DB1301-T238-2017水貂阿留申病碘凝集試驗(yàn)操作規(guī)程

1、B 41DB1301石家莊市地方標(biāo)準(zhǔn)DB 1301/T 2382017水貂阿留申病碘凝集試驗(yàn)操作規(guī)程2017-10-10 發(fā)布2017-11-30 實(shí)施石家莊市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB 1301/T 2382017前言本標(biāo)準(zhǔn)按照 GB/T 1.1-2009 給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由石家莊市農(nóng)業(yè)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：石家莊市農(nóng)林科學(xué)研究院。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：任二軍、劉潔、劉進(jìn)軍、李偉、韓學(xué)良、榮敏、涂劍峰、邵西群、邢立民。DB 1301/T 2382017水貂阿留申病碘凝集試驗(yàn)操作規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水貂阿留申病碘凝集試驗(yàn)操作過(guò)程中材料準(zhǔn)備、血樣采集及碘凝集試驗(yàn)操作技術(shù)等內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水貂養(yǎng)殖場(chǎng)

2、阿留申病的初篩。術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。阿留申病阿留申病又稱漿細(xì)胞增多癥，是由一種主要侵害水貂免疫細(xì)胞的阿留申病毒（ADV）引起的，導(dǎo)致自身免疫系統(tǒng)紊亂、緩慢發(fā)展的進(jìn)行性衰弱的疾病，同時(shí)并發(fā)強(qiáng)烈的自身免疫的慢性傳染性疾病。材料準(zhǔn)備及血樣采集材料毛細(xì)采血管（20 uL肝素鈉抗凝的毛細(xì)玻璃管，長(zhǎng)度75 mm，直徑1.55 mm）、玻璃板（10 cm10 cm）、毛細(xì)管盒、記號(hào)筆、標(biāo)簽紙、指甲刀、工業(yè)橡皮泥、10 uL移液器、牙簽。血樣采集采血時(shí)間每年結(jié)合選種工作采血3次，采血次序及時(shí)間見表1。表1采血次序及時(shí)間表采血次序采血時(shí)間第1次分窩初選時(shí)第2次9-11月份終選時(shí)第3次翌年2月份

3、配種前編號(hào)將水貂以12只為一組與毛細(xì)管盒一一對(duì)應(yīng)進(jìn)行編號(hào)，編號(hào)方法為棟舍號(hào)+籠號(hào)。采血1DB 1301/T 2382017水貂保定保定者戴上棉手套從籠內(nèi)抓取水貂，在該籠的產(chǎn)箱上進(jìn)行保定。血樣采集術(shù)者一手固定水貂后爪，另一手取滅菌的指甲刀在趾甲與趾墊的結(jié)合處剪斷趾甲，棄去第一滴血，然后將毛細(xì)采血管一端輕觸血滴，待血流入管的2/3處，用手指堵住毛細(xì)采血管的上端，另一端垂直插入工業(yè)用橡皮泥進(jìn)行封口。血樣保存采血管按照編號(hào)順序放入毛細(xì)管盒中，將毛細(xì)管封口端朝下豎直放置，如果不能及時(shí)檢測(cè)，宜放置在冰箱中保存。備檢血漿的制備采集的血樣可用毛細(xì)采血管專用離心機(jī)2500 rpm3000 rpm離心10 min

4、，也可在室溫或4 冰箱內(nèi)放置過(guò)夜析出血漿。溶血的血樣應(yīng)棄去，重新采集。碘凝集試驗(yàn)試劑魯戈氏碘液使用市售魯戈氏碘液，保存方法按說(shuō)明書要求操作。自配試劑稱取碘化鉀4 g、碘顆粒2 g、蒸餾水30 mL，先將碘化鉀用少量的蒸餾水溶解于玻璃燒杯中，再加入碘顆粒，震蕩使其充分溶解，最后加入剩余的蒸餾水，充分混勻，放置于棕色瓶，靜置24 h即可使用，4 冰箱保存。操作方法將干凈的玻璃板平放，劃成24個(gè)方格，橫數(shù)4個(gè)格，縱數(shù)6個(gè)格，每格2.5 cm1.5 cm，用砂輪輕劃毛細(xì)采血管血漿與紅細(xì)胞界面，掰斷毛細(xì)管，用10 uL的移液器將血漿吹出，按順序滴到玻璃方格內(nèi)，每滴血漿旁加10 uL的碘凝集試劑，然后用牙簽將二者混勻，每個(gè)血樣更換一個(gè)牙簽。結(jié)果判定混勻后，1分鐘內(nèi)進(jìn)行觀察，結(jié)果判定見表2。表2碘凝集試驗(yàn)結(jié)果判定序號(hào)現(xiàn)象結(jié)果判定結(jié)果記錄1出現(xiàn)顯著的棕色不規(guī)則絮狀或顆粒狀沉淀物強(qiáng)陽(yáng)性+2有明顯顆粒狀沉淀物陽(yáng)性+3有微弱的顆粒狀沉淀物陽(yáng)性+2DB 1301/T 23820174