DB13-T1384-8-2011飼料中氯羥吡啶的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1、ICS 65.120B 46DB13河北省地方標準DB13/T 1384.82011飼料中氯羥吡啶的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法Determination of copidol in feed LC-MS/MS method2011 - 05 - 10 發(fā)布2011 - 05 - 20 實施河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā) 布DB13/T 1384.82011I前言本標準按照GB/T 1.12009給出的規(guī)則起草。本標準由河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標準起草單位：河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院、河北醫(yī)科大學、石家莊市疾病預防控制中心、北京出入境檢驗檢疫局技術(shù)中心、河北省飼料產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗站。本標準主要起草人：

2、張巖、楊立學、李揮、張宏、叢斌、盧曉宇、呂品、賈茜、李強、李志平、馬春玲、米振杰、沈磊、高振同、武英利。 PAGE 4飼料中氯羥吡啶的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本標準規(guī)定了飼料中氯羥吡啶的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本標準適用于飼料中氯羥吡啶的測定。本標準的方法檢出限為20 g/kg。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法（GB/T 66821992，neqISO 3696：1987原理試樣中氯羥吡啶經(jīng)甲醇提取，用中

3、性氧化鋁柱凈化分離，濃縮后用甲醇溶解，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜定性定量測定。.試劑和溶液除另有說明外，所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的一級水。甲醇。中性氧化鋁萃取柱：1 g，6 mL。氯羥吡啶標準品：純度均應大于 95%。氯羥吡啶標準貯備液：分別準確稱取己知純度的氯羥吡啶標準品 10 mg（精確至 0.000 l g）， 置于 100 mL 棕色容量瓶中，加甲醇超聲使之完全溶解，定容至刻度，搖勻。該溶液中氯羥吡啶濃度為100 g/mL，于 4保存可使用 6 個月。氯羥吡啶標準工作液：準確移取氯羥吡啶標準儲備液 5 mL，置于 50 mL 棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，該溶液中氯

4、羥吡啶濃度均為 10 g/mL，于 4保存可使用 1 個月。正己烷。氨水。儀器和設備除實驗室常用儀器和設備外，還包括以下儀器和設備。液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。電子天平：感量為 0.l mg和1 mg。旋渦混勻器。濾膜：孔徑 0.45 m，有機相。高速離心機。中性氧化鋁固相萃取柱：500 mg，6 mL，或相當者。試樣的制備提取準確稱取樣品5 g（精確至0.00l g）于50 mL離心管中，加入甲醇10 mL，旋渦混合，于振蕩器振蕩30 min，5 000 r/min離心5 min，取上清液再加入10 mL水、500 L氨水、10 mL正己烷，渦旋30 s，8 00

5、0 r/min離心5 min，取下層清液待凈化。凈化將上清液移入中性氧化鋁柱中，用 20 mL 甲醇洗脫，將過柱液及洗脫液全部接收于 50 mL 離心管中，氮吹至干，用 l mL 甲醇溶解殘渣，過 0.45 m 微孔濾膜，待測。分析步驟測定液相色譜條件色譜柱：C18，5 m，150 mm 2.l mm（內(nèi)徑）或相當者。水（A）+甲醇（B）。流速：0.25 mL/min。梯度：04.0 min 1090B；4.0 min8.0 min 90B，8.1 min10.0 min 10B。柱溫：25。進樣量：25 L。串聯(lián)質(zhì)譜條件離子源：電噴霧離子源（ESI），正離子監(jiān)測。掃描方式：選擇離子檢測（MR

6、M）。霧化氣、鞘氣為高純氮氣，碰撞氣為高純氦氣。電噴霧電壓、碰撞電壓等自動優(yōu)化至最佳值。 定性離子對(m/z)：192.2/174.2，192.2/101.0。定量離子對定量離子對(m/z)：192.2/101.0。定性、定量氯羥吡啶標準工作溶液在液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜設定條件下分別進樣，以樣品峰面積為縱坐標，工作溶液濃度（ng/mL）為橫坐標，繪制 6 點標準工作曲線，用標準工作曲線對樣品進行定量，樣品溶液中泰樂菌素的響應值均應在儀器測定的線性范圍內(nèi)。氯羥吡啶標準物質(zhì)質(zhì)譜圖參見附錄 A。空白試驗除不稱取試樣外，均按上述步驟進行。結(jié)果計算結(jié)果用色譜數(shù)據(jù)處理機或按式(1)計算，計算結(jié)果需扣除空白值：式中：X c Vm (1)X試樣中被測組分殘留量，單位為微克每千克（g/kg）。 c從標準工作曲線上得到的被測組分溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）。V樣品溶液定容體積，單位為