造血干細(xì)胞移植PPT

1、關(guān)于造血干細(xì)胞移植第一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月造血干細(xì)胞移植(SCT)按其干細(xì)胞的來源,分為：（1）自體造血干細(xì)胞移植(ASCT)（2）同種異基因造血干細(xì)胞移植(Allo-SCT)（3）異種造血干細(xì)胞移植(SCT)。第二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)干細(xì)胞采集的部位又可分為：（1）骨髓移植(BMT)（2）外周血造血干細(xì)胞移植(PBSCT)（3）臍血造血干細(xì)胞移植(NCSCT)（4）胎肝造血干細(xì)胞移植(NLSCT) 第三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 骨 髓 移 植第四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 骨髓移植(簡稱BMT)是指對病人實(shí)施免

2、疫抑制處理后,使機(jī)體失去排斥異體組織的能力,通過移植骨髓中的多能造血干細(xì)胞給病人,以重建造血和免疫功能,從而達(dá)到治愈某些疾病的一種方法。第五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月一、骨髓移植種類 根據(jù)骨髓的不同來源,可將骨髓移植分為：自體骨髓移植(ABMT)同種異基因骨髓移植(Allo-BMT)同種同基因骨髓移植(SBMT)異種骨髓移植第六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月(一)自體骨髓移植(ABMT) 取患者自身骨髓進(jìn)行保存。 在其相應(yīng)時(shí)間內(nèi),用大劑量的放療和/或化療,最大限度地殺傷患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞,然后再輸回自體骨髓,恢復(fù)患者造血功能。 此種移植不會(huì)出現(xiàn)排斥和移植物抗宿主病(

3、GVHD)等嚴(yán)重合并癥,骨髓移植容易植活，但極易復(fù)發(fā)。 第七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月ABMT時(shí)必須注意以下幾個(gè)方面:腫瘤必須未累及骨髓,移植前骨盆未受過射線照射。年齡不宜過大。腫瘤必須對放、化療敏感。自體骨髓移植有利于保護(hù)骨髓,免受放、化療影響。不能防止放、化療對心、肝、腎等臟器的毒性損害。第八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月自體骨髓成功的關(guān)鍵是： 保存造血干細(xì)胞的活力和基本功能。骨髓采集后如置于常溫下,骨髓在培養(yǎng)液或保存液內(nèi)最長不能超過72小時(shí)。 因此大劑量放、化療須在短時(shí)間內(nèi)完成,或者有時(shí)難以忍受。 在-196長期保存。第九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年

4、6月對緩解期腫瘤(尤其是血液系統(tǒng)的白血病和多發(fā)性骨髓瘤)進(jìn)行BMT,采集的骨髓最好能行體外凈化,去除殘存的腫瘤細(xì)胞,否則移植后復(fù)發(fā)率極高。移植后不出現(xiàn)GVHD,就不會(huì)出現(xiàn)抗腫瘤效應(yīng),故復(fù)發(fā)率極高。第十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）同種同基因骨髓移植(SBMT) 在人類僅限于同卵雙胎間的移植,這種機(jī)會(huì)極少。因無供受者間免疫方面的障礙,無需免疫抑制處理,也不會(huì)出現(xiàn)排斥和GVHD,因而臨床效果較好。 倘若用于治療白血病、多發(fā)性骨髓瘤等血液系統(tǒng)惡性腫瘤,移植后復(fù)發(fā)率比Allo-BMT要高,這可能與缺乏移植物抗腫瘤效應(yīng)作用有關(guān)。第十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）同種

5、異基因骨髓移植(Allo-BMT) 是指供一受者之間主要組織相容性復(fù)合物(簡稱MHC)相合的同種兩個(gè)個(gè)體間的移植。 目前開展的是基因型相同或基本相同的兄弟姐妹間的移植,少數(shù)為親子間的移植,也有人類白細(xì)胞抗原(簡稱HLA)表型相同的無關(guān)人員之間移植，此種移植機(jī)會(huì)極少。 易并發(fā)GVHD,但其優(yōu)點(diǎn)是移植后療效比ABMT和SBMT佳。第十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月二、供受者選擇:（一）受者(患者)選擇應(yīng)注意:(1)年齡控制250周歲。(2)選擇合適的移植時(shí)機(jī),如：急淋高危組和急非淋CR1后,低危組急淋則在CR2后；慢性粒細(xì)胞性白血病在慢性期的早期(發(fā)病一年以內(nèi))，而重型再生障礙性貧血

6、應(yīng)盡早移植。第十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月(3)無急慢性感染病灶。(4)左心室射血指數(shù)5.0、用力肺活量(forced vital capatity)60%、一氧化碳彌散能力(DLCO)50%。(5)血肌酐110mol/L(2mg/dl)和總膽紅素18mol/L(2mg/dl）。第十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）供者選擇: 首選HLA配型相合的同胞兄弟姐妹為供者,如有兩個(gè)以上供者應(yīng)選擇與患者ABO血型或性別相同者。 也可選擇單倍型相同的家庭成員作為供者。第十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 選用HLA表型相同或相似的無關(guān)人員作供者,由于HLA的

7、高度多態(tài)性,使其概率甚小。第十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三、同種異基因骨髓移植(Allo-BMT)和同種同基因骨髓移植(SBMT)（一）移植步驟:1.供受者紅細(xì)胞血型檢測及HLA配型, 應(yīng)用PCR進(jìn)行HLA-A、B、C、DR抗原分型,且HLA相同供受者進(jìn)行混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)和淋巴細(xì)胞毒交叉試驗(yàn)。第十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月2.供者準(zhǔn)備: 詳細(xì)詢問供髓者的病史和全面體檢，對血、骨髓及心、肝、腎、免疫功能等進(jìn)行檢查。骨髓檢查包括常規(guī)分類、粒-單集落形成測定(GM-CFU)、染色體分析,此外還應(yīng)檢查血清巨細(xì)胞病毒等病毒抗體滴度和華康氏反應(yīng)。第十八張，PPT共六十八

8、頁，創(chuàng)作于2022年6月 如為同性供者應(yīng)查紅細(xì)胞同工酶和血型(包括亞型),以此作為移植后骨髓是否植入的依據(jù)。 另外，供髓前4周開始采用自體血保存法儲(chǔ)備自體血600800毫升。第十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月3.受者準(zhǔn)備預(yù)處理前應(yīng)仔細(xì)體檢；進(jìn)行痰、尿、糞便、皮膚、耳、鼻、咽拭子細(xì)菌、真菌培養(yǎng)；預(yù)處理前一周開始口服腸道抑菌劑,；洗必泰液漱口,洗必泰甘油涂鼻、外耳道,利福平眼藥水滴雙眼等；注意肛周清潔衛(wèi)生。第二十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 實(shí)驗(yàn)室檢查主要包括骨髓、血及心、肺、肝腎功能等檢查。除做與供者相同的項(xiàng)目外,還應(yīng)查肺功能、X線胸片、如有條件者可做有關(guān)內(nèi)分泌方面的

9、檢查。第二十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 入層流室當(dāng)天剪指甲,剃盡全身毛發(fā),清潔淋浴后用洗必泰液藥浴2030分鐘,著無菌衣、帽、口罩,用無菌單包裹送入無菌層流室。 入室后保持無菌環(huán)境,進(jìn)無菌飲食,熱量、蛋白質(zhì)和維生素補(bǔ)充要足夠。 工作人員嚴(yán)格進(jìn)行反向隔離。第二十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月4.骨髓移植前預(yù)處理 預(yù)處理目的是抑制受體免疫系統(tǒng),不使移植的供體造血干細(xì)胞被受體所排斥。各疾病預(yù)處理的方案很多。第二十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月(1)再障和非腫瘤性疾病:方案一:單一環(huán)磷酰胺(CTX)靜滴。方案二:環(huán)磷酰胺和全身照射(CTX+TBI）。(2)

10、白血病:方案一CTX+TBI 方案二:CTX+柔紅霉素+TBI 第二十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月骨髓采集 在手術(shù)室內(nèi)對供者進(jìn)行骨髓采集。一般應(yīng)用硬膜外麻醉,采髓部位以骼后上棘為最佳,也可在骼前上棘或/和胸骨或/和棘突部位,兒童則需加脛骨處,以多點(diǎn)和不同深度采髓,每點(diǎn)采1015ml骨骼血,總量1015ml/Kg(6001000ml)。第二十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 移植骨髓所需的有核細(xì)胞數(shù)應(yīng)按受（患）者體重和根據(jù)供體來源而定：（1）SBMT需3.0-5.0107/Kg（2）Allo-BMT需2.0-6.0108/Kg 當(dāng)采集到400ml時(shí),應(yīng)開始回輸事先采集

11、的自身貯備血,以防休克,術(shù)后需補(bǔ)充各種造血因子。第二十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）過濾 通過17、18號(hào)針頭二次過濾,或不銹鋼網(wǎng)(孔徑0.2010.307mm)過濾后注射至血袋或采集瓶中。一般吸取的骨髓用生理鹽水或1640稀釋液肝素抗凝,每毫升骨髓血需含肝素1520單位，以防骨髓血凝集。第二十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）骨髓回輸從受者鎖骨下大靜脈插管內(nèi)輸入。輸入前將裝有骨髓血的采血袋或采集瓶倒置半小時(shí),使骨髓中脂肪浮于上層,輸注即將結(jié)束時(shí),棄去浮在上層的脂肪滴,以防發(fā)生脂肪栓塞。輸畢后須應(yīng)用采髓時(shí)所用肝素劑量的同等劑量魚靜蛋白(1mg魚精蛋白中和10

12、0u肝素)。第二十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）Allo-BMT骨髓植活標(biāo)準(zhǔn)（1）植活的直接證據(jù)：受者體內(nèi)出現(xiàn)供者型的性染色體，標(biāo)記型染色體，HLA（I、II、和III類）抗原，紅細(xì)胞、粒細(xì)胞和血小板抗原，紅細(xì)胞與白細(xì)胞同工酶，同種異型免疫球蛋白以及其它基因標(biāo)記等。第二十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）植活的間接證據(jù)：受者發(fā)生急、慢性GVHD。（3）骨髓重建的證據(jù)：移植后24周，受者網(wǎng)織紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和血小板迅速增高，并逐漸重建造血免疫功能。 第三十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月四、自身骨髓移植（一）自身骨髓的采集和保存 骨髓的采集在

13、手術(shù)室內(nèi)予以硬膜外麻醉下進(jìn)行，兒童則采用全身麻醉。穿刺部位選擇在左、右前后髂上棘和胸骨，兒童可選擇脛骨上端等部位。 ABMT需有核細(xì)胞總數(shù)5.030.0109（0.55.0108/kg體重），骨髓粒系祖細(xì)胞（CFUC）平均1.04.0104/kg體重。第三十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 骨髓液按等量比例與保養(yǎng)液混和，經(jīng)不同孔徑（0.2010.307mm）的不銹鋼濾網(wǎng)，濾去骨髓中脂肪顆粒和碎片。在混有紅細(xì)胞和骨髓液中每亳升加入肝素15-20U， 4保存3648小時(shí)后回輸。也可應(yīng)用10二甲亞砜作為骨髓冷凍保護(hù)劑，使骨髓保存于196的液氮中。第三十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于202

14、2年6月（二）骨髓凈化 目前國際上將凈化方法分為兩大類：即負(fù)凈化也稱陰性選擇：將腫瘤細(xì)胞從移植物中清除掉；正凈化也稱陽性選擇：將正常造血干細(xì)胞從移植物中分離純化。臨床上應(yīng)用方法多為負(fù)凈化。但無論是物理學(xué)、生物學(xué)或其他方法都還不夠理想。第三十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）自身骨髓移植前預(yù)處理 ABMT的預(yù)處理目的是：使骨髓產(chǎn)生一定空間，使造血干細(xì)胞有植入和增殖的場所；進(jìn)一步清除體內(nèi)腫瘤細(xì)胞。 精典的方案CTX加全身照射（TBI）或分次全身照射（FTBI）進(jìn)行預(yù)處理。肺需要適當(dāng)屏蔽。第三十四張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）骨髓回輸：同前（五）自身骨髓移植后造血功

15、能恢復(fù)（植活標(biāo)志） ABMT后外周血白細(xì)胞從無恢復(fù)到1.0109/L平均需1621天；血小板恢復(fù)50109/L平均需1421天，粒細(xì)胞恢復(fù)0.510 9/l，平均21天。第三十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月外周血造血干細(xì)胞移植第三十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月一、外周血干細(xì)移植類型 外周血造血干細(xì)胞移植可分為：（1）自體外周血干細(xì)胞移植（APBSCT）（2）異基因外周血造血干細(xì)胞移植（Allo-PBSCT)。 供受體選擇及移植前準(zhǔn)備同骨髓移植。第三十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月二、外周血干細(xì)胞的動(dòng)員與采集（一）動(dòng)員 在正常生理?xiàng)l件下，外周血干細(xì)胞數(shù)

16、量很少，只有骨髓造血干細(xì)胞量的110，因此，不能滿足臨床PBSCT數(shù)量的需要。常用動(dòng)員劑有以下幾類：1重組人造血生長因子 第三十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月2抗腫瘤化療藥物 （1）最大限度地殺滅患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞；（2）在殺傷腫瘤細(xì)胞同時(shí)，也使正常造血細(xì)胞受到損害，但由于正常造血細(xì)胞恢復(fù)時(shí)間比腫瘤細(xì)胞短，故當(dāng)骨髓抑制解除時(shí)和正常造血細(xì)胞恢復(fù)之際，外周血干細(xì)胞數(shù)量反饋性增加達(dá)25100倍，從而起到了造血干細(xì)胞動(dòng)員效果。國內(nèi)常用藥物有環(huán)磷酰胺；阿糖胞苷。第三十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 采集前動(dòng)員方案選擇要根據(jù)惡性腫瘤的類型和患者的具體情況而定。 白血病或惡性淋巴

17、瘤晚期等血液系惡性腫瘤作自身的PBSCT時(shí)，以選擇抗腫瘤化療藥物作為動(dòng)員劑量為適宜。 而對于Allo-PBSCT供者宜選用GMCSF或GCSF。第四十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）采集1采集時(shí)機(jī)選擇：（1）動(dòng)員化療結(jié)束后23周，外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)升至（1.0-2.0)109/L時(shí)。倘若單用G-CSF動(dòng)員宜在白細(xì)胞計(jì)數(shù)升至（5.5-10.0）時(shí)，血小板計(jì)數(shù)50109/L；（2）外周血CD34陽性細(xì)胞1（正常為0.20.1）。但采集時(shí)機(jī)仍需根據(jù)患者的當(dāng)時(shí)情況而定。第四十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月2方法： 運(yùn)用血細(xì)胞分離機(jī)如Fenwall CS3000，分離34次或

18、COBE SPECTRA分離12次，直至采集到造血功能重建所需的細(xì)胞數(shù)。第四十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月四、外周血干細(xì)胞凈化 凈化方法有也是二種：陽性選擇和陰性選擇。五、外周血干細(xì)胞體外擴(kuò)增 為了確保PBSCT后成功的造血重建，CD34細(xì)胞不應(yīng)低于2.5106/kg。因此，可采用部分CD34細(xì)胞進(jìn)行體對擴(kuò)增。第四十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月六、外周血干細(xì)胞的凍存 通常每次經(jīng)血細(xì)胞分離機(jī)分離后所得的細(xì)胞懸液約50ml，可加入等量20二甲基亞砜（DMSO）和RDMI1640保養(yǎng)液，使DMSO的最終濃度調(diào)整至10。然后分裝于血液凍存袋內(nèi)（每袋100ml）。第四十四

19、張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月采取二步降溫法：第一步先1/min速率降至45，第二步則以510/min降至8090，程序結(jié)束后，最后將樣品置于196液氮中貯存。第四十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 當(dāng)需要應(yīng)用時(shí)，回輸前將凍存的外周血干細(xì)胞懸液立即置入4042水浴中3min內(nèi)迅速解凍， 然后低溫離心去除含DMSO上清液。 加等量RPMI1640保養(yǎng)液稀釋，每次輸注400600ml，在1小時(shí)內(nèi)靜脈輸完畢。第四十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月七、外周血干細(xì)胞移植后植活特點(diǎn) 外周血干細(xì)胞移植后，其外周血移植后中性粒細(xì)胞（PMN）上升常出現(xiàn)二個(gè)峰值。 第一次峰值即

20、在PMN恢得到 0.5109/L，平均出現(xiàn)在移植后11天，隨后呈一度下降趨勢，然后約在第34周時(shí)再次出現(xiàn)第二峰值，至后白細(xì)胞恢得正常。第四十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 目前認(rèn)為第一次PMN峰的出現(xiàn)是由于外周血中較晚造血祖細(xì)胞增殖分化的結(jié)果；第二次峰值的出現(xiàn)則是由于較原始造血干細(xì)胞增殖分化的結(jié)果。而血小板升至 50.0109/L平均時(shí)間為13天。第四十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月臍血造血干細(xì)胞移植第四十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 70年代發(fā)現(xiàn)臍血中含有豐富造血細(xì)胞、其數(shù)量和質(zhì)量與骨髓相似。80年代末則用臍血代替骨髓行造血干細(xì)胞移植獲得成功。因此

21、許多國家相繼建立臍血庫，我國也正在籌劃之中，以期有可能解決異基因造血干細(xì)胞移植中遇到的一些難題。第五十張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月一、臍血的采集 臍血可通過臍靜脈穿刺收集，有兩種方式：(1)胎盤娩出前收集；(2)胎盤娩出后收集。 采集臍血時(shí)，可用肝素、ACD（枸櫞酸、枸櫞酸鹽和葡萄糖）和CPD（枸櫞酸鹽、磷酸鹽和葡萄糖）作為抗凝劑。第五十一張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 每個(gè)胎盤可采集量為42240（中位數(shù)103）ml，其中約含有核細(xì)胞1.02.010 9/l，單個(gè)核細(xì)胞(MNC)1.0109,CD34細(xì)胞1.0107 理論上估測足可供體重50公斤以內(nèi)的患者移植之用。

22、 第五十二張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月二、臍血分離與保存臍帶血中的造血細(xì)胞可通過羥乙基淀粉沉淀法、密度梯度分離法、流式細(xì)胞儀分離法及單克隆抗體法等，物理生物學(xué)方法分離獲得。凍存的主要步聚：(1)程控加入20DMSO（每分鐘加體積的5，邊加邊攪拌）；（2）程控降溫、凍存。第五十三張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三、臍血造干血細(xì)胞擴(kuò)增原因： 單個(gè)臍血中造血干細(xì)胞數(shù)量有限。另外，在臍血樣品分離、凍存、融化、處理和輸注等各個(gè)環(huán)節(jié)中還要損耗一部分細(xì)胞，因此不能滿足成人造血細(xì)胞移植的需要。擴(kuò)增過程還可清除移植物中殘留T淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的作用，減少GVHD的發(fā)生率。第五十四張，PP

23、T共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月四、臍血造血干細(xì)胞移植后植活特點(diǎn)（1）受者外周血中性粒細(xì)胞絕對值（ANC）5.0109/L恢復(fù)所需時(shí)間：同胞相關(guān)供者平均為22天，而無關(guān)供者平均為24天。（2）血小板計(jì)數(shù)5.0109/L 恢復(fù)所需時(shí)間：同胞相關(guān)供者平均為48天，而無關(guān)供者平均為54天。第五十五張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月胎肝造血干細(xì)胞移植第五十六張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 1958年Uphoff首先發(fā)現(xiàn)對致死劑量照射小鼠輸注胎肝細(xì)胞懸液后具有促進(jìn)骨髓造血功能恢復(fù)的顯著療效。人們發(fā)現(xiàn)胎齡為36個(gè)月胎肝含有極其豐富的造血干細(xì)胞，它和骨髓造血干細(xì)胞相比，有著類似的增殖分

24、化和重建骨髓造血功能的能力，且此時(shí)淋巴細(xì)胞量小于2，且多為未完全分化成熟的T淋巴細(xì)胞.因此，故移植后GVHD的發(fā)生率低及嚴(yán)重程度輕。第五十七張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月一、胎肝造血細(xì)胞制備 人胎肝可以取自水囊引產(chǎn)、前列腺素引產(chǎn)正常胎兒。在無菌條件下，取得肝臟。將肝臟置于培養(yǎng)皿中剪成細(xì)小塊。然后，投入裝有雙層或單層高壓滅菌處理的銅網(wǎng)（孔徑100200目）的小燒杯，然后倒入約20ml的液體，并用10ml注射器針芯將肝組織塊研磨成漿狀，收集在無菌瓶中，并通過帶4號(hào)針頭的注射器制成單細(xì)胞懸液后備用。第五十八張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月三、胎肝造血干細(xì)胞分離與貯存（一）胎肝造血干細(xì)胞分離 在正常肝組織中近半數(shù)肝細(xì)胞和1的T淋巴細(xì)胞，因此，分離除去這些非造血細(xì)胞有利于胎肝造血干細(xì)胞的超低溫貯存。第五十九張，PPT共六十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 采用直徑為15mm的10ml角度離心管以及聚蔗糖一泛影葡胺分層液，胎肝細(xì)胞在4下經(jīng)非連