抗生素類藥物分析(9)講稿

1、關(guān)于抗生素類藥物的分析 (9)第一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1、掌握抗生素類藥物的類型、結(jié)構(gòu)、質(zhì)量和穩(wěn)定性特點(diǎn)以及分析方法。2、熟悉各類抗生素藥物的有關(guān)物質(zhì)來源、特點(diǎn)和檢查方法。3、了解抗生素藥物的體內(nèi)樣品分析方法和臨床監(jiān)測(cè)應(yīng)用。學(xué)習(xí)要求第二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 概述青霉素Penicillin 第三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月抗生素（antibiotics）抗生素是生物（包括微生物、植物、動(dòng)物）在其生命活動(dòng)中產(chǎn)生的（或并用化學(xué)、生物或生化方法衍生的），能在低微濃度下有選擇抑制或影響它種生物機(jī)能的化學(xué)物質(zhì)的總稱。第四張，PPT共九十一頁，

2、創(chuàng)作于2022年6月抗生素的來源不僅限于細(xì)菌、放線菌和霉菌等微生物，植物和動(dòng)物也能產(chǎn)生抗生素?？股氐膽?yīng)用也遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了抗菌范圍?？股刂饕晌⑸锇l(fā)酵、經(jīng)化學(xué)純化、精制和化學(xué)修飾等過程，最后制成適當(dāng)?shù)闹苿５谖鍙?，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3、穩(wěn)定性差2、活性組分易發(fā)生變異1、化學(xué)純度較低特點(diǎn)：三多：同系物多；異構(gòu)體多；降解物多第六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)產(chǎn)生抗生素的生物來源分類根據(jù)抗生素的作用對(duì)象分類根據(jù)抗生素的作用機(jī)制分類根據(jù)抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類抗生素的分類第七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月抗生素的分類分類（按結(jié)構(gòu)）： 內(nèi)酰胺類、 氨基糖苷類、

3、 四環(huán)素類、 大環(huán)內(nèi)酯類、 多烯大環(huán)類、多肽類、酰胺醇類、 抗腫瘤類、其他抗生素類第八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月抗生素類藥物的細(xì)菌耐藥性 細(xì)菌耐藥性（bacterial resistance）又稱抗藥性，指細(xì)菌產(chǎn)生的對(duì)抗菌藥不敏感的現(xiàn)象，是細(xì)菌自身生存過程中的一種特殊表現(xiàn)形式。第九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1、耐藥性的種類固有耐藥性 （intrinsic resistance）獲得性耐藥性 （acquired resistance）第十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2、耐藥的機(jī)制（1）產(chǎn)生滅活酶，使抗菌藥失活（2）抗菌藥物作用靶位改變（3）降低細(xì)菌外

4、膜通透性（4）影響主動(dòng)流出系統(tǒng)第十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月4、生物學(xué)法3、色譜法2、光譜法1、官能團(tuán)的顯色反應(yīng)（一）鑒別試驗(yàn)抗生素藥物的質(zhì)量分析-內(nèi)酰胺環(huán)的羥肟酸鐵反應(yīng)；鏈霉素的麥芽酚反應(yīng)、坂口反應(yīng)是檢查抗生素滅活前后的抑菌能力，并與已知含量的對(duì)照品對(duì)照后進(jìn)行鑒別。第十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月4、其他指標(biāo)3、與臨床安全性密切相關(guān)的指標(biāo)2、控制有機(jī)和無機(jī)雜質(zhì)的指標(biāo)1、影響產(chǎn)品穩(wěn)定性的指標(biāo)（二）檢查結(jié)晶性、酸堿度、水分或干燥失重等溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)、殘留溶劑、熾灼殘?jiān)?、重金屬等。異常毒性、熱原或?xì)菌內(nèi)毒素、降壓物質(zhì)、無菌等第十三張，PPT共九十一頁

5、，創(chuàng)作于2022年6月1、微生物檢定法（三）含量測(cè)定或效價(jià)測(cè)定是以抗生素對(duì)微生物的殺傷或抑制程度為指標(biāo)來衡量抗生素效價(jià)（potency）的一種方法。測(cè)定方法可分為稀釋法、比濁法和管碟瓊脂擴(kuò)散法優(yōu)點(diǎn)1、靈敏度高2、與臨床效果一致3、適用范圍廣4、可測(cè)定總效價(jià)缺點(diǎn)1、操作繁瑣2、培養(yǎng)時(shí)間長3、測(cè)定誤差大第十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2、理化方法優(yōu)點(diǎn)1. 準(zhǔn)確度高2. 簡單、快速缺點(diǎn)1. 不一定代表生物效價(jià)2. 易受雜質(zhì)干擾第十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3、抗生素活性表示方法以效價(jià)單位表示，指每毫升或每毫克中含有某種抗生素的有效成分的多少用單位（u）或微克（g）表

6、示第十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) -內(nèi)酰胺類抗生素一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)青霉素（penicillins）第十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月頭孢菌素類（cephalosporins）第十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月青霉素第十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 氨芐西林（氨芐青霉素）第二十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月阿莫西林第二十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月頭孢氨芐第二十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月性質(zhì)（1）酸性與溶解度游離羧基 酸性堿金屬鹽易溶與水，有機(jī)堿鹽難溶于水第二十三張，PPT共九十一

7、頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）旋光性*青霉素類 ： C3 C5 C6 頭孢菌素類 ： C6 C7第二十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）紫外吸收特征青霉素類 母核無明顯UV 多數(shù)有苯環(huán)取代基 頭孢菌素類 母核有共軛體系第二十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（4）-內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大 酰胺鍵易水解 干燥純凈 穩(wěn)定 水溶液 不穩(wěn)定 第二十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（某些金屬離子）（溫度）某些氧化劑失效降解青霉素類酸、堿、青霉素酶第二十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月二、鑒別試驗(yàn)（一）色譜法HPLC：tRTLC：Rf第

8、二十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）光譜法1、紅外吸收光譜2、紫外吸收光譜特征峰最大吸收波長鑒定法第二十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1、羥肟酸鐵反應(yīng)（三）呈色反應(yīng)-內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類H2NOH HClNaOH，C2H5OH羥肟酸衍生物H+Fe3+呈色第三十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月3、其他呈色反應(yīng)2、類似肽鍵的反應(yīng)雙縮脲和茚三酮反應(yīng)第三十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2、重氮化-偶合反應(yīng)1、鉀、鈉離子的火焰反應(yīng)（四）各種鹽的反應(yīng)焰色反應(yīng)K+紫色Na+鮮黃色普魯卡因青霉素紅色的偶氮染料沉淀第三十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年

9、6月3、青霉素鹽的沉淀反應(yīng)青霉素鉀青霉素鈉H2OHCl白色沉淀第三十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月三、特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)高分子聚合物有關(guān)物質(zhì)異構(gòu)體HPLC雜質(zhì)吸光度限量第三十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月四、含量測(cè)定（一）高效液相色譜法適用于本類藥物的原料藥、各種制劑及生物樣本的分析測(cè)定第三十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素鏈霉素 慶大霉素 卡那霉素新霉素 巴龍霉素 硫酸奈替米星硫酸西索米星 硫酸依替米星堿性環(huán)己多元醇第三十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1、化學(xué)結(jié)構(gòu)鏈霉胍 + 鏈霉糖 + N-甲

10、基-L-葡萄糖胺 鏈霉素鏈霉雙糖胺苷元糖第三十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第三十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月鏈霉胍鏈霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺第三十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月巴龍霉素D-葡萄糖胺+脫氧鏈霉素+D-核糖+巴龍霉糖巴龍胺巴龍二糖胺第四十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月慶大霉素 糖 苷元 絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺 糖 第四十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第四十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于202

11、2年6月絳紅糖胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺第四十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月慶大霉素C復(fù)合物 慶大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 慶大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 慶大霉素C1a R、R1、R2=H 慶大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 慶大霉素C2b R=R1=H R2=CH3第四十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2、性質(zhì)（1）溶解度與堿性（2）旋光性（3）苷的水解與穩(wěn)定性（4）紫外吸收光譜含多羥基：堿性基團(tuán)：3.4.5氨基糖鏈霉素： pH57.5最穩(wěn)定鏈霉素：230nm第四十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于

12、2022年6月（一）茚三酮反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)羥基胺類-氨基酸類茚三酮藍(lán)紫色化合物Ch.P：硫酸小諾米星第四十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）Molisch試驗(yàn) 羥甲基糠醛（含六碳糖結(jié)構(gòu)氨基糖苷類酸性水解產(chǎn)物）-萘酚蒽酮紅紫色藍(lán)紫色第四十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)（三）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物對(duì)二甲氨基苯甲醛H+紅色（Elson-Morgan反應(yīng)）巴龍霉素第四十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月(縮合)第四十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月紅色對(duì)二甲氨基苯甲醛H+第五十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月 麥芽酚反

13、應(yīng)（四） 鏈霉糖特有反應(yīng)H+分子重排第五十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月紫紅麥芽酚第五十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月鏈霉胍特有反應(yīng)（或-萘酚）8-羥基喹啉坂口反應(yīng)（五） -萘酚第五十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（六）硫酸鹽反應(yīng)鑒別一：+氯化鋇，白色沉淀；沉淀在鹽酸或硝酸中不溶解鑒別二：+醋酸鉛白色沉淀；沉淀在醋酸銨或氫氧化鈉中溶解。第五十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（七）色譜法2、高效液相色譜法1、薄層色譜法薄層板：硅膠展開劑：氯仿-甲醇-濃氨水顯色劑：茚三酮或碘蒸汽比較供試品和對(duì)照品溶液的色譜圖第五十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于

14、2022年6月1、紅外吸收光譜2、紫外吸收光譜（八）光譜法硫酸阿米卡星、妥布霉素、硫酸慶大霉素硫酸慶大霉素 無共軛雙鍵系統(tǒng)，在紫外區(qū)無吸收。第五十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）鏈霉素中鏈霉素B的檢查三、有關(guān)物質(zhì)及組分分析鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）1. 來源 反應(yīng)中間體 2. 方法 TLC中的對(duì)照品法 （BP）第五十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月薄層板展開劑溶液配制點(diǎn)樣量顯色劑判定法第五十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月對(duì)微生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同工藝差別C組分比例不一致規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量ChPUSPBPJP慶大霉

15、素C組分的測(cè)定（二）第五十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月max = 330nm衍生化原理 1.第六十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月1-烷基-2-烷基硫代異吲哚衍生物第六十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月RPHPLC方法 2.規(guī)定 C1 2550% C1a 1540% C2a +C2 2050%計(jì)算 3.峰面積歸一化法第六十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月討論（1）柱效（2）流動(dòng)相（3）衍生化試劑與衍生物的穩(wěn)定性（4）離子對(duì)試劑濃度影響第六十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）硫酸鹽測(cè)定絡(luò)合滴定法HPLC法第六十四張，PPT共九十一

16、頁，創(chuàng)作于2022年6月三、 含量測(cè)定微生物檢定法HPLC法第六十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月HPLC法離子交換、離子對(duì)、反相HPLC法需進(jìn)行衍生化或采用電化學(xué)檢測(cè)器、蒸發(fā)光檢測(cè)器第六十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 四環(huán)素類抗生素一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1、化學(xué)結(jié)構(gòu)tetracyclinesABCD第六十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月123456789101112第六十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第六十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月四環(huán)素（TC）tetracycline第七十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月金

17、霉素 (CTC) chlortetracycline氯四環(huán)素第七十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月土霉素 (OTC) oxytetracycline氧四環(huán)素第七十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月多西環(huán)素 (DOTC) doxycycline脫氧土霉素第七十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月美他環(huán)素（METC） metacycline第七十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月第七十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2 、性質(zhì)（1）酸堿性與溶解度1.與酸、堿均能成鹽2.強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中溶解度 酚羥基、烯醇型羥基 弱酸性二甲胺基 弱堿性第七十六張，PP

18、T共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）旋光性有不對(duì)稱C原子，有旋光性 第七十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）紫外吸收和熒光性質(zhì)UV：土霉素酸性溶液353nm 270290 多西環(huán)素酸性甲醇液349nm 325363熒光：土霉素 酸性降解綠色藍(lán)色綠色黃色金霉素土霉素四環(huán)素堿性降解加熱藍(lán)色第七十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（4）不穩(wěn)定性1.）差向異構(gòu)化淡黃黑藍(lán)色熒光ETC第七十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月差向四環(huán)素第八十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)化）第八十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月2.）降解反應(yīng)（1）酸性下降解max = 445nmmax = 435nm橙黃色第八十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月脫水四環(huán)素第八十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月TCETCATCEATC第八十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）堿性下降解（熒光）第八十五張