實(shí)驗(yàn)四電泳技術(shù)及詳解演示文稿

1、實(shí)驗(yàn)四電泳技術(shù)及詳解演示文稿第一頁，共四十五頁。（優(yōu)選）實(shí)驗(yàn)四電泳技術(shù)及第二頁，共四十五頁。+-1.許多生物分子帶有電荷，在電場(chǎng)中可以發(fā)生 移動(dòng)。2.每種分子遷移率不同，一定時(shí)間內(nèi)在電場(chǎng)中 的遷移距離不同。在一定pH條件下，每一種分子都具有特定的電荷（種類和數(shù)量）、大小和形狀，在一定時(shí)間內(nèi)它們?cè)谙嗤妶?chǎng)中泳動(dòng)速度不同，各自集中到特定的位置上而形成緊密的泳動(dòng)帶。這就是帶電粒子可以用電泳技術(shù)進(jìn)行分離、分析和鑒定的基本原理。原理第三頁，共四十五頁。二、電泳遷移率設(shè)一帶電粒子在電場(chǎng)中所受的力為F，則 F = QE（Q為粒子所帶電荷，E為電場(chǎng)強(qiáng)度）根據(jù)Stoke定律，一球形分子在溶液中運(yùn)動(dòng) 所受的阻力f

2、為： f = 6rv（v為分子移動(dòng)速度；r為分子半徑；為介質(zhì) 黏度）第四頁，共四十五頁。當(dāng)分子達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡時(shí)， F = f 即 QE= 6rv 移項(xiàng)得 v/E=Q/ 6r v/E:表示單位電場(chǎng)強(qiáng)度時(shí)粒子運(yùn)動(dòng)速度，稱 為遷移率，也稱電泳速度，以表示。 因此上式也可表示為： = Q / 6r從上式可推知，帶電粒子在電場(chǎng)中的移動(dòng)與: 粒子大小有關(guān)，顆粒愈小愈快 粒子的電荷有關(guān)，電荷愈多愈快 粒子的形狀有關(guān)，愈接近球形愈快第五頁，共四十五頁。三、影響遷移率的因素1.電場(chǎng)強(qiáng)度（E） 電場(chǎng)強(qiáng)度是指每厘米的電位降。電泳速度與電場(chǎng) 強(qiáng)度成正比。電場(chǎng)強(qiáng)度越高電泳速度越快。 根據(jù)電場(chǎng)強(qiáng)度大小，電泳可分為： 常壓電泳：210V/cm 高壓電泳：20200V/cm2.溶液的pH值 pH值決定帶電顆粒的解離程度，決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少。選擇合適pH，使混合物中各成分所帶電量差別較大。 pHpI帶負(fù)電 pHpI時(shí)從陰極向陽極依次排列為L(zhǎng)DH5、LDH4、LDH3、LDH2、LDH1 。血清LDH同工酶檢測(cè)的臨床意義：血清LDH同工酶的正常值為L(zhǎng)DH1 32.7%、LDH2 45.1%、LDH3 18.5%、LDH4 2.9%、LDH5 0.8% 不