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1、環(huán)境生物學(xué)試驗(yàn)一生物顯微鏡使用和細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀測(cè) 第1頁(yè)第1頁(yè)實(shí)驗(yàn)?zāi)?. 理解普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和各部分性能,并掌握正確使用及維護(hù)辦法。2. 在顯微鏡下觀測(cè)植物和動(dòng)物細(xì)胞,理解動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)異同點(diǎn)。3. 掌握生物繪圖法。4. 理解細(xì)胞是生命體結(jié)構(gòu)與生命活動(dòng)基本單位。第2頁(yè)第2頁(yè)顯微鏡基本結(jié)構(gòu)機(jī)械部分鏡座 鏡柱 鏡臂 鏡筒 載物臺(tái) 轉(zhuǎn)換器 調(diào)焦器 聚光器調(diào)整螺旋光學(xué)部分物鏡 目鏡 聚光器 反光鏡 內(nèi)光源照明系統(tǒng) 第3頁(yè)第3頁(yè)顯微鏡使用環(huán)節(jié): (1)取、放顯微鏡正確做法 一手握鏡臂,一手托鏡座托在胸前。放在距離桌邊5-10cm左右為好。(2)對(duì)光 先將低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔,調(diào)整反光鏡(外光源

2、顯微鏡)或電源電壓,使視野中光線明亮而不耀眼。(3)放置標(biāo)本 將玻片中有標(biāo)本地方移到通光孔中央。第4頁(yè)第4頁(yè)顯微鏡使用環(huán)節(jié): (4)調(diào)焦點(diǎn) 慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,從側(cè)面注視使物鏡與玻片靠近工作距離5mm左右。(5)使用低倍鏡觀測(cè) 移動(dòng)標(biāo)本,找到需要觀測(cè)位置。用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)清楚物像。(6)使用高倍鏡觀測(cè) 將高倍鏡換入,然后用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)清楚物像。第5頁(yè)第5頁(yè)(7)使用油鏡觀測(cè) 在觀測(cè)線粒體、細(xì)菌等細(xì)小結(jié)構(gòu)時(shí)需要使用100倍物鏡。100倍物鏡需要在油介質(zhì)中工作,故稱油鏡或油浸物鏡。油鏡需在物鏡與標(biāo)本之間充上一個(gè)折光率與玻璃同樣高介質(zhì)。通常使用香柏油,才干使物像清楚。(8)使用油鏡辦法 先低倍,后高倍

3、,再用油鏡。用油鏡前要將觀測(cè)對(duì)象移到視野中央,移開(kāi)高倍物鏡,將香柏油滴在標(biāo)本蓋玻片上,直接換入油鏡,使鏡頭浸在油中。轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,調(diào)整焦點(diǎn),使物像清楚。(9)觀測(cè)后用“顯微鏡保養(yǎng)”中簡(jiǎn)介辦法及時(shí)清除鏡頭上香柏油。第6頁(yè)第6頁(yè)需要注意幾種問(wèn)題一、正確使用準(zhǔn)焦螺旋問(wèn)題 試驗(yàn)中極易出現(xiàn)下列錯(cuò)誤:(1) 不通過(guò)低倍鏡,直接在高倍鏡下調(diào)焦;(2)在高倍鏡下用粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦,且轉(zhuǎn)動(dòng)速度不久;(3)無(wú)論載物臺(tái)上升或下降,眼睛始終在往目鏡中看視野。 調(diào)整焦距一定要在低倍鏡下調(diào),先轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,物鏡靠近載玻片,當(dāng)視野中出現(xiàn)模糊物像時(shí),就要換用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)整,縮小尋找范圍,提升找到物像速度。 第7頁(yè)第7頁(yè)二、

4、物鏡轉(zhuǎn)換問(wèn)題 使用低倍鏡后換用高倍鏡,往往喜歡用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡,這樣容易使物鏡光軸發(fā)生偏斜,原因是轉(zhuǎn)換器材料質(zhì)地較軟,精度較高,螺紋受力不均勻很容易松脫。一旦螺紋破壞,整個(gè)轉(zhuǎn)換器就會(huì)報(bào)廢。 手握轉(zhuǎn)換器下層轉(zhuǎn)動(dòng)板轉(zhuǎn)換物鏡。 三、正確用眼問(wèn)題 用顯微鏡觀測(cè)物體時(shí),應(yīng)雙眼同時(shí)睜開(kāi),左眼往目鏡內(nèi)注視,右眼試圖向視野內(nèi)注視,如此重復(fù)訓(xùn)練,就會(huì)達(dá)到雙眼同時(shí)睜開(kāi)觀測(cè)要求。 第8頁(yè)第8頁(yè)四、使用結(jié)束后顯微鏡復(fù)原 顯微鏡使用完畢,關(guān)閉電源,拔下插頭;將物鏡鏡頭轉(zhuǎn)開(kāi),取下玻片,擦凈載物臺(tái)和物鏡,調(diào)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,將載物臺(tái)下降至最低點(diǎn),將各部分還原。罩上防塵罩。五、顯微鏡保養(yǎng)(1)注意防潮; (2)保持清潔,注意防

5、塵(鏡頭清潔辦法); (3)預(yù)防酸堿等腐蝕性液體玷污顯微鏡,在觀測(cè)暫時(shí)裝片時(shí),預(yù)防里面液體流出。第9頁(yè)第9頁(yè)試驗(yàn)內(nèi)容1. 動(dòng)物細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀測(cè)(1)人口腔粘膜細(xì)胞涂片標(biāo)本制備 吸取醋酸洋紅或碘液,滴一滴在一潔凈載玻片中央,將消毒牙簽粗一端伸入口腔,在口腔頰內(nèi)壁上輕輕刮取粘膜上皮細(xì)胞,將刮下白色粘性物質(zhì)放入載玻片上染液內(nèi),分散均勻。染色5-10 min后,加蓋蓋玻片(細(xì)節(jié))。第10頁(yè)第10頁(yè)(2)觀測(cè) 將制備好裝片標(biāo)本置顯微鏡下觀測(cè): 先用低倍鏡觀測(cè),可見(jiàn)人口腔粘膜上皮細(xì)胞呈扁圓形或扁平多邊形。再尋找較分散、輪廓清楚單個(gè)細(xì)胞,移至視野中央轉(zhuǎn)高倍鏡觀測(cè); 在高倍鏡下觀測(cè)結(jié)構(gòu): 細(xì)胞膜,細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)。

6、第11頁(yè)第11頁(yè)2、植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀測(cè)(1)暫時(shí)裝片制作 取一潔凈載玻片,滴一滴碘液在玻片中央。用尖頭鑷子從洋蔥肉質(zhì)鱗片內(nèi)表面撕下一小塊膜質(zhì)表皮,平鋪在載玻片碘液滴上,用鑷子將其輕輕壓入液滴中,使之展開(kāi),蓋上蓋玻片,用吸水紙吸去蓋玻片周圍多出碘液。洋蔥鱗片表皮細(xì)胞暫時(shí)裝片標(biāo)本制備與觀測(cè)。第12頁(yè)第12頁(yè)第13頁(yè)第13頁(yè)(2)觀測(cè) 將制備好裝片標(biāo)本置顯微鏡下觀測(cè):先用低倍鏡觀測(cè),可見(jiàn)許多長(zhǎng)柱狀細(xì)胞排列整潔,彼此相連。選擇其中一個(gè)較典型細(xì)胞移至視野中央,再轉(zhuǎn)高倍鏡觀測(cè),在高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞最外面為一層棕黃色較厚結(jié)構(gòu),即細(xì)胞壁。細(xì)胞壁以內(nèi)是著色較淺近于透明細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一個(gè)或幾種或大或小透明液泡,在

7、細(xì)胞中央或靠近細(xì)胞壁,有一個(gè)橢圓形細(xì)胞核,調(diào)整細(xì)調(diào)螺旋,可見(jiàn)核內(nèi)有1-2個(gè)染成棕黃色,折光較強(qiáng)核仁,細(xì)胞質(zhì)外圍有一薄層細(xì)胞質(zhì)膜,但在光鏡下不易分辨。第14頁(yè)第14頁(yè) 第15頁(yè)第15頁(yè)紅辣椒表皮細(xì)胞觀測(cè)(1)暫時(shí)裝片制作 剪取一小片辣椒,用解剖刀切去肉質(zhì)部分,然后用刀片輕刮,將肉質(zhì)部分所有刮去,只剩余一層表皮。然后,用鑷子將表皮放在載玻片上,加上一滴水,蓋上蓋玻片。(2)觀測(cè)先在低倍鏡下找到標(biāo)本,然后按照上面辦法,逐步增長(zhǎng)放大倍數(shù)并調(diào)整粗、細(xì)調(diào)焦螺旋直到看到清楚圖像。觀測(cè)細(xì)胞形態(tài),注意是否能看到胞間連絲。第16頁(yè)第16頁(yè)第17頁(yè)第17頁(yè)第18頁(yè)第18頁(yè)體視顯微鏡又稱實(shí)體顯微鏡或解剖鏡。觀測(cè)是標(biāo)本表面,有很強(qiáng)立體感。第19頁(yè)第19頁(yè)試驗(yàn)匯報(bào)試驗(yàn)?zāi)康脑囼?yàn)材料試驗(yàn)試劑和器械試驗(yàn)內(nèi)容(顯微鏡使用和細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀測(cè))試驗(yàn)結(jié)果(繪制人口腔黏膜細(xì)胞和洋蔥鱗片表皮細(xì)胞)思考題第20頁(yè)第20頁(yè)生物繪圖注意事項(xiàng)繪圖時(shí)使用鉛筆(HB)在圖正下方表明圖題圖注用直線引出標(biāo)注結(jié)構(gòu)名稱,而且注字最好在圖右側(cè)或兩側(cè)排成豎行,上下盡也許對(duì)齊;引出直線間不可交叉畫(huà)圖時(shí)要線條流暢勻稱染色深淺不同地方用點(diǎn)疏密不同來(lái)表示,不可用陰影表示圖中點(diǎn)要垂直點(diǎn)下去,不可拖尾,帶勾第21頁(yè)第21頁(yè)

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