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1、體液學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制體液學(xué)檢驗(yàn)范疇體液學(xué)檢驗(yàn)包括:尿液、腦脊液、胸腹水等各種體液及糞便的常規(guī)檢驗(yàn)及形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)等。體液檢驗(yàn)質(zhì)量控制的技術(shù)要求1 、人員2、設(shè)施和環(huán)境:2.3、如使用尿干化學(xué)試條,其存放條件(如濕度)應(yīng)符合要求。用以保存臨床樣品和試劑的設(shè)施應(yīng)設(shè)置目標(biāo)溫度和允許范圍,并記錄。應(yīng)有溫濕度失控時(shí)的處理措施,并記錄。2.6、應(yīng)依據(jù)所用分析設(shè)備和實(shí)驗(yàn)過程的要求,制定環(huán)境溫濕度控制要求并記錄。應(yīng)有溫濕度失控時(shí)的處理措施并記錄。實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑和耗材3.1.5 設(shè)備故障后,應(yīng)首先分析故障原因,如果設(shè)備故障可能影響了方法學(xué)性能,故障修復(fù)后,可通過以下合適的方式進(jìn)行相關(guān)的檢測(cè)、驗(yàn)證: (a) 可校準(zhǔn)
2、的項(xiàng)目實(shí)施校準(zhǔn)驗(yàn)證,必要時(shí),實(shí)施校準(zhǔn); (b) 質(zhì)控物檢驗(yàn); (c) 與其他儀器或方法比對(duì); (d) 以前檢驗(yàn)過的樣品再檢驗(yàn)。4 、檢驗(yàn)前過程4.2、應(yīng)針對(duì)不同類型的體液樣品規(guī)定不同的采集方法和要求。-對(duì)自行采集樣品的患者,實(shí)驗(yàn)室或相關(guān)醫(yī)護(hù)人員應(yīng)指導(dǎo)其正確采集樣品。-有特殊采集要求的樣品,應(yīng)在醫(yī)生或護(hù)士的協(xié)助下完成采集。4.5、所有體液樣品應(yīng)用密閉容器運(yùn)送。5、 檢驗(yàn)過程5.1.2、尿液干化學(xué)分析儀性能驗(yàn)證的內(nèi)容至少應(yīng)包括陰性和陽性符合率;-尿液有形成分分析儀性能驗(yàn)證的內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、攜帶污染率和可報(bào)告范圍。檢驗(yàn)過程5.1.3、如可行,尿液樣品應(yīng)全部進(jìn)行顯微鏡有形成分檢查;如使用自動(dòng)化儀
3、器做有形成分篩檢,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定尿液有形成分分析的顯微鏡復(fù)檢程序,并進(jìn)行確認(rèn): (a) 明確顯微鏡復(fù)檢程序制定的依據(jù)、方法; (b) 規(guī)定驗(yàn)證方法及標(biāo)準(zhǔn),對(duì)復(fù)檢程序進(jìn)行驗(yàn)證,假陰性率應(yīng)5%。5.5.2 應(yīng)至少使用20份健康人尿樣品驗(yàn)證尿液有形成分分析儀檢驗(yàn)項(xiàng)目的生物參考區(qū)間。檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的保證6.3.1、 應(yīng)按照CNAS-RL02 能力驗(yàn)證規(guī)則的要求參加相應(yīng)的能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評(píng)。應(yīng)保留參加能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)的結(jié)果和證書。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或指定人員應(yīng)監(jiān)控能力驗(yàn)證/室間質(zhì)評(píng)的結(jié)果,并在結(jié)果報(bào)告上簽字。檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的保證6.4、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部結(jié)果比對(duì)應(yīng)符合如下要求: (a)檢驗(yàn)同一項(xiàng)目的不同方法、不同檢測(cè)
4、系統(tǒng)應(yīng)至少6個(gè)月進(jìn)行結(jié)果的比對(duì): 尿液分析儀的比對(duì)應(yīng)在確認(rèn)分析系統(tǒng)的有效性及其性能指標(biāo)符合要求后,至少使用5份臨床樣品(含正常和異常水平)進(jìn)行比對(duì); -定性檢測(cè)偏差應(yīng)不超過1個(gè)等級(jí),且陰性不可為陽性,陽性不可為陰性; -尿液干化學(xué)分析儀、尿液有形成分分析儀如型號(hào)不同,則不宜比對(duì); 尿液檢驗(yàn)質(zhì)量控制 分析前質(zhì)量控制 分析中質(zhì)量控制 分析后質(zhì)量控制 分前質(zhì)量控制 病人準(zhǔn)備 標(biāo)本采集 標(biāo)本運(yùn)送 檢驗(yàn)流程的確定 質(zhì)量監(jiān)管 標(biāo)本采集前病人的準(zhǔn)備 告知病人檢測(cè)時(shí)間和方法 1。留尿時(shí)間:清晨第一次尿?yàn)橐恕?急診病人可隨時(shí)留尿 2。留尿方法:清洗外陰,棄去前段尿,留中 段尿,避免經(jīng)血,白帶,糞便等混入 3。食
5、物對(duì)結(jié)果的影響 過量飲水尿液稀釋,致假陰性 高蛋白飲食PH降低、NIT假陰性 提醒病人注意控制藥物的影響:化驗(yàn)單應(yīng)注明藥物對(duì)部分結(jié)果的影響 PH:碳酸氫鈉、乙酰唑胺等 糖:皮質(zhì)醇、阿司匹林、對(duì)氨基水楊酸等致假陽性; Vit C、左旋多巴、非那宗吡啶等致假陰性。 酮體:水楊酸鹽、苯乙雙胍等致假陽性。 蛋白:奎寧、等致假陽性、大量青霉素致假陰性。 隱血:大量Vit C致假陰性。 白細(xì)胞:呋喃妥因,慶大,頭孢氨芐等致假陽性; 管型:影響腎功能的抗生素、抗結(jié)核藥、抗腫瘤藥、 麻醉藥、疫苗、類毒素、免疫血清等均可能引 起假陽性。尿液標(biāo)本的收集 留尿容器的要求 1 新鮮的尿是分析的質(zhì)量保證 2 收集標(biāo)本的
6、容器要求干凈 3 標(biāo)本容器上應(yīng)有標(biāo)簽:姓名、科室、 病床、 收集的時(shí)間等 4 容器應(yīng)為一次性用品 5 容器應(yīng)為50ml以上不同方式所采尿標(biāo)本的檢測(cè)應(yīng)用范圍尿標(biāo)本采尿的方式適用范圍不適用范圍中段尿第一次晨尿細(xì)菌檢驗(yàn)試帶過篩亞硝酸鹽試驗(yàn)?zāi)虺猎R檢蛋白檢驗(yàn)臨床化學(xué)檢驗(yàn)中段尿第二次晨尿試帶過篩亞硝酸鹽還原試驗(yàn)葡萄糖,蛋白定量隨意尿餐后尿:測(cè)尿糖尿細(xì)菌檢查膀胱穿刺尿細(xì)菌學(xué)檢查尿沉渣鏡檢定量標(biāo)本定時(shí)尿,3h,12h,24h尿沉渣人工定量尿細(xì)菌檢查臨床化學(xué)檢驗(yàn)來源: Roche 尿液基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)診斷 2003版, P9.德文 Peter Hagemann, Horet Kimling ,Bernd Zawta
7、 等 ,顧可梁 翻譯男性患者尿標(biāo)本采集1、留尿前先洗手2、指導(dǎo)未行包皮切除的患者褪上包皮,露出尿道口 用消毒清潔的小布巾清潔陰莖頭,從尿道口開始向 上清潔3、前段尿去掉,采集中段尿到容器中,后段排掉4、避免前列腺液或精液混入。嬰幼兒尿標(biāo)本采集 國(guó)外推薦用尿標(biāo)本采集袋 分開兒童的雙腿 保證會(huì)陰部清潔、干燥、無黏液、勿施粉、油等 移去防護(hù)紙,拉緊皮膚,將采集袋緊貼于會(huì)陰/陰莖處 定時(shí)(如每15min)察看容器 將無污染尿液倒入采集杯中送檢 尿液標(biāo)本的種類 1、晨尿:清晨第一次尿?yàn)槌磕?,這種尿標(biāo)本較為濃縮,可用于腎臟濃縮能力評(píng)價(jià),有利于尿液形態(tài)學(xué)和化學(xué)成分分析。 2、隨機(jī)尿:即隨時(shí)留取的尿,標(biāo)本新鮮
8、,適合門診急診患者的尿液檢查。但此尿液易受多種因素影響,使尿檢成分濃度減低或增高,造成結(jié)果對(duì)比的混亂。 3、負(fù)荷尿:為特殊需要檢查一定負(fù)荷后的尿如葡萄糖負(fù)荷后的糖耐量試驗(yàn),運(yùn)動(dòng)負(fù)荷后的運(yùn)動(dòng)后血尿,起立活動(dòng)后的直立性蛋白尿等。 7、3小時(shí)尿;收集上午6-9時(shí)時(shí)段內(nèi)的尿液, 檢查尿液有形成分排泄率 8、12小時(shí)尿:晚8時(shí)至次晨8時(shí)之內(nèi)的12小時(shí) 全部尿液,用于愛迪氏計(jì)數(shù) 9、24小時(shí)尿:患者上午8時(shí)排尿,此后收集各 次排出的尿液,至次日上午8時(shí)最后一次排 尿的全部尿液 特殊試驗(yàn)?zāi)?1、中段尿:適用于尿培養(yǎng)。先用肥皂和清水 清洗外陰及尿道口,無菌紗布擦干,在不 間斷排尿過程中棄去前段尿,以無菌帶蓋
9、杯留取中段尿 2、導(dǎo)管尿:患者發(fā)生尿潴留或排尿困難時(shí), 由醫(yī)護(hù)人員用導(dǎo)尿管取尿 3、病情需要膀胱穿刺取尿 注意事項(xiàng) 1、最好使用一次性尿杯 2、留尿后2小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn),否則應(yīng)冷藏, 測(cè)試前需復(fù)溫。 3、24小時(shí)尿測(cè)尿酸,肌酐,蛋白,鉀鈉 氯等成分按5毫升/升的尿量加入甲苯 4、測(cè)腎上腺皮質(zhì)激素,香草扁桃酸,鈣 磷等成分按1毫升/升尿加入濃鹽酸。尿液分析流程(1)手工方法 尿液樣本尿液干化學(xué)離心 鏡檢所有樣本方法學(xué)優(yōu)點(diǎn):1、尿液分析流程完整2、尿有形成分分析方法符合標(biāo)準(zhǔn)化要求3、方法容易普及方法學(xué)缺點(diǎn):1、工作效率低2、無法滿足高峰時(shí)或較大樣本的檢測(cè)需求3 干化學(xué)法存在較多假陽性,假陰性尿液分析流程
10、(2) 尿液樣本自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀離心 鏡檢計(jì)數(shù)板 陽性陰性方法學(xué)優(yōu)點(diǎn):1、快速篩選后,縮短了報(bào)告時(shí)間2、方法比較容易普及方法學(xué)缺點(diǎn):1、干化學(xué)有形成分的檢測(cè)存在缺陷2、干化學(xué)作為篩選方法,假陽性、假陰性過高3、復(fù)檢率高,同時(shí)又容易漏檢尿液分析流程(3) 全自動(dòng)尿液干化學(xué)尿有形成分圖像識(shí)別系統(tǒng)圖像瀏覽,修正結(jié)果DataData報(bào)告方法學(xué)優(yōu)點(diǎn)圖像易于保存、方法比較容易普及方法學(xué)缺點(diǎn)檢測(cè)流程不標(biāo)準(zhǔn)顯微攝像鏡頭只能隨機(jī)地采到流動(dòng)樣本中通過該焦點(diǎn)的細(xì)胞,能對(duì)所有目標(biāo)采集清晰圖像進(jìn)行形態(tài)學(xué)識(shí)別分析,定量不準(zhǔn)確,隨意性大變形、破碎、不同角度通過的細(xì)胞不能識(shí)別篩選速度慢、無質(zhì)控尿液分析流程(4) 全自動(dòng)尿
11、液干化學(xué)全自動(dòng)尿有形成分UF顯微鏡確認(rèn)LISDataDataDataOrder報(bào)告方法學(xué)優(yōu)點(diǎn)1、符合標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)流程,規(guī)范實(shí)驗(yàn)室操作2、檢測(cè)效率高3、有效篩選,防止漏檢4、質(zhì)控體系(室內(nèi)質(zhì)控室間質(zhì)評(píng))保障質(zhì)量控制5、提供新的臨床參數(shù)(紅細(xì)胞形態(tài)信息、尿路感染信息),附加值高方法學(xué)缺點(diǎn) 無法保存圖像 分析中質(zhì)量控制: 標(biāo)本前處理 物理檢查 化學(xué)項(xiàng)目分析 有形成分檢查 質(zhì)量監(jiān)控 標(biāo)本的接收 1、核對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單的患者信息與標(biāo)本是否符 符合 2、混有雜物或與檢驗(yàn)?zāi)康牟环臉?biāo)本退回, 并注明原因 3、標(biāo)本量過少的應(yīng)重留 4、留12或24小時(shí)尿做化學(xué)成分檢測(cè)的標(biāo)本, 未放防腐劑的應(yīng)重留 尿液檢查的內(nèi)容: 1
12、、物理檢查:外觀,顏色,濁度,比密。 2、化學(xué)成分檢測(cè):PH,膽紅素,尿膽原,葡 萄糖,蛋白,酮體,亞硝酸鹽 3、有形成分檢測(cè):白細(xì)胞,紅細(xì)胞,上皮細(xì) 胞,管型,結(jié)晶,寄生蟲,細(xì)菌,真菌 一、物理檢查 尿液比密: 折射計(jì)法:尿折射率和尿比密有較好相關(guān)性, 二者相關(guān)系數(shù)為0.98,尿折射率和尿滲量在正 常及基本正常范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù)為0.97。因此 在正常情況下,尿比密的末二位數(shù)*40=尿滲量 使用折射儀方法簡(jiǎn)單,精密度和準(zhǔn)確度較比密 計(jì)高而且標(biāo)本用量只要1-2滴(也可用于測(cè)其 他體液比密),解決了尿少病人無法測(cè)比密的 實(shí)際困難。是目前我國(guó)測(cè)比密的確證方法。 原理: 入射角為 90度的光線進(jìn)入另一
13、介質(zhì)(密度不 同)時(shí),被折射的角度稱為臨界角,在終端觀 察時(shí),依折射臨界角的大小,可見明暗視物的 改變,進(jìn)而求出相對(duì)折射率。 操作:詳見說明書 附注: 1、折射計(jì)的校準(zhǔn) 用10克/升,40克/升,100 克/升蔗糖溶液校正折射儀,它們的折射率 分別為1.3344,1.3388,1.3479 2、混濁尿會(huì)影響結(jié)果判讀,加熱透明后再測(cè) 比密計(jì)法 原理:物質(zhì)的重量與同體積的純水,在一定溫 度下(4度,15.5度)相比,得到的密度為該 物質(zhì)的比密(俗稱比重) 操作: 1。充分混勻尿液后,沿管壁緩慢倒入小量筒 中,如有氣泡可用吸管或吸水紙吸去 2。比密計(jì)放入量筒中,使懸浮于中央,勿觸 及筒壁或筒底。 3
14、。比密計(jì)停穩(wěn)后,讀取與尿液凹面相切的刻 度,即為被測(cè)尿液的比密 1、比密計(jì)的校準(zhǔn):購(gòu)置的新比密計(jì)用純水在 規(guī)定溫度下觀察比密是否準(zhǔn)確。蒸餾水 15.5度應(yīng)為1.000,8.5克/升氯化鈉夜在 15.5度應(yīng)為1.006,50克/升氯化鈉液在 15.5度應(yīng)為1.035 2 溫度的影響:不在指定溫度下測(cè)定,每高 于指定溫度(一般以15 度為準(zhǔn))3度時(shí), 比密應(yīng)加0.001,每低3度減去0.001。 3、尿內(nèi)容物的影響:尿內(nèi)含糖,蛋白可增高 比密。鹽類析出比密下降,應(yīng)待鹽類溶解 后測(cè)比密。尿素分解比密下降。尿中含造 影劑,可使比密大于1.050 4、目前比密計(jì)已不再是測(cè)定尿比密正確方法 二 化學(xué)成分檢
15、查 1、尿液分析儀的原理:尿液分析儀通常由機(jī) 械系統(tǒng),光學(xué)系統(tǒng),電路系統(tǒng)三部分組成。 機(jī)械系統(tǒng)的主要作用是將待測(cè)的試帶 傳送到預(yù)定的位置,檢測(cè)后將試帶傳送到 廢物盒中 光學(xué)系統(tǒng)通常包括光源,單色處理,光電 處理三部分。光線照射到反應(yīng)表面產(chǎn)生反射 光,反射光的強(qiáng)度與各個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)顏色呈正 比。不同強(qiáng)度的反射光再經(jīng)光電轉(zhuǎn)換為電信號(hào) 進(jìn)行處理 電路系統(tǒng)將轉(zhuǎn)換后的電信號(hào)放大,經(jīng)摸/ 數(shù)轉(zhuǎn)換后送CPU處理,計(jì)算出最終檢測(cè)結(jié)果然 后將結(jié)果輸出到打印機(jī)打印。 2、尿干化學(xué)試帶測(cè)試原理 PH :采用酸鹼指示劑法,測(cè)試模塊 含甲基紅PH 4.6-6.2 和溴麝香草 芬藍(lán)PH6.0-9.兩種指示劑,在PH 4.5
16、-9.0的范圍內(nèi),顏色由橙紅經(jīng) 黃綠到蘭色 比重 :測(cè)試模塊含有多聚電解質(zhì)甲氧乙烯順 丁烯二酸,酸鹼指示劑(溴麝香草芬藍(lán))及緩 沖物。經(jīng)過處理的多聚電解質(zhì)的PKA改變與尿 液中離子濃度相關(guān)。尿比重偏高時(shí),尿液中所 含鹽類成分較多,試劑帶中電解質(zhì)多聚體釋放 出的H+增多,溴麝香草芬藍(lán)呈現(xiàn)黃色尿比重偏 低時(shí),尿中含鹽類成分較少,試劑帶試劑帶中 電解質(zhì)多聚體釋放出的H+減少,溴麝香草芬藍(lán) 呈現(xiàn)藍(lán)色,進(jìn)而換算成尿液比重值。 干化學(xué)測(cè)試比重的局限性:干化學(xué)尿比重 測(cè)定的變化范圍PH6.27.0。當(dāng)尿液PH大于 7.0時(shí),尿液中會(huì)存在OH-,將中和掉部分由尿 液離子成分使電解質(zhì)多聚體釋放出的H+,致使 與
17、酸堿指示劑反應(yīng)的H+減少,造成結(jié)果偏低。 因此,當(dāng)PH 大于7.0時(shí),應(yīng)在測(cè)定結(jié)果上增加 0.005作為由于鹼性尿損失的補(bǔ)償 干化學(xué)尿比重測(cè)定結(jié)果表達(dá)值的變化范圍 在1.0001.030,間隔值為0.005,不能反映 較小的比重變化。多用于過高或過低尿比重病 人篩選,比重在1.0001.004的新生兒尿液不 宜使用此法測(cè)比重 尿糖: 試劑帶測(cè)試膜快含有葡萄糖氧化酶,過氧 化物酶,色素原等。葡萄糖氧化酶促使尿液中 的葡萄糖與O2作用生成葡萄糖酸內(nèi)酯及H2O2, H2O2又促使過氧化物酶釋放出新生態(tài)氧,使色 素原呈現(xiàn)不同的顏色變化。常見的色素原有鄰 聯(lián)甲苯胺,碘化鉀等。 葡萄糖氧化酶的酶促反應(yīng),只
18、與葡萄糖反應(yīng),因此較班氏法測(cè)尿糖有更高的特異性和靈敏度。干化學(xué)陰性結(jié)果,班氏法有可能呈現(xiàn)陽性結(jié)果 ():可疑 含糖量小于6mmol/L (+):陽性 含糖量628mmol/L (+):陽性 含糖量2855mmol/L (+):陽性 含糖量55110mmol/L (+):陽性 含糖量大于110mmol/L 尿液在低葡萄糖濃度(14mmol/L)時(shí),維生素 C與測(cè)試帶的試劑發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng),產(chǎn)生 假陰性反應(yīng)。排除方法是先將尿液煮浮幾分鐘 再進(jìn)行測(cè)試 尿蛋白: 試劑帶測(cè)試模塊區(qū)含有靈敏的蛋白顯色 劑酸鹼指示劑 四溴酚藍(lán)和檸檬酸緩沖物及 表面活性劑。當(dāng)尿液中含有蛋白質(zhì)時(shí),由于蛋 白質(zhì)離子對(duì)指示劑相反
19、電荷的吸引而生成復(fù)合 物,引起指示劑的進(jìn)一步電離,當(dāng)超緩沖范圍 時(shí),指示劑發(fā)生顏色變化。根據(jù)尿液中蛋白質(zhì) 含量高低,試劑膜塊發(fā)生由黃經(jīng)綠到藍(lán)的顏色 變化 尿液PH是影響尿蛋白測(cè)試結(jié)果的重要因素 不管尿液是由于保存不當(dāng)引起PH大的變化,還 是尿液本身過酸,過鹼都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。尿 液PH大于9,出現(xiàn)假陽性,PH小于3,出現(xiàn)假陰 性結(jié)果。 尿蛋白干化學(xué)法對(duì)蛋白質(zhì)不同成分的敏感 性不一樣,對(duì)白蛋白敏感,球蛋白不敏感。有 專家經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí),尿中球蛋白為4000mg/升以 下時(shí)干化學(xué)法結(jié)果為陰性,只有達(dá)到5500mg/ 升時(shí),才出現(xiàn)可疑反應(yīng)。白,球蛋白比值為1: 2 的蛋白尿,蛋白濃度2000mg/升時(shí)才
20、會(huì)出現(xiàn) 陽性。干化學(xué)測(cè)定球蛋白的敏感性僅為白蛋白 的 1/501/100。 對(duì)腎臟患者在疾病發(fā)展過程中需要系統(tǒng)觀 察尿蛋白含量的病例,最好使用磺柳酸法或雙 縮脲法進(jìn)行定性和定量實(shí)驗(yàn)。 研究證明,多種物質(zhì)包括藥物致干化學(xué)測(cè) 定尿蛋白呈假陽性或假陰性。滴注青霉素250 萬單位/2小時(shí),320萬單位/3小時(shí),480萬單位 /5小時(shí),可對(duì)干化學(xué)測(cè)定尿蛋白產(chǎn)生假陰性。 酮體: 酮體是脂肪分解代謝過程中的代謝產(chǎn)物。 尿液中的酮體包括乙酰乙酸,-羥丁酸,丙 酮三種形式。試劑帶測(cè)試模塊區(qū)主要含有亞硝 基鐵氰化鈉。在鹼性條件下,亞硝基鐵氰化鈉 可與尿液中的乙酰乙酸,丙酮起反應(yīng)產(chǎn)生紫色。 與 -羥丁酸不發(fā)生反應(yīng)
21、干化學(xué)法測(cè)試酮體的局限性: 干化學(xué)法對(duì)酮體各組成成分敏感性不一致 對(duì)乙酰乙酸敏感性為50100mg/升,丙400 700mg/升,與-羥丁酸不發(fā)生反應(yīng)。由于不 同病因引起的酮癥其酮體成分不一,不同病程 酮體成分變化,均會(huì)使檢測(cè)結(jié)果與實(shí)際總的酮 體量有所差異。 在糖尿病酮癥酸中毒早期,酮體的主要成 分是-羥丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏,此時(shí) 測(cè)定結(jié)果可導(dǎo)致對(duì)總酮體量的估計(jì)不足。在糖 尿病酮癥酸中毒癥狀緩解后,乙酰乙酸含量反 而比急性初始期含量高,應(yīng)注意病程發(fā)展對(duì)實(shí) 驗(yàn)結(jié)果影響。 膽紅素: 試劑帶測(cè)試模塊區(qū)主要含有2,4-二氯苯 胺重氮鹽,緩沖劑及其他表面活性物質(zhì)。在強(qiáng) 酸性介質(zhì)里直接膽紅素與二氯笨胺
22、重氮鹽起偶 聯(lián)反應(yīng),生成紅色復(fù)合物。 尿膽原: 試劑帶測(cè)試模塊區(qū)主要含有對(duì)二甲氨基苯 甲醛,緩沖液及其它表面活性物質(zhì)。在強(qiáng)酸性 條件下,尿膽原和二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反 應(yīng),生成櫻紅色縮合物 隱血: 試劑帶測(cè)試模塊區(qū)主要含有過氧化氫枯 烯,四甲替聯(lián)苯胺,檸檬酸,檸檬酸鹽等。尿 液中的血紅蛋白或其破壞釋放的游離血紅蛋白 均含有亞血紅素,它具有類似過氧化物酶作用 在與過氧化氫枯烯反應(yīng)過程中,能夠使無色的 四甲替聯(lián)苯胺變化成蘭色的鄰四甲替聯(lián)苯胺 白細(xì)胞: 試劑帶測(cè)試模塊區(qū)主要含有吲哚酚酯,重 氮鹽及其他物質(zhì)。粒細(xì)胞中存在酯酶,它能作 用于膜塊中的吲哚酚酯,使其產(chǎn)生吲哚酚,吲 哚酚與重氮鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生
23、紫色縮合物,顏色 的深淺與細(xì)胞的多少呈比例關(guān)系。 本方法只能檢測(cè)尿中完整的及溶解的中性 粒細(xì)胞,與淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞不起反應(yīng)。 干化學(xué)法是檢測(cè)細(xì)胞漿內(nèi)含物來判別細(xì)胞 的有無,如通過特異或非特異性酯酶檢測(cè)白細(xì) 胞,通過血紅蛋白的過氧化物酶樣反應(yīng)檢測(cè)紅 細(xì)胞,因此實(shí)際工作中可能存在以下問題: 1、腎移植病人發(fā)生排異反應(yīng)時(shí),尿中以淋巴 細(xì)胞為主,會(huì)出現(xiàn)干化學(xué)法陰性結(jié)果,此 類病人應(yīng)以顯微鏡檢查為準(zhǔn) 2、尿液中污染甲醛,或高濃度膽紅素,或使 用某些藥物如呋喃妥因時(shí),尿蛋白大于或 等于5克/升,或尿液中含有大量頭孢氨芐 慶大霉素等藥物時(shí),干化學(xué)法檢測(cè)的白細(xì) 胞,紅細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生假陽性 3。尿液中含有對(duì)熱不穩(wěn)
24、定的酶,肌紅蛋白或 菌尿,可引起紅細(xì)胞的干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果 的假陽性 4。由于尿液在膀胱儲(chǔ)存時(shí)間過長(zhǎng)或標(biāo)本放置 時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致白細(xì)胞破壞,酯酶釋放到尿 液中,可造成干化學(xué)法陽性,鏡檢陰性的 現(xiàn)象 5。由于腎病患者的紅細(xì)胞在腎臟或泌尿道破 壞,或比重過低,尿PH偏高,均易造成紅 細(xì)胞破壞,血紅蛋白逸出尿中,可造成干 化學(xué)法陽性,鏡檢陰性的現(xiàn)象 對(duì)于干化學(xué)法和顯微鏡檢測(cè)白細(xì)胞,紅細(xì) 胞出現(xiàn)的不符合現(xiàn)象,要結(jié)合不同的實(shí)驗(yàn)原理 病情綜合分析,動(dòng)態(tài)觀察,合理解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果 亞硝酸鹽: 試劑帶測(cè)試模塊區(qū)主要含有對(duì)胺基苯砷酸 (或氨基磺酸),N-萘基乙二胺物質(zhì)。當(dāng)尿液 中感染的具有硝酸鹽還原酶的細(xì)菌增加時(shí),如 大
25、腸桿菌可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,并可將 膜塊中的胺基苯砷酸重氮化而成重氮鹽,以此 重氮鹽再與N-萘基乙二胺偶聯(lián),使膜快呈現(xiàn)紅 色變化 尿亞硝酸鹽實(shí)驗(yàn),是細(xì)菌性尿路感染的指 標(biāo),陽性結(jié)果的產(chǎn)生取決于三個(gè)條件 1 尿中的致病菌含有硝酸鹽還原酶 2 尿液在膀胱內(nèi)有足夠的停留時(shí)間 3 體內(nèi)適量硝酸鹽的存在 引起尿路感染的細(xì)菌主要是大腸桿菌,約 占70%,還有部分其他陰性桿菌,這些菌含硝 酸鹽還原酶。糞腸球菌引起的尿路感染約10%- 15%,此菌不產(chǎn)生硝酸鹽還原酶。此實(shí)驗(yàn)診斷 尿路感染的符合率80% 干化學(xué)尿液分析的質(zhì)量控制 尿液分析儀: 1 仔細(xì)閱讀儀器說明書,了解儀器的測(cè)試原 理,操作步驟,校準(zhǔn)方法
26、,儀器保養(yǎng) 2 每天堅(jiān)持開機(jī)后將儀器隨機(jī)所帶的校準(zhǔn)帶進(jìn) 行測(cè)試,觀察測(cè)定結(jié)果與校準(zhǔn)帶標(biāo)示結(jié)果是 否一致,只有完全一致才能證明儀器處于正 常狀態(tài) 3 保持儀器潔凈,如尿液污染立即清除 4 定期對(duì)儀器進(jìn)行維修,包括光學(xué),機(jī)械部分 測(cè)試帶的質(zhì)量控制 1 用指控物測(cè)試結(jié)果,在控,開始進(jìn)行標(biāo)本 測(cè)定如失控進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn) 2 檢查指控物是否失效,污染,是否正確保 存。如是,使用新的指控物重新第一步實(shí) 驗(yàn)。如不是,重復(fù)第一步實(shí)驗(yàn)。重復(fù)實(shí)驗(yàn) 結(jié)果在控,開始進(jìn)行標(biāo)本測(cè)定。如仍失控 進(jìn)行第三步實(shí)驗(yàn) 3 配制新的質(zhì)控物重復(fù)第一步實(shí)驗(yàn),如測(cè)試 結(jié)果在控,丟棄舊的質(zhì)控物開始進(jìn)行標(biāo)本 測(cè)試如仍失控進(jìn)行第四步實(shí)驗(yàn) 4 打開
27、同一批號(hào)的新測(cè)試帶,使用新的指控 物,重復(fù)第一步實(shí)驗(yàn),如在控,丟棄舊的 失效的測(cè)試帶開始進(jìn)行標(biāo)本測(cè)定。如仍失 控,用另一批號(hào)的新測(cè)試帶重復(fù)第一步驟 如在控,丟棄全部舊的試劑帶,用新的批 號(hào)試劑帶進(jìn)行標(biāo)本測(cè)試。如仍失控需對(duì)儀 器檢修。 依據(jù)上述質(zhì)控步驟進(jìn)行質(zhì)控的同時(shí),應(yīng)掌 握質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)。每次使用正常和異常兩種濃度 質(zhì)控物進(jìn)行實(shí)驗(yàn),質(zhì)控物的結(jié)果由正常變成異 ?;蛴僧惓W兂烧?,均提示失控。質(zhì)控物的 測(cè)試結(jié)果在靶值的到+為正常。否則為失控 尿液干化學(xué)檢查僅是一個(gè)過篩手段,不受人為因素的影響,在標(biāo)本量巨大時(shí),顯示出快速,客觀的優(yōu)勢(shì)。 目前一些單位僅用尿干化學(xué)檢測(cè)作為尿常規(guī)檢查的全部?jī)?nèi)容,不報(bào)告尿液顏色
28、,透明度更不做尿沉渣檢查,這是非常不負(fù)責(zé)任的做法 不少單位將熱敏紙報(bào)告直接貼在報(bào)告單上 這種做法有很大隱患,熱敏紙上的字跡遇水消 失,幾個(gè)月后字跡自行消退,并且由于報(bào)告者 簽字不在熱敏紙上,易引起糾紛干化學(xué)過篩應(yīng)用范圍的局限性1 腎科及泌尿科病人尿液不應(yīng)用干化學(xué)法代替顯微鏡檢查2 鏡檢結(jié)石、結(jié)晶、腫瘤細(xì)胞作為診斷依據(jù)或觀察療效時(shí), 不宜用干化學(xué)方法過篩3 由于干化學(xué)分析干擾因素較多,且不可避免的有一定的假 陰性率,因此要結(jié)合臨床癥狀判斷結(jié)果,決不可只看干化 學(xué)分析結(jié)果,忽視鏡檢4 尿液的外觀特別是顏色、濁度與尿沉渣有一定相關(guān)關(guān)系, 當(dāng)尿液外觀異常時(shí),應(yīng)注意顯微鏡檢查77 尿沉渣檢查 定量檢查推
29、薦方法: 1、使用一次性潔凈尿杯 2、使用不易破碎的一次性離心管 3、容器,離心管,玻片必須能標(biāo)記 4、使用尿沉渣計(jì)數(shù)板 5、采用有蓋的水平離心機(jī),機(jī)內(nèi)溫度近 可能低于25度,半徑22.5cm水平離 心機(jī)每分鐘12001300轉(zhuǎn) 6、有條件的實(shí)驗(yàn)室可使用各類全自動(dòng)的 尿有形成分分析儀,但此類儀器必須 經(jīng)權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)可尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議 全國(guó)臨床檢驗(yàn)?zāi)蛞簷z查標(biāo)準(zhǔn)化方案 建立依據(jù):JCCLS、NCCLS、ECCLS 報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)化:規(guī)定尿沉渣結(jié)果必須報(bào) xxxx /ul 檢測(cè)時(shí)間:2小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。 檢查內(nèi)容:RBC、WBC,管型,結(jié)晶,細(xì)菌,寄生蟲(或蟲卵)、真菌、精子、粘液等 尿沉渣檢查應(yīng)建立質(zhì)
30、量保證體系衛(wèi)生部臨檢中心,中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)血液學(xué)與體液學(xué)檢驗(yàn)專家委員會(huì) (2002年1月28-2月1日,廣州)全自動(dòng)尿沉渣分析儀 目前在國(guó)內(nèi)外已推出了能對(duì)尿有形成分進(jìn)行自動(dòng)分析的儀器,這些儀器多采用流式細(xì)胞術(shù)和影象分析術(shù)的原理,已逐步成為尿液有形成分檢查的篩查實(shí)驗(yàn) 原理:先用熒光染料對(duì)尿中各類有形成分進(jìn)行染色,然后經(jīng)激光照射每一有形成分發(fā)出熒光強(qiáng)度,散射光強(qiáng)度及電阻抗大小進(jìn)行綜合分析得出紅細(xì)胞,白細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管型和細(xì)菌定量數(shù)據(jù) 操作:按儀器說明書進(jìn)行 用配套的質(zhì)控品在檢測(cè)標(biāo)本前,進(jìn)行質(zhì)控測(cè)試 附注: 1、自動(dòng)化方法采用不離心新鮮尿標(biāo)本 2、收集標(biāo)本的容器不能有任何污染物存在 3、尿中存在大量黏液,結(jié)晶,真菌,精子影 紅細(xì)胞等會(huì)使管型,紅細(xì)胞,細(xì)菌等項(xiàng)目 計(jì)數(shù)結(jié)果假性增高或降低 4、嚴(yán)格執(zhí)行質(zhì)量控制,建立和執(zhí)行復(fù)檢制度開展尿沉渣檢查的好處1、提高尿液異常病人的檢出率,減少漏診2、提供標(biāo)準(zhǔn)化定量檢測(cè)結(jié)果,診療有量化依據(jù)3、提供更多臨床診斷信息,對(duì)診斷有幫助病人結(jié)果與病情相符,診療有依據(jù) 關(guān)于尿有形成分的報(bào)告及正常值 1 目前普遍存在尿標(biāo)本不離心或離心不規(guī)范 致使有型成分的結(jié)果偏低,掩蓋病情。如 尿路感染患者治療后是否停藥,依據(jù)
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