液分析流程(2) 尿液樣本自動尿液干化學(xué)分析儀離心 鏡檢計數(shù)板 陽性陰性第32頁,

17、共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日方法學(xué)優(yōu)點:1、快速篩選后,縮短了報告時間2、方法比較容易普及方法學(xué)缺點:1、干化學(xué)有形成分的檢測存在缺陷2、干化學(xué)作為篩選方法,假陽性、假陰性過高3、復(fù)檢率高,同時又容易漏檢第33頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿液分析流程(3) 全自動尿液干化學(xué)尿有形成分圖像識別系統(tǒng)圖像瀏覽,修正結(jié)果DataData報告第34頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日方法學(xué)優(yōu)點圖像易于保存、方法比較容易普及方法學(xué)缺點檢測流程不標(biāo)準(zhǔn)顯微攝像鏡頭只能隨機(jī)地采到流動樣本中通過該焦點的細(xì)胞,能對所有目標(biāo)采集清晰圖像進(jìn)行

18、形態(tài)學(xué)識別分析,定量不準(zhǔn)確,隨意性大變形、破碎、不同角度通過的細(xì)胞不能識別篩選速度慢、無質(zhì)控第35頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿液分析流程(4) 全自動尿液干化學(xué)全自動尿有形成分UF顯微鏡確認(rèn)LISDataDataDataOrder報告第36頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日方法學(xué)優(yōu)點1、符合標(biāo)準(zhǔn)化檢測流程,規(guī)范實驗室操作2、檢測效率高3、有效篩選,防止漏檢4、質(zhì)控體系(室內(nèi)質(zhì)控室間質(zhì)評)保障質(zhì)量控制5、提供新的臨床參數(shù)(紅細(xì)胞形態(tài)信息、尿路感染信息),附加值高方法學(xué)缺點 無法保存圖像第37頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分

19、,星期日 分析中質(zhì)量控制: 標(biāo)本前處理 物理檢查 化學(xué)項目分析 有形成分檢查 質(zhì)量監(jiān)控 第38頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 標(biāo)本的接收 1、核對檢驗申請單的患者信息與標(biāo)本是否符 符合 2、混有雜物或與檢驗?zāi)康牟环臉?biāo)本退回, 并注明原因 3、標(biāo)本量過少的應(yīng)重留 4、留12或24小時尿做化學(xué)成分檢測的標(biāo)本, 未放防腐劑的應(yīng)重留第39頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿液檢查的內(nèi)容: 1、物理檢查:外觀,顏色,濁度,比密。 2、化學(xué)成分檢測:PH,膽紅素,尿膽原,葡 萄糖,蛋白,酮體,亞硝酸鹽 3、有形成分檢測:白細(xì)胞,紅細(xì)胞,上皮細(xì) 胞,管

20、型,結(jié)晶,寄生蟲,細(xì)菌,真菌 第40頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 一、物理檢查 尿液比密: 折射計法:尿折射率和尿比密有較好相關(guān)性, 二者相關(guān)系數(shù)為0.98,尿折射率和尿滲量在正 常及基本正常范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù)為0.97。因此 在正常情況下,尿比密的末二位數(shù)*40=尿滲量 使用折射儀方法簡單,精密度和準(zhǔn)確度較比密 計高而且標(biāo)本用量只要1-2滴(也可用于測其 他體液比密),解決了尿少病人無法測比密的 實際困難。是目前我國測比密的確證方法。第41頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 原理: 入射角為 90度的光線進(jìn)入另一介質(zhì)(密度不 同)時,被折射

21、的角度稱為臨界角,在終端觀 察時,依折射臨界角的大小,可見明暗視物的 改變,進(jìn)而求出相對折射率。 操作:詳見說明書 附注: 1、折射計的校準(zhǔn) 用10克/升,40克/升,100 克/升蔗糖溶液校正折射儀,它們的折射率 分別為1.3344,1.3388,1.3479 2、混濁尿會影響結(jié)果判讀,加熱透明后再測第42頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 比密計法 原理:物質(zhì)的重量與同體積的純水,在一定溫 度下(4度,15.5度)相比,得到的密度為該 物質(zhì)的比密(俗稱比重) 操作: 1。充分混勻尿液后,沿管壁緩慢倒入小量筒 中,如有氣泡可用吸管或吸水紙吸去 2。比密計放入量筒中,使

22、懸浮于中央,勿觸 及筒壁或筒底。 3。比密計停穩(wěn)后,讀取與尿液凹面相切的刻 度,即為被測尿液的比密第43頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 1、比密計的校準(zhǔn):購置的新比密計用純水在 規(guī)定溫度下觀察比密是否準(zhǔn)確。蒸餾水 15.5度應(yīng)為1.000,8.5克/升氯化鈉夜在 15.5度應(yīng)為1.006,50克/升氯化鈉液在 15.5度應(yīng)為1.035 2 溫度的影響:不在指定溫度下測定,每高 于指定溫度(一般以15 度為準(zhǔn))3度時, 比密應(yīng)加0.001,每低3度減去0.001。 第44頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 3、尿內(nèi)容物的影響:尿內(nèi)含糖,蛋白可增

23、高 比密。鹽類析出比密下降,應(yīng)待鹽類溶解 后測比密。尿素分解比密下降。尿中含造 影劑,可使比密大于1.050 4、目前比密計已不再是測定尿比密正確方法第45頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 二 化學(xué)成分檢查 1、尿液分析儀的原理:尿液分析儀通常由機(jī) 械系統(tǒng),光學(xué)系統(tǒng),電路系統(tǒng)三部分組成。 機(jī)械系統(tǒng)的主要作用是將待測的試帶 傳送到預(yù)定的位置,檢測后將試帶傳送到 廢物盒中 第46頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 光學(xué)系統(tǒng)通常包括光源,單色處理,光電 處理三部分。光線照射到反應(yīng)表面產(chǎn)生反射 光,反射光的強(qiáng)度與各個項目的反應(yīng)顏色呈正 比。不同強(qiáng)度的反

24、射光再經(jīng)光電轉(zhuǎn)換為電信號 進(jìn)行處理 電路系統(tǒng)將轉(zhuǎn)換后的電信號放大,經(jīng)摸/ 數(shù)轉(zhuǎn)換后送CPU處理,計算出最終檢測結(jié)果然 后將結(jié)果輸出到打印機(jī)打印。第47頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 2、尿干化學(xué)試帶測試原理 PH :采用酸鹼指示劑法,測試模塊 含甲基紅PH 4.6-6.2 和溴麝香草 芬藍(lán)PH6.0-9.兩種指示劑,在PH 的范圍內(nèi),顏色由橙紅經(jīng) 黃綠到蘭色 第48頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 比重 :測試模塊含有多聚電解質(zhì)甲氧乙烯順 丁烯二酸,酸鹼指示劑(溴麝香草芬藍(lán))及緩 沖物。經(jīng)過處理的多聚電解質(zhì)的PKA改變與尿 液中離子濃度相關(guān)

25、。尿比重偏高時,尿液中所 含鹽類成分較多,試劑帶中電解質(zhì)多聚體釋放 出的H+增多,溴麝香草芬藍(lán)呈現(xiàn)黃色尿比重偏 低時,尿中含鹽類成分較少,試劑帶試劑帶中 電解質(zhì)多聚體釋放出的H+減少,溴麝香草芬藍(lán) 呈現(xiàn)藍(lán)色,進(jìn)而換算成尿液比重值。第49頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 干化學(xué)測試比重的局限性:干化學(xué)尿比重 測定的變化范圍PH6.27.0。當(dāng)尿液PH大于 7.0時,尿液中會存在OH-,將中和掉部分由尿 液離子成分使電解質(zhì)多聚體釋放出的H+,致使 與酸堿指示劑反應(yīng)的H+減少,造成結(jié)果偏低。 因此,當(dāng)PH 大于7.0時,應(yīng)在測定結(jié)果上增加 0.005作為由于鹼性尿損失的補(bǔ)償

26、 第50頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 干化學(xué)尿比重測定結(jié)果表達(dá)值的變化范圍 在1.0001.030,間隔值為0.005,不能反映 較小的比重變化。多用于過高或過低尿比重病 人篩選,比重在1.0001.004的新生兒尿液不 宜使用此法測比重第51頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿糖: 試劑帶測試膜快含有葡萄糖氧化酶,過氧 化物酶,色素原等。葡萄糖氧化酶促使尿液中 的葡萄糖與O2作用生成葡萄糖酸內(nèi)酯及H2O2, H2O2又促使過氧化物酶釋放出新生態(tài)氧,使色 素原呈現(xiàn)不同的顏色變化。常見的色素原有鄰 聯(lián)甲苯胺,碘化鉀等。 第52頁,共93頁,

27、2022年,5月20日,22點59分,星期日 葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng),只與葡萄糖反應(yīng),因此較班氏法測尿糖有更高的特異性和靈敏度。干化學(xué)陰性結(jié)果,班氏法有可能呈現(xiàn)陽性結(jié)果 ():可疑 含糖量小于6mmol/L (+):陽性 含糖量628mmol/L (+):陽性 含糖量2855mmol/L (+):陽性 含糖量55110mmol/L (+):陽性 含糖量大于110mmol/L第53頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿液在低葡萄糖濃度(14mmol/L)時,維生素 C與測試帶的試劑發(fā)生競爭性抑制反應(yīng),產(chǎn)生 假陰性反應(yīng)。排除方法是先將尿液煮浮幾分鐘 再進(jìn)行測試第54頁,共9

28、3頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿蛋白: 試劑帶測試模塊區(qū)含有靈敏的蛋白顯色 劑酸鹼指示劑 四溴酚藍(lán)和檸檬酸緩沖物及 表面活性劑。當(dāng)尿液中含有蛋白質(zhì)時,由于蛋 白質(zhì)離子對指示劑相反電荷的吸引而生成復(fù)合 物,引起指示劑的進(jìn)一步電離,當(dāng)超緩沖范圍 時,指示劑發(fā)生顏色變化。根據(jù)尿液中蛋白質(zhì) 含量高低,試劑膜塊發(fā)生由黃經(jīng)綠到藍(lán)的顏色 變化 第55頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿液PH是影響尿蛋白測試結(jié)果的重要因素 不管尿液是由于保存不當(dāng)引起PH大的變化,還 是尿液本身過酸,過鹼都會影響實驗結(jié)果。尿 液PH大于9,出現(xiàn)假陽性,PH小于3,出現(xiàn)假陰 性結(jié)果

29、。 第56頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿蛋白干化學(xué)法對蛋白質(zhì)不同成分的敏感 性不一樣,對白蛋白敏感,球蛋白不敏感。有 專家經(jīng)實驗證實,尿中球蛋白為4000mg/升以 下時干化學(xué)法結(jié)果為陰性,只有達(dá)到5500mg/ 升時,才出現(xiàn)可疑反應(yīng)。白,球蛋白比值為1: 2 的蛋白尿,蛋白濃度2000mg/升時才會出現(xiàn) 陽性。干化學(xué)測定球蛋白的敏感性僅為白蛋白 的 1/501/100。第57頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 對腎臟患者在疾病發(fā)展過程中需要系統(tǒng)觀 察尿蛋白含量的病例,最好使用磺柳酸法或雙 縮脲法進(jìn)行定性和定量實驗。 研究證明,多種物質(zhì)包

30、括藥物致干化學(xué)測 定尿蛋白呈假陽性或假陰性。滴注青霉素250 萬單位/2小時,320萬單位/3小時,480萬單位 /5小時,可對干化學(xué)測定尿蛋白產(chǎn)生假陰性。第58頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 酮體: 酮體是脂肪分解代謝過程中的代謝產(chǎn)物。 尿液中的酮體包括乙酰乙酸,-羥丁酸,丙 酮三種形式。試劑帶測試模塊區(qū)主要含有亞硝 基鐵氰化鈉。在鹼性條件下,亞硝基鐵氰化鈉 可與尿液中的乙酰乙酸,丙酮起反應(yīng)產(chǎn)生紫色。 與 -羥丁酸不發(fā)生反應(yīng)第59頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 干化學(xué)法測試酮體的局限性: 干化學(xué)法對酮體各組成成分敏感性不一致 對乙酰乙酸

31、敏感性為50100mg/升,丙400 700mg/升,與-羥丁酸不發(fā)生反應(yīng)。由于不 同病因引起的酮癥其酮體成分不一,不同病程 酮體成分變化,均會使檢測結(jié)果與實際總的酮 體量有所差異。第60頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 在糖尿病酮癥酸中毒早期,酮體的主要成 分是-羥丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏,此時 測定結(jié)果可導(dǎo)致對總酮體量的估計不足。在糖 尿病酮癥酸中毒癥狀緩解后,乙酰乙酸含量反 而比急性初始期含量高,應(yīng)注意病程發(fā)展對實 驗結(jié)果影響。第61頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 膽紅素: 試劑帶測試模塊區(qū)主要含有2,4-二氯苯 胺重氮鹽,緩沖劑及其

32、他表面活性物質(zhì)。在強(qiáng) 酸性介質(zhì)里直接膽紅素與二氯笨胺重氮鹽起偶 聯(lián)反應(yīng),生成紅色復(fù)合物。 尿膽原: 試劑帶測試模塊區(qū)主要含有對二甲氨基苯 甲醛,緩沖液及其它表面活性物質(zhì)。在強(qiáng)酸性 條件下,尿膽原和二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反 應(yīng),生成櫻紅色縮合物第62頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 隱血: 試劑帶測試模塊區(qū)主要含有過氧化氫枯 烯,四甲替聯(lián)苯胺,檸檬酸,檸檬酸鹽等。尿 液中的血紅蛋白或其破壞釋放的游離血紅蛋白 均含有亞血紅素,它具有類似過氧化物酶作用 在與過氧化氫枯烯反應(yīng)過程中,能夠使無色的 四甲替聯(lián)苯胺變化成蘭色的鄰四甲替聯(lián)苯胺第63頁,共93頁,2022年,5月20日

33、,22點59分,星期日 白細(xì)胞: 試劑帶測試模塊區(qū)主要含有吲哚酚酯,重 氮鹽及其他物質(zhì)。粒細(xì)胞中存在酯酶,它能作 用于膜塊中的吲哚酚酯,使其產(chǎn)生吲哚酚,吲 哚酚與重氮鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生紫色縮合物,顏色 的深淺與細(xì)胞的多少呈比例關(guān)系。 本方法只能檢測尿中完整的及溶解的中性 粒細(xì)胞,與淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞不起反應(yīng)。第64頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 干化學(xué)法是檢測細(xì)胞漿內(nèi)含物來判別細(xì)胞 的有無,如通過特異或非特異性酯酶檢測白細(xì) 胞,通過血紅蛋白的過氧化物酶樣反應(yīng)檢測紅 細(xì)胞,因此實際工作中可能存在以下問題: 1、腎移植病人發(fā)生排異反應(yīng)時,尿中以淋巴 細(xì)胞為主,會出現(xiàn)干化學(xué)法

34、陰性結(jié)果,此 類病人應(yīng)以顯微鏡檢查為準(zhǔn)第65頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 2、尿液中污染甲醛,或高濃度膽紅素,或使 用某些藥物如呋喃妥因時,尿蛋白大于或 等于5克/升,或尿液中含有大量頭孢氨芐 慶大霉素等藥物時,干化學(xué)法檢測的白細(xì) 胞,紅細(xì)胞會產(chǎn)生假陽性第66頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 3。尿液中含有對熱不穩(wěn)定的酶,肌紅蛋白或 菌尿,可引起紅細(xì)胞的干化學(xué)法測定結(jié)果 的假陽性 4。由于尿液在膀胱儲存時間過長或標(biāo)本放置 時間過長導(dǎo)致白細(xì)胞破壞,酯酶釋放到尿 液中,可造成干化學(xué)法陽性,鏡檢陰性的 現(xiàn)象第67頁,共93頁,2022年,5月2

35、0日,22點59分,星期日 5。由于腎病患者的紅細(xì)胞在腎臟或泌尿道破 壞,或比重過低,尿PH偏高,均易造成紅 細(xì)胞破壞,血紅蛋白逸出尿中,可造成干 化學(xué)法陽性,鏡檢陰性的現(xiàn)象 對于干化學(xué)法和顯微鏡檢測白細(xì)胞,紅細(xì) 胞出現(xiàn)的不符合現(xiàn)象,要結(jié)合不同的實驗原理 病情綜合分析,動態(tài)觀察,合理解釋實驗結(jié)果第68頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 亞硝酸鹽: 試劑帶測試模塊區(qū)主要含有對胺基苯砷酸 (或氨基磺酸),N-萘基乙二胺物質(zhì)。當(dāng)尿液 中感染的具有硝酸鹽還原酶的細(xì)菌增加時,如 大腸桿菌可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,并可將 膜塊中的胺基苯砷酸重氮化而成重氮鹽,以此 重氮鹽再與N-萘基

36、乙二胺偶聯(lián),使膜快呈現(xiàn)紅 色變化第69頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿亞硝酸鹽實驗,是細(xì)菌性尿路感染的指 標(biāo),陽性結(jié)果的產(chǎn)生取決于三個條件 1 尿中的致病菌含有硝酸鹽還原酶 2 尿液在膀胱內(nèi)有足夠的停留時間 3 體內(nèi)適量硝酸鹽的存在 引起尿路感染的細(xì)菌主要是大腸桿菌,約 占70%,還有部分其他陰性桿菌,這些菌含硝 酸鹽還原酶。糞腸球菌引起的尿路感染約10%- 15%,此菌不產(chǎn)生硝酸鹽還原酶。此實驗診斷 尿路感染的符合率80%第70頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 干化學(xué)尿液分析的質(zhì)量控制 尿液分析儀: 1 仔細(xì)閱讀儀器說明書,了解儀器的測

37、試原 理,操作步驟,校準(zhǔn)方法,儀器保養(yǎng) 2 每天堅持開機(jī)后將儀器隨機(jī)所帶的校準(zhǔn)帶進(jìn) 行測試,觀察測定結(jié)果與校準(zhǔn)帶標(biāo)示結(jié)果是 否一致,只有完全一致才能證明儀器處于正 常狀態(tài) 3 保持儀器潔凈,如尿液污染立即清除 4 定期對儀器進(jìn)行維修,包括光學(xué),機(jī)械部分第71頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 測試帶的質(zhì)量控制 1 用指控物測試結(jié)果,在控,開始進(jìn)行標(biāo)本 測定如失控進(jìn)行下一步實驗 2 檢查指控物是否失效,污染,是否正確保 存。如是,使用新的指控物重新第一步實 驗。如不是,重復(fù)第一步實驗。重復(fù)實驗 結(jié)果在控,開始進(jìn)行標(biāo)本測定。如仍失控 進(jìn)行第三步實驗 第72頁,共93頁,20

38、22年,5月20日,22點59分,星期日 3 配制新的質(zhì)控物重復(fù)第一步實驗,如測試 結(jié)果在控,丟棄舊的質(zhì)控物開始進(jìn)行標(biāo)本 測試如仍失控進(jìn)行第四步實驗 4 打開同一批號的新測試帶,使用新的指控 物,重復(fù)第一步實驗,如在控,丟棄舊的 失效的測試帶開始進(jìn)行標(biāo)本測定。如仍失 控,用另一批號的新測試帶重復(fù)第一步驟 如在控,丟棄全部舊的試劑帶,用新的批 號試劑帶進(jìn)行標(biāo)本測試。如仍失控需對儀 器檢修。 第73頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 依據(jù)上述質(zhì)控步驟進(jìn)行質(zhì)控的同時,應(yīng)掌 握質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)。每次使用正常和異常兩種濃度 質(zhì)控物進(jìn)行實驗,質(zhì)控物的結(jié)果由正常變成異 ?;蛴僧惓W兂烧#?/p>

39、均提示失控。質(zhì)控物的 測試結(jié)果在靶值的到+為正常。否則為失控第74頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿液干化學(xué)檢查僅是一個過篩手段,不受人為因素的影響,在標(biāo)本量巨大時,顯示出快速,客觀的優(yōu)勢。 目前一些單位僅用尿干化學(xué)檢測作為尿常規(guī)檢查的全部內(nèi)容,不報告尿液顏色,透明度更不做尿沉渣檢查,這是非常不負(fù)責(zé)任的做法 第75頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 不少單位將熱敏紙報告直接貼在報告單上 這種做法有很大隱患,熱敏紙上的字跡遇水消 失,幾個月后字跡自行消退,并且由于報告者 簽字不在熱敏紙上,易引起糾紛第76頁,共93頁,2022年,5月20日,2

40、2點59分,星期日干化學(xué)過篩應(yīng)用范圍的局限性1 腎科及泌尿科病人尿液不應(yīng)用干化學(xué)法代替顯微鏡檢查2 鏡檢結(jié)石、結(jié)晶、腫瘤細(xì)胞作為診斷依據(jù)或觀察療效時, 不宜用干化學(xué)方法過篩3 由于干化學(xué)分析干擾因素較多,且不可避免的有一定的假 陰性率,因此要結(jié)合臨床癥狀判斷結(jié)果,決不可只看干化 學(xué)分析結(jié)果,忽視鏡檢4 尿液的外觀特別是顏色、濁度與尿沉渣有一定相關(guān)關(guān)系, 當(dāng)尿液外觀異常時,應(yīng)注意顯微鏡檢查77 第77頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 尿沉渣檢查 定量檢查推薦方法: 1、使用一次性潔凈尿杯 2、使用不易破碎的一次性離心管 3、容器,離心管,玻片必須能標(biāo)記 4、使用尿沉渣計

41、數(shù)板第78頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 5、采用有蓋的水平離心機(jī),機(jī)內(nèi)溫度近 可能低于25度,半徑22.5cm水平離 心機(jī)每分鐘12001300轉(zhuǎn) 6、有條件的實驗室可使用各類全自動的 尿有形成分分析儀,但此類儀器必須 經(jīng)權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)可第79頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議 全國臨床檢驗?zāi)蛞簷z查標(biāo)準(zhǔn)化方案 建立依據(jù):JCCLS、NCCLS、ECCLS 報告標(biāo)準(zhǔn)化:規(guī)定尿沉渣結(jié)果必須報 xxxx /ul 檢測時間:2小時內(nèi)完成檢驗。 檢查內(nèi)容:RBC、WBC,管型,結(jié)晶,細(xì)菌,寄生蟲(或蟲卵)、真菌、精子、粘液等 尿沉渣

42、檢查應(yīng)建立質(zhì)量保證體系衛(wèi)生部臨檢中心,中華醫(yī)學(xué)會檢驗學(xué)會血液學(xué)與體液學(xué)檢驗專家委員會 (2002年1月28-2月1日,廣州)第80頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日全自動尿沉渣分析儀 目前在國內(nèi)外已推出了能對尿有形成分進(jìn)行自動分析的儀器,這些儀器多采用流式細(xì)胞術(shù)和影象分析術(shù)的原理,已逐步成為尿液有形成分檢查的篩查實驗 原理:先用熒光染料對尿中各類有形成分進(jìn)行染色,然后經(jīng)激光照射每一有形成分發(fā)出熒光強(qiáng)度,散射光強(qiáng)度及電阻抗大小進(jìn)行綜合分析得出紅細(xì)胞,白細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管型和細(xì)菌定量數(shù)據(jù) 操作:按儀器說明書進(jìn)行 用配套的質(zhì)控品在檢測標(biāo)本前,進(jìn)行質(zhì)控測試第81頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日 附注: 1、自動化方法采用不離心新鮮尿標(biāo)本 2、收集標(biāo)本的容器不能有任何污染物存在 3、尿中存在大量黏液,結(jié)晶,真菌,精子影 紅細(xì)胞等會使管型,紅細(xì)胞,細(xì)菌等項目 計數(shù)結(jié)果假性增高或降低 4、嚴(yán)格執(zhí)行質(zhì)量控制,建立和執(zhí)行復(fù)檢制度第82頁,共93頁,2022年,5月20日,22點59分,星期日開展尿沉渣檢查的好處1、提高尿液異常病人的檢出率,減少漏診2、提供標(biāo)準(zhǔn)化定量檢測結(jié)果,診療有量化依據(jù)3、提供更多臨床診斷信息,對診斷有幫助病人結(jié)果與病情相符,診療有依據(jù)第83頁,共93頁,2022年,5月

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