《微生物》第七章 腸道桿菌

1、 第七章 腸道桿菌 Enterobacteriaceae 教學(xué)大綱掌握埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬的致病性、免疫性熟悉腸道菌的診斷檢查及防治原則了解克雷伯菌屬和變形桿菌屬與疾病的關(guān)系，一大群居住在人和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性桿菌屬于腸桿菌科,至少有30個(gè)菌屬，120個(gè)以上的菌種多數(shù)是腸道的正常菌群少數(shù)為致病菌，是人類腸傳染病的最重要病原菌與醫(yī)學(xué)有關(guān)的：埃希菌屬 、志賀菌屬、沙門菌屬、克雷伯菌屬、變形桿菌屬等10個(gè)菌屬第一節(jié) 概述革蘭陰性桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有周身鞭毛（除志賀菌外），致病菌多有菌毛,某些菌有莢膜樣物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)要求不高，能在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，兼性厭氧生化反應(yīng)活躍（乳糖發(fā)酵試驗(yàn)）

2、抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜O抗原（菌體抗原）：S-R變異H抗原（鞭毛抗原）：H-O變異K抗原（包被抗原）共同生物學(xué)特征鞭毛抗原（H）菌體抗原（O）K或Vi抗原腸桿菌科中與醫(yī)學(xué)有關(guān)的常見(jiàn)菌族和菌屬 菌族 菌屬（菌種數(shù)） 代表種埃希菌族 埃希菌屬 大腸桿菌 志賀菌屬 痢疾志賀菌愛(ài)德華菌族 愛(ài)德華菌屬 遲鈍愛(ài)德華菌沙門菌族 沙門菌屬 傷寒沙門菌 枸櫞酸菌屬 佛勞第枸櫞酸菌克雷伯菌族 克雷伯菌屬 肺炎克氏菌 腸桿菌屬 產(chǎn)氣腸桿菌 哈夫尼亞菌屬 蜂窩哈夫尼亞菌 沙雷菌屬 粘質(zhì)沙雷菌變形桿菌族 變形桿菌屬 普通變形桿菌 摩根菌屬 摩氏摩根菌屬 普羅威登斯菌屬 雷氏普羅威登斯菌耶爾森菌族 耶爾森菌屬 鼠疫耶爾菌歐文菌族本

3、 歐文菌屬 草原居民歐文菌第二節(jié) 埃希菌屬（Escherichia）包括5個(gè)種：大腸埃希菌（大腸桿菌，E.coli）代表種赫曼埃希菌蟑螂埃希菌脆弱埃希菌費(fèi)格森埃希菌是人類和動(dòng)物腸道中的正常菌群出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，并終生伴隨形態(tài)染色0.4-0.7m 1-3m 短桿菌革蘭染色陰性有鞭毛有菌毛培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高生化反應(yīng)活潑，發(fā)酵多種糖類絕大多數(shù)發(fā)酵乳糖IMViC試驗(yàn)結(jié)果為+ + - -大腸埃希菌于普通營(yíng)養(yǎng)平板培養(yǎng)生長(zhǎng)的菌落抗原結(jié)構(gòu)O抗原：菌體抗原H抗原：鞭毛抗原K抗原：莢膜抗原O111：K58：H2復(fù)雜的抗原構(gòu)造致病物質(zhì)菌毛、定居因子抗原K抗原 與侵襲力有關(guān)抗吞噬與抗補(bǔ)體的溶

4、菌腸毒素 不耐熱腸毒素 耐熱腸毒素 志賀樣毒素 腸集聚耐熱毒素所致疾病腸道外感染 泌尿道感染最多見(jiàn) 化膿性感染闌尾炎、膽囊炎、腦 膜炎、敗血癥腹瀉引起腹瀉的大腸埃希菌腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌 enterotoxigenic E. coli ETEC腸侵襲型大腸埃希菌 enteroinvasive E. coli EIEC腸致病型大腸埃希菌 enteropathogenic E. coli EPEC腸出血型大腸埃希菌 enterohemorrhagic E. coli EHEC腸集聚型大腸埃希菌 enteroaggregative E. coli EAggEC腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌(enterotoxig

5、enic E.coli, ETEC)嬰幼兒和旅游者腹瀉致病物質(zhì)腸毒素enterotoxinheat labile enterotoxin(LT)heat stable enterotoxin(ST)定植因子(菌毛）腸侵襲型大腸埃希菌(enteroinvasive E.coli, EIEC)似菌痢樣，有膿血便，有里急后重致病機(jī)理侵襲結(jié)腸粘膜上皮并繁殖細(xì)菌死亡后釋放內(nèi)毒素，引起炎癥腸致病型大腸埃希菌(enteropathogenic E.coli, EPEC)嬰幼兒腹瀉致病機(jī)理粘附和破壞腸粘膜微絨毛上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損，導(dǎo)致腹瀉腸出血型大腸埃希菌(enterohemorrhagic E.co

6、li, EHEC)亦稱為Vero毒素大腸埃希菌血清型為 O157:H7臨床表現(xiàn)輕重不一10%小于十歲患兒，有嚴(yán)重并發(fā)癥，死亡率高致病因子菌毛毒素 Vero毒素內(nèi)毒素與溶血素Intimate Adherence of EHEC to Epithelial Cells腸集聚型大腸埃希菌(enteroaggregative E.coli, EAggEC)嬰兒持續(xù)性腹瀉致病因子腸集聚耐熱毒素（EAST）菌毛溶血素菌 株 致 病 機(jī) 制疾 病發(fā) 病 年 齡ETECLT-ATP cAMPST-GTP cGMP定植因子（菌毛） 旅游者腹瀉、嬰幼兒腹瀉、水樣便成人、兒童EPEC粘附因子（菌毛、緊密黏附素） 急

7、性腹瀉嬰幼兒EIEC內(nèi)毒素破壞細(xì)胞，形成炎癥和潰瘍，產(chǎn)生粘液膿血便志賀樣膿血便 成人、較大兒童EHEC志賀樣毒素O157型水樣便、腹部痙攣然后是鮮血樣便的出血性結(jié)腸炎5歲以下兒童EAEC粘附素（菌毛）EAST（腸集聚耐熱毒素）水樣瀉嬰幼兒標(biāo)本：糞便/尿（中段尿 ）、血、腦脊液方法： 糞便 其他標(biāo)本選擇培基取可疑菌落生化反應(yīng)血清凝集 血平板 血增菌三.微生物學(xué)檢查衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查細(xì)菌總數(shù) 每ml/g檢樣經(jīng)培養(yǎng)后所得菌落總數(shù)大腸菌群數(shù) 1000ml檢樣,37培養(yǎng)24h發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭陰性無(wú)芽胞桿菌數(shù)量(大腸桿菌、枸櫞酸菌、克雷伯菌和產(chǎn)氣桿菌等).我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌總數(shù)：每ml飲水、汽水、果汁不得

8、 100個(gè)大腸菌群數(shù)：每升飲水不得 3個(gè)，瓶裝汽水、果汁等每100ml不得 5個(gè)防治原則疫苗抗生素的抗性質(zhì)粒，耐藥性非常普遍第三節(jié) 志賀菌屬（Shigella）通稱痢疾桿菌，引起細(xì)菌性痢疾生物學(xué)性狀形態(tài)染色 G-桿菌，0.5-0.7 m 2-3m無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，無(wú)芽孢， 有菌毛生物學(xué)性狀培養(yǎng)及生化反應(yīng)營(yíng)養(yǎng)要求不高不分解乳糖IMViC試驗(yàn)“-+-”克氏雙糖管有菌毛，無(wú)鞭毛；生化反應(yīng)弱，不分解乳糖IMViC試驗(yàn)“-+-”一.生物學(xué)特性據(jù)O抗原不同，可分為A群：志賀痢疾桿菌B群：福氏痢疾桿菌C群：鮑氏痢疾桿菌D群：宋內(nèi)痢疾桿菌抗原構(gòu)造及分類由O和K抗原組成分類： 菌種 群 型 亞型痢疾志賀菌 A 1

9、10 8a、8b、8c福氏志賀菌 B 16、x 1a、1b、2a 、2b y變型 3a、3b、3c、4a、4b鮑氏志賀菌 C 118 宋內(nèi)志賀菌 D 1比其他腸道桿菌弱對(duì)酸和一般消毒劑敏感抵抗力（一）、致病物質(zhì)侵襲力菌毛(有利于菌粘附至回腸末端和腸粘膜)，致病的先決條件內(nèi)毒素腸壁通透性升高促進(jìn)內(nèi)毒素的吸收，引起發(fā)熱、神志障礙、甚至中毒性休克等一系列中毒癥狀破壞腸粘膜-膿血粘液便腸壁植物神經(jīng)系統(tǒng)-腹痛、里急后重等癥狀外毒素（志賀毒素）二.致病性與免疫性ShT的生物學(xué)活性:1、神經(jīng)毒性-致死性神經(jīng)感染2、細(xì)胞毒性-肝細(xì)胞、腸粘膜細(xì)胞壞死3、腸毒素毒性-引起腹瀉細(xì)菌性痢疾傳染源病人、帶菌者經(jīng)糞口途徑

10、感染，夏秋季多見(jiàn)急性菌痢： 發(fā)熱、腹痛、膿血粘液便、里急后重中毒性菌?。憾嘁?jiàn)于小兒慢性菌痢：病程遷移兩個(gè)月以上帶菌者（二）、所致疾病痢疾患兒免疫性免疫期短，不穩(wěn)固免疫主要是消化道粘膜的SIgA三、微生物學(xué)檢查及時(shí)送檢/暫用30%甘油緩沖鹽水保存SS平板（無(wú)色透明小菌落）血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）最后診斷分離培養(yǎng)新鮮膿血便/肛拭雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）快速診斷熒光菌球試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)四、防治原則預(yù)防：控制傳染源，切斷傳播途徑 鏈霉素依賴株活疫苗（Sd）治療：易引起耐藥性，聯(lián)合用藥是一群革蘭陰性桿菌菌種繁多，血清型超過(guò)2400個(gè)多對(duì)動(dòng)物致病對(duì)人類致病的占少數(shù)動(dòng)物沙門菌也可對(duì)人致病 第四節(jié) 沙門菌屬（Sa

11、lmonella）對(duì)人致?。簜抽T菌、甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌對(duì)人和動(dòng)物致病：豬霍亂沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌引起人類的疾病稱沙門菌病，主要有傷寒/副傷寒、胃腸炎（食物中毒）、敗血癥等生物學(xué)性狀形態(tài)染色G-桿菌 0.6-1.0m 2-4m周身鞭毛，有菌毛 培養(yǎng)和生化反應(yīng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高不分解乳糖鼠傷寒沙門菌抗原構(gòu)造與分類成分抵抗力產(chǎn)生抗體制備組成O抗原LPS耐濕熱IgM酒精處理或加熱分組依據(jù)：引起人類沙門菌病的多屬A-E組H抗原蛋白質(zhì)不耐熱IgG甲醛固定后使O抗原被遮蓋有兩種：第1相為特異相，第2相非特異相與毒力有關(guān)而命名，也是一種表面抗原。傷寒、丙型副傷寒沙門菌有

12、此抗原，測(cè)定Vi抗體有助于診斷傷寒、副傷寒帶菌者。Vi抗原M抗原 粘液抗原 抗原構(gòu)造主要沙門菌的生化特性菌名葡萄糖乳糖甘露醇硫化氫動(dòng)力甲型副傷寒沙門菌肖氏沙門菌鼠傷寒沙門菌希氏沙門菌豬霍亂沙門菌傷寒沙門菌腸炎沙門菌+/+/+抵抗力較差 水中能存活2-3W糞便中可活1-2個(gè)月 冰凍土壤中可過(guò)冬耐受膽鹽、煌綠及其他染料對(duì)熱耐力差 致病物質(zhì)侵襲力 菌毛、O和Vi抗原抗吞噬內(nèi)毒素引起體溫升高、白細(xì)胞數(shù)下降。大劑量可導(dǎo)致中毒和休克 炎癥腸毒素某些沙門菌如鼠傷寒沙門菌（因食用患病或帶菌動(dòng)物的肉、乳、蛋或被鼠尿污染的食物等患?。┘S-口途徑所致疾病-人類沙門菌病腸熱癥傷寒、副傷寒傷寒、甲型副傷寒、肖氏、希氏沙

13、門菌引起胃腸炎（食物中毒）鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌敗血癥鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌、希氏沙門菌無(wú)癥狀帶菌者1、腸熱癥（傷寒S. typhi和副傷寒）（二）、所致疾病膽囊-腸道-糞排菌皮膚-血栓出血-玫瑰疹腎-尿肝脾-腫大骨髓傷寒和副傷寒的致病過(guò)程傷寒沙門和甲型副傷寒桿菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌小腸上部粘膜腸系膜淋巴結(jié) 固有層淋巴結(jié)進(jìn)入血液再次進(jìn)入血液第一次菌血癥第二次菌血癥高熱 、相對(duì)緩脈 、白細(xì)胞減少、腸穿孔死亡 鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙 門菌污染食物引起，起病急。2、急性胃腸炎（食物中毒）3、敗血癥豬霍亂沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、丙型副傷寒沙門菌

14、引起，腸道癥狀不明顯4、無(wú)癥狀帶菌者癥狀消失后1年仍可在糞便中檢出相應(yīng)沙門菌，這些菌留在膽囊中，為傷寒和副傷寒病原菌儲(chǔ)存場(chǎng)所傷寒表現(xiàn)持續(xù)高熱傷寒病容玫瑰疹肝脾腫大相對(duì)緩脈傷寒瑪麗1906年夏天，紐約的銀行家華倫帶著全家去長(zhǎng)島消夏，雇傭瑪麗做廚師。8月底，華倫的一個(gè)女兒最先感染了傷寒。接著，華倫夫人、兩個(gè)女傭、園丁和另一個(gè)女兒相繼感染。他們消夏的房子住了11個(gè)人，就有6個(gè)人患病。發(fā)現(xiàn)7年中瑪麗更換過(guò)7個(gè)工作地點(diǎn)，而每個(gè)工作地點(diǎn)都曾暴發(fā)過(guò)傷寒病，累計(jì)共有22個(gè)病例，其中1例死亡。1910年2月，當(dāng)?shù)匦l(wèi)生部門與瑪麗達(dá)成和解，解除對(duì)她的隔離，條件是瑪麗同意不再做廚師。1915年，瑪麗已經(jīng)被解除隔離5年

15、，大家也差不多都把她遺忘了。這時(shí)，紐約一家婦產(chǎn)醫(yī)院暴發(fā)了傷寒病，25人被感染，2人死亡。衛(wèi)生部門很快在這家醫(yī)院的廚房里找到了到瑪麗，她已經(jīng)改名為“布朗夫人”。后來(lái)，瑪麗梅倫便以“傷寒瑪麗”的綽號(hào)留名于美國(guó)醫(yī)學(xué)史。今天，美國(guó)人有時(shí)還會(huì)以開(kāi)玩笑的口吻稱患上傳染病的朋友為“傷寒瑪麗”。由于故事中的瑪麗梅倫總是不停地更換工作地點(diǎn)，因此，對(duì)于那些頻繁跳槽的人，也會(huì)被周圍的人戲稱為“傷寒瑪麗”。 傷寒和副傷寒病后有牢固免疫；以細(xì)胞免疫為主，體液免疫為輔。（三）.免疫性微生物學(xué)檢查法標(biāo)本胃腸炎取糞便嘔吐物或可疑食物腸熱癥在病程不同階段采取不同標(biāo)本分離培養(yǎng)和鑒定糞、尿（沉渣）可直接接種選擇培養(yǎng)基。血清學(xué)診斷肥

16、達(dá)反應(yīng)帶菌者檢查肥達(dá)反應(yīng)（Widal reaction）用已知傷寒沙門菌O、H和甲型副沙寒沙門菌和肖氏沙門菌H抗原與病人血清做定量凝集試驗(yàn)，用以輔助診斷腸熱癥H與O抗體的性質(zhì)及其消長(zhǎng)意義抗體類型體內(nèi)出現(xiàn)情況體內(nèi)出現(xiàn)情況O抗體IgM出現(xiàn)較早， 維持時(shí)間短高高低H抗體IgG出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間長(zhǎng)高低高患腸熱癥可能性大感染早期、其他沙門菌引起的交叉反應(yīng)預(yù)防接種； 非特異性回憶反應(yīng)判定結(jié)果時(shí)，應(yīng)著重考慮：正常凝集價(jià)傷寒沙門菌O抗體的凝集價(jià)1：80以上，H抗體1：160以上甲型副傷寒、肖氏沙門菌H抗體凝集價(jià)在1：80以上 動(dòng)態(tài)觀察O與H抗體的診斷意義防治原則加強(qiáng)水源和食品衛(wèi)生管理疫苗傷寒、甲及乙型副傷寒3聯(lián)菌苗Ty2la傷寒沙門菌口服活菌苗傷寒Vi莢膜多糖疫苗治療以氯霉素效果較好思考題埃希菌屬 、志賀菌屬、沙門菌屬的主要特性及致病性1. 在致病過(guò)程中能引起兩次菌血癥的病原菌是 A. 志賀痢疾桿菌 B. 傷寒桿菌 C. 霍亂弧菌 D. 白喉?xiàng)U菌 E. 百日咳桿菌 2. 引起嬰幼兒和旅游者腹瀉的主要病原菌是 A. ETEC B. EIEC C. EPEC D. EHEC E. EAEC 3. 下列哪種細(xì)菌無(wú)鞭毛 A. 霍亂弧菌 B. 傷寒沙門菌 C. 大腸桿菌 D. 痢疾志賀菌 E. 變形桿菌 4. 可引起人類腸外感染的大腸桿菌是 A. 腸致病性大