微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)：呼吸道致病菌的檢測_第1頁
微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)：呼吸道致病菌的檢測_第2頁
微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)：呼吸道致病菌的檢測_第3頁
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文檔簡介

1、呼吸道致病菌的檢測 一、目的與要求： 1.掌握呼吸道致病菌的檢測 2.了解呼吸道標(biāo)本收集與運(yùn)送 3.了解呼吸道常見的致病菌二、試劑 1.平板：血平板、巧克力平板、M-H平板 2.生化鑒定試劑：、及+因子、奧撲托欣（OP）紙片、膽汁溶菌微量管三、實(shí)驗(yàn) 1.標(biāo)本的涂片與革蘭染色 2.標(biāo)本的接種與細(xì)菌的分離 3.肺炎鏈球菌的鑒定 4.流感嗜血桿菌的鑒定四、結(jié)果（觀察）肺炎鏈球菌嗜血桿菌 X因子是一種對熱穩(wěn)定的血紅素及其衍生物(存在于血紅蛋白中的一種血紅蛋白衍生物），是一種含鐵的卟啉，為細(xì)菌合成過氧化氫酶、過氧化物酶、細(xì)胞色素氧化酶的輔基；V因子是一種對熱不穩(wěn)定的維生素B類物質(zhì)，存在于血液和某些植物組

2、織中（酵母菌，士豆浸液），是脫氫酶的輔酶，在細(xì)胞的呼吸中起遞氫的作用。 紅細(xì)胞中富含X 及V因子，V因子依賴性的嗜血桿菌通常不能在含有完整紅細(xì)胞的羊血瓊脂上生長，因而實(shí)驗(yàn)室中常用巧克力瓊脂培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)嗜血桿菌。 衛(wèi)星試驗(yàn)原理有溶血性的細(xì)菌在羊血瓊脂培養(yǎng)基上生長時可破壞紅細(xì)胞釋放出血紅素(即X因子)和維生素B類物質(zhì)(即V因子)，從而促進(jìn)了流感嗜血桿菌的生長；金黃色葡萄球菌在生長過程中能合成V因子釋放于培養(yǎng)基中，當(dāng)嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌一起培養(yǎng)時，V因子會促進(jìn)嗜血桿菌的生長，出現(xiàn)靠近葡萄球菌菌落的嗜血桿菌菌落較大，而遠(yuǎn)離葡萄球菌菌落的嗜血桿菌菌落較小的現(xiàn)象稱為“衛(wèi)星現(xiàn)象”；在不含血紅素瓊脂平板上進(jìn)行的衛(wèi)星試驗(yàn)，稱為“瓊脂衛(wèi)星試驗(yàn)”。 紙片法衛(wèi)星試驗(yàn)注意事項(xiàng)A：在腦心瓊脂平板上貼X、V和X+V因子紙片時紙片間距離應(yīng)大于5cm（因?yàn)閂因子分子量小，擴(kuò)散距離遠(yuǎn)），否則會出現(xiàn)X因子假陽性結(jié)果。B：如果出現(xiàn)（X+V）紙片陰性結(jié)果，應(yīng)考慮以下幾個問題（1）細(xì)菌死亡；（2）培養(yǎng)基營養(yǎng)缺乏；（3）紙片失效?？ㄋ阴Ｖ讣埰? 100mg/ml 3-乙酰吲哚丙酮溶液浸泡 紙片后吹干備用乙酰酯酶試驗(yàn) 用無

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