臨床免疫學(xué)質(zhì)量控制課件

1、臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制評價(jià)情況總結(jié)分析前質(zhì)量控制臨床檢驗(yàn)科全面質(zhì)量管理系統(tǒng)用于臨床診斷與治療分析測定參與臨床診斷、查房等醫(yī)療活動(dòng)，幫助臨床醫(yī)生合理分析、正確使用檢驗(yàn)結(jié)果分析中分析后 通過實(shí)踐與文獻(xiàn)復(fù)習(xí)進(jìn)行方法學(xué)研究、臨床意義探討、經(jīng)濟(jì)學(xué)評估，不斷開展循征醫(yī)學(xué)工作探討標(biāo)本采集各環(huán)節(jié)影響實(shí)驗(yàn)因素并制定相應(yīng)制度與措施檢驗(yàn)科與臨床密切的信息交流臨床醫(yī)生選擇合理有效的檢測項(xiàng)目，正確書寫化驗(yàn)申請單檢驗(yàn)科對臨床醫(yī)生選擇項(xiàng)目時(shí),提出自己的建議對檢驗(yàn)科工作人員不斷進(jìn)行專業(yè)知識繼續(xù)教育,不斷提高整體素質(zhì)和學(xué)術(shù)水平 醫(yī)護(hù)人員能正確進(jìn)行標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)本采集檢查、監(jiān)督標(biāo)本是否符合要求標(biāo)本運(yùn)送病人準(zhǔn)備建立檢驗(yàn)報(bào)告解釋咨

2、詢及建議的機(jī)構(gòu)臨 床 檢 驗(yàn) 科內(nèi)容提要分析前質(zhì)量控制分析中質(zhì)量控制分析后質(zhì)量控制1、試劑盒的選擇、評價(jià)、使用與保存 乙肝等試劑盒 生產(chǎn)批準(zhǔn)文號； 生產(chǎn)許可證 經(jīng)營許可證 藥品經(jīng)營許可證 批批檢定合格； 貼有防偽標(biāo)簽。 未作規(guī)定的試劑，應(yīng)從如下方面進(jìn)行評價(jià)： 靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性等。 試劑盒的評價(jià) 真實(shí)性和可靠性 1、真實(shí)性：指測量值與實(shí)際值符合的程度（診斷試驗(yàn)應(yīng)能提供哪些人確實(shí)有?。ㄕ骊栃裕┖湍男┤舜_實(shí)無?。ㄕ骊幮裕┑闹笜?biāo)）。 評價(jià)指標(biāo) 相對靈敏度：是試驗(yàn)檢出有?。搓栃裕┑娜藬?shù)占患者總數(shù)的比例，即真陽性率。相對靈敏度是衡量真陽性率的尺度。 相對特異性：是試

3、驗(yàn)檢出無?。搓幮裕┑娜藬?shù)占無病者總數(shù)的比例，即真陰性率。相對特異性是衡量真陰性率的尺度。 評價(jià)試劑盒相關(guān)指標(biāo)一覽表試驗(yàn)有?。ㄕ骊栃裕o病（真陰性）合 并陽性TPFPTP + FP陰性FNTNFN +TN總數(shù)TP + FNFP + TN TP + FP + FN +TN 相對靈敏度= TP /(TP + FN)； 相對特異性= TN/(FP + TN)； 相對符合率=(TP + TN)/(TP + FP + FN +TN)。 2、可靠性：是指在相同條件下重復(fù)試驗(yàn)獲得相同結(jié)果的穩(wěn)定程度。如試驗(yàn)結(jié)果為均數(shù)，可用變異系數(shù)表示。 公式為：CV=s / x 100% S為標(biāo)準(zhǔn)差，x 為平均值。 評價(jià)丙肝

4、試劑盒相關(guān)指標(biāo)一覽表試驗(yàn)有?。ㄕ骊栃裕o?。ㄕ骊幮裕┖?并陽性（TP）98份（FP）2份TP+FP=100份陰性（FN）2份（TN）96份FN+TN=98份總數(shù)TP + FN=100份FP+TN=98份TP + FP + FN +TN =198份試劑的正確使用與保存 按說明書操作，不能想當(dāng)然； 詳實(shí)記載-批號、有效期、使用情況及更換試劑記錄等； 索要試劑商相關(guān)證件并有效保存，特別是批批檢報(bào)告書； 試驗(yàn)用試劑 冰箱內(nèi)？ 使用時(shí)？ 多余部分如何處置？ 存在的問題: （1）將試劑盒從冰箱中拿出即用 后果是：溫育時(shí)間不夠，對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性，尤其是冬天沒有空調(diào)的環(huán)境里。 要求： 試劑盒從

5、冰箱中拿出室溫放置20min以上，與室溫平衡，然后再進(jìn)行測定。 目的： 在后面的溫育反應(yīng)中，能使反應(yīng)孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足要求。 （2）商品化ELISA試劑盒中,洗板液由所提供的濃縮液稀釋配置而成，故所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。 （3）OPD底物溶液必須在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。2、目前免疫學(xué)檢驗(yàn)所要控制的儀器 （1）移液器 利用稱重法校準(zhǔn)：吸取刻度指示量的水，萬分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否正確，一般應(yīng)在10%以內(nèi)。 （2）水浴箱、溫箱、冰箱 使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)，經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度與水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測溫度是否一致，允許有1的誤差。 （3）洗板機(jī) 設(shè)置洗板后的殘留液

6、一般不超過2ul；人工扣板時(shí)，墊紙不濕；定期檢查管孔是否堵塞。 （4）酶標(biāo)儀 經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變；定期檢查校準(zhǔn)，使其保持良好的工作性能?？赡苡绊憸y定結(jié)果的標(biāo)本因素 患者標(biāo)本中有可能會含有干擾酶免疫測定導(dǎo)致假陽性和假陰性結(jié)果的干擾因素，其分為兩類： 1、內(nèi)源性干擾因素：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異性免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、交叉反應(yīng)等。 2、外源性干擾因素：如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、儲存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍保存標(biāo)本反復(fù)凍融等。 （1）盡量避免溶血 紅細(xì)胞破裂釋放出具有過氧化物酶活性物質(zhì)，增加非特異性顯色而成假陽性。 （2）

7、血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測 如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性。 （3）盡量不用抗凝血，尤其不能用肝素抗凝血。 抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾也可產(chǎn)生假陽性。 （4）標(biāo)本在冰箱中保存不宜過長 易導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法試劑本底加深。 （5）盡量避免污染 （二）分析中質(zhì)量控制 1、如何做好病毒性肝炎酶免檢驗(yàn)質(zhì)控物定值的選擇？ 2、質(zhì)控品的正確使用； 3、ELISA檢測方法的注意事項(xiàng)； 4、室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)際操作步驟； 1.如何做好病毒性肝炎酶免檢驗(yàn)質(zhì)控物定值的選擇？ 質(zhì)控物：高值、中值、低值及陰性值； 設(shè)置臨界于cut-off(CO值)的低值弱陽性質(zhì)控物是室內(nèi)質(zhì)控的關(guān)鍵；

8、低值弱陽性臨界值質(zhì)控物 是室內(nèi)質(zhì)控精密度觀察的最敏感的窗口，是提示試驗(yàn)成功與否的最重要標(biāo)志； 不是判斷陰陽性的標(biāo)準(zhǔn)。2、質(zhì)控品的正確使用 用 途：靈敏度控制、精密度控制 。 穩(wěn)定性： 1、室溫（20-25 ，相對濕度20-25%）可穩(wěn)定兩周； 2、高溫高濕度（37 ，相對濕度60-80% ）條件下，可穩(wěn)定3天； 3、在冰箱內(nèi)冷藏（2-8 ）保存，可穩(wěn)定一年； 4、-20保存可穩(wěn)定一年以上。 室內(nèi)質(zhì)控血清的規(guī)格HBeAg質(zhì)控血清 定值 適用試劑1NCU/ml 進(jìn)口的試劑2NCU/ml 國產(chǎn)試劑4NCU/ml 國產(chǎn)試劑 新的4NCU/ml原0.25 NCU/ml3、 檢測方法的注意事項(xiàng) 結(jié)果判讀

9、衛(wèi)藥發(fā)（1995）第32號及（1996）第25號文要求： 凡開展ELISA檢測項(xiàng)目的單位，必須使用酶標(biāo)儀判讀結(jié)果，不準(zhǔn)使用目測法。 ELISA測定的“灰區(qū)” 是指ELISA測定時(shí)，吸光度處于Cutoff值周圍的一定區(qū)域，其結(jié)果應(yīng)為“可疑”。需重復(fù)實(shí)驗(yàn)或換試劑重測以確定其陰、陽性，如仍落在灰區(qū)范圍內(nèi)則報(bào)告值。 灰區(qū)概念對血站系統(tǒng)的獻(xiàn)血員篩查尤為重要 灰區(qū)的設(shè)置有兩種 （1）C.O（1CV），CV為該試劑的批內(nèi)CV（一般在15%-20%間）。如：HBsAg 1.05 （118%） （2）C.O2s，s為實(shí)驗(yàn)室做室內(nèi)質(zhì)控OCV的s。如：HBsAg 1.052 0.189 原始記錄 （1）分類別、客觀

10、、如實(shí)、準(zhǔn)確、及時(shí)登記，項(xiàng)目齊全、書寫清晰、規(guī)范； （2）陰、陽性與可疑結(jié)果不能用“ +、- 、”表示，必須用漢字書寫或蓋印章； （3）ELISA試驗(yàn)每次檢測必須有原始酶標(biāo)儀打印結(jié)果，其S/c.o值應(yīng)與原始登記結(jié)果一一對應(yīng)； （4）定量試驗(yàn)結(jié)果必須采用法定的國際計(jì)量單位； 4、室內(nèi)質(zhì)控的實(shí)際操作步驟 1）設(shè)定靶值和控制限 2）特殊情況的處理：如Crubbs氏法 3）更換試劑及質(zhì)控品： 應(yīng)在“舊”批號質(zhì)控品使用結(jié)束前與“新”批號質(zhì)控品一起測定，設(shè)立新的靶值和控制限。 4）繪制質(zhì)控圖及記錄質(zhì)控結(jié)果：根據(jù)質(zhì)控圖的靶值和控制限繪制Levey-Jennings控制圖，將原始質(zhì)控結(jié)果記錄在質(zhì)控圖表上，保留打印的原始質(zhì)控記錄。 5）質(zhì)控規(guī)則的應(yīng)用： 判斷每一分析批是在控還是失控。 6）失控情況處理： 失控-填寫失控報(bào)告單-交專業(yè)室主管（組長）- 作出是否發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告的決定。 7）失控原因分析 操作失誤、試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效，儀器維護(hù)不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則、控制限范圍、一次測定的質(zhì)控標(biāo)本數(shù)等。 失控信號出現(xiàn)：意味著與測定質(zhì)控品相關(guān)的那批病人標(biāo)本報(bào)告可能作廢。 8）查明失控原因 隨機(jī)挑選5%或10%的患者標(biāo)本進(jìn)行重測，依既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測定結(jié)果是否可接受，對失控做出正確判斷。（三）分析后質(zhì)量控制 1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告 （1）統(tǒng)一的報(bào)