血型鑒定和交叉配血中常見問題分析和處理包括2

1、精選文檔精選文檔PAGEPAGE11精選文檔PAGE血型判定和交錯(cuò)配血中常有問題剖析和辦理一、血型相容性檢測二、ABO血型正反定型型不一致的原由剖析及辦理三、交錯(cuò)配血中常有問題剖析及辦理四、不測抗體挑選的意義和檢測方法五、弱D檢測的的意義和檢測方法一、血型相容性檢測1、受血者和供血者AB0血型能否相容。2、受血者和供血者RhD血型能否相容。3、主次側(cè)交錯(cuò)配血能否相容。4、受血者血清中能否有臨床存心義的不測抗體。二、ABO正反定型不符的原由剖析和辦理（一）原由1實(shí)驗(yàn)者操作技術(shù)的錯(cuò)誤：致使假陰性的有：未加入抗體或血清。未辨別溶血。血清與紅細(xì)胞比率不妥離心速度或時(shí)間不夠。使用無效或錯(cuò)誤試劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2、記錄或解說錯(cuò)誤致使假陽性的有：離心速度過大或時(shí)間過長、使用了遇到細(xì)菌污染的試劑、試驗(yàn)器皿不潔凈、實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄或解說錯(cuò)誤2、紅細(xì)胞標(biāo)本問題：患者近期接受了大批ABO血型相容但不一樣型的紅細(xì)胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型紅細(xì)胞某些ABO基因變異的個(gè)體或ABO亞型紅細(xì)胞，一些白血病或其余惡性疾病患者的紅細(xì)胞ABO抗原太弱，應(yīng)用抗A、抗B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反響紅細(xì)胞獲取性或遺傳性的異樣，如獲取性B抗原紅細(xì)胞或Tn/T多凝集紅細(xì)胞，人血清抗A、抗B試劑可能與這些異樣的紅細(xì)胞反響使用未清洗的紅細(xì)胞標(biāo)本，其表面黏附的血漿或血清中含針抗衡A、抗B試劑中染色劑或其余成分的抗體，出現(xiàn)假陽性反響患者血清

3、中高活性、高濃度冷自己抗體嚴(yán)重致敏（包被）自己紅細(xì)胞，以致自覺地發(fā)生凝集，而不是抗體試劑的特異性免疫反響所致紅細(xì)胞表面包被IgG類抗體3、血清標(biāo)本的問題：小的纖維蛋白凝集的紅細(xì)胞凝塊被誤以為是血液凝集，如使用血漿標(biāo)本或未完好去除纖維蛋白的血清標(biāo)本時(shí)。免疫克制疾病患者血清中ABO抗體減少或消逝。老年人ABO抗體減弱4-6月齡內(nèi)嬰兒血清中ABO抗體陰性或很弱，一般只測正定型血清中不正常濃度和比率的蛋白質(zhì)成分或高分子蛋白增加可惹起非特異凝集，如緡錢狀紅細(xì)胞的非特異凝集血清中含抗A、抗B之外的其余紅細(xì)胞抗體，如抗M、抗I等?；颊呓邮芰薃BO血型不一樣的骨髓移植患者血清中含有針對紅細(xì)胞保護(hù)劑的抗體大批C

4、1分子因?yàn)楫悩痈咝r(jià)的補(bǔ)體聯(lián)合抗體抗A、抗B作用，聯(lián)合到紅細(xì)胞膜上，遮蓋了A、B抗原位點(diǎn)，不發(fā)生凝集（二）、剖析和辦理基本程序：1.從頭收集標(biāo)本，以防止收集、標(biāo)志、污染等錯(cuò)誤查問患者既往病史、輸血史、用藥史、骨髓移植史完全清洗標(biāo)本或試劑紅細(xì)胞應(yīng)用抗AB、抗A1、或抗H檢測紅細(xì)胞剖析抗篩結(jié)果，確立結(jié)果能否受同種異型或自己冷抗體擾亂室溫孵育30min后，離心察看結(jié)果，以檢測弱的抗原抗體反響做自己紅細(xì)胞做比較，以確立自己抗體的擾亂ABO正反定型型不符的分類：抗原表達(dá)減弱所致的ABO正反定型型不符抗-A、抗-B血清的不測反響所致的ABO正反定型型不符不測的血清學(xué)反響所致的ABO正反定型型不符抗原表達(dá)減

5、弱所致的ABO正反定型型不符:血型抗原表達(dá)減弱的常有原由:ABO亞型紅細(xì)胞白血病或其余惡性疾病患者的紅細(xì)胞ABO抗原太弱，應(yīng)用抗A、抗B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反響重生兒抗原表達(dá)減弱所致ABO正反定型型不符的辦理:將抗A、抗B和抗A，B試劑與清洗過的紅細(xì)胞在室溫或4孵育30min，以加強(qiáng)抗原、抗體的聯(lián)合用木瓜酶、無花果酶和菠蘿蛋白酶辦理紅細(xì)胞，以加強(qiáng)抗原、抗體的聯(lián)合應(yīng)用抗AB、抗A1、或抗H檢測紅細(xì)胞用人血清抗A、抗B進(jìn)行汲取放散試驗(yàn)，檢測弱A、B抗原，但不是全部單克隆抗體試劑都適合做汲取放散試驗(yàn)，單克隆抗A、抗B一定經(jīng)過系統(tǒng)考證，且同時(shí)要做O型血汲取放散試驗(yàn)作比較檢測唾液中A、B和H血型抗原物

6、質(zhì)抗-A、抗-B血清的不測反響所致的ABO正反定型型不符惹起抗-A、抗-B血清不測反響的要素：獲取性B紅細(xì)胞:獲取性B紅細(xì)胞(特色)常出此刻有腸道細(xì)菌進(jìn)入血循環(huán)的疾病，也可發(fā)生在正常人往常只有A型人能出現(xiàn)獲取性B抗原常伴有T和Tn多凝集紅細(xì)胞出現(xiàn)(細(xì)菌感染時(shí))自己抗B不與自己獲取性B抗原反響(無自凝現(xiàn)象)獲取性B紅細(xì)胞(判定)調(diào)整人血清抗B試劑pH至6.0時(shí)，即不與獲取性B細(xì)胞反響分泌型者唾液中無B血型物質(zhì)乙酸酐辦理能顯然減弱其反響，但正常B細(xì)胞不受影響獲取性類A抗原造血干細(xì)胞的體細(xì)胞突變可造成部分成細(xì)胞連續(xù)性Tn抗原激活，類同A抗原Tn和T同樣屬隱蔽行院抗原,激活裸露后與全部血型的血清和人血

7、清血型抗體出現(xiàn)凝集反響(全凝后多凝)蛋白酶能降解Tn分子，除去與抗A凝集反響性，而正常A抗原不受影響,也可經(jīng)過AB血清證明混淆視線凝集非O型人近期輸用O型血骨髓移植后A3細(xì)胞與抗A呈典型的混淆視線凝集現(xiàn)象單合子的鑲嵌紅細(xì)胞后雙合子的交移體紅細(xì)胞抗體包被紅細(xì)胞患HDN嬰兒，存在自己免疫或同種異體免疫的成人，其紅細(xì)胞嚴(yán)重包被IgG抗體分子與含必定蛋白質(zhì)濃度的試劑（抗D、抗A、抗B）產(chǎn)生凝集45放散后，抗體解離，即可正確立型不測的血清學(xué)反響所致的ABO正反定型型不符惹起不測血清學(xué)反響的要素抗體太弱或消逝非正常高濃度的抗A、抗B可惹起前帶現(xiàn)象A2、A2B或其余ABO亞型人血清中可能有抗A1患者血漿蛋白

8、濃度過高或靜脈輸用了大批大分子藥物等原由，可發(fā)生近似凝集現(xiàn)象，如緡錢狀凝集冷自己抗體，如抗I、抗IH、抗IA等自己免疫性溫型抗體同種抗體/不測抗體不測的血清學(xué)反響所致的ABO正反定型型不符及其辦理抗體太弱或消逝，如重生兒、老年人、免疫克制患者，應(yīng)注意患者的年紀(jì)和診療非正常高濃度的抗A、抗B可惹起前帶現(xiàn)象，致使假陰性,將血清稀釋或用EDTA（2.5）辦理可除去A2、A2B或其余ABO亞型人血清中可能有抗A1,抗A1只凝集A1型紅細(xì)胞而不凝集A2、O型紅細(xì)胞患者血漿蛋白濃度過高或靜脈輸用了大批大分子藥物等原由，可發(fā)生近似凝集現(xiàn)象，如緡錢狀凝集，將血清用生理鹽水稀釋3倍或用鹽水替代技術(shù)可除去冷自己抗

9、體，如抗I、抗IH、抗IA等(自凝)，a.全部試劑及細(xì)胞37孵育，37下判讀結(jié)果將冷自己抗體汲取將血清用0.01mol/LDTT辦理和再定型自己免疫性溫型抗體自己免疫性溶血性貧血病人血清中可有溫型自己抗體37反響比室溫強(qiáng)血清能凝集自己和其余各型紅細(xì)胞若紅細(xì)胞上吸附有這類自己抗體，在自己或別人血清中均可出現(xiàn)凝集自己免疫性溫型抗體正定型被誤以為AB型，反定型被誤以為O型：用遞加溫度（22，37，45）清洗紅細(xì)胞后再做血型判定同種抗體/不測抗體：室溫下抗-P、抗-M、抗E等，可能出現(xiàn)不測反響，擾亂ABO血型判定，抗體特異性抗體判定，選擇抗原陰性的紅細(xì)胞做反定型應(yīng)用舉例多發(fā)性骨髓瘤致ABO血型判定困難

10、1例多發(fā)性骨髓瘤（MM）：一種惡性漿細(xì)胞疾病，大批分泌異樣的單克隆免疫球蛋白(M蛋白),影響紅細(xì)胞表面負(fù)電荷狀態(tài),血清蛋白濃度和比率異樣,A/G比率失調(diào),紅細(xì)胞呈緡錢狀非特異性齊集,給血型判定帶來必定的困難。病情簡介：患者，女，38歲，因骨痛、貧血2個(gè)月住院；Hb65g/L,WBC6.4109/L,PLT90109/L,尿本周蛋白陽性,BUN、Cr均異樣；骨髓象示:漿細(xì)胞37%。診療：多發(fā)性骨髓瘤。有既往輸血史。血型血清學(xué)檢查：正定型：A型，RhD（），反定型：O型，直抗：（），抗篩：（）辦理：1.汲取試驗(yàn)：6次清洗后的患者RBC等量的抗-A、抗-血清（1：128），4孵育1h離心，取上清，測

11、汲取液的抗A、抗B效價(jià)抗A降低顯然，抗B1：128放散試驗(yàn)：汲取后的患者RBC用NS清洗6次（完全清洗）等量的NS56孵育1015min放散液與5標(biāo)準(zhǔn)A、B型RBC反響Ac:+，Bc:-汲取放散試考證明：患者RBC上有A抗原，無B抗原，為A型將患者血清用O型標(biāo)準(zhǔn)RBC汲取：等份血清等份O細(xì)胞，室溫振蕩1530min離心，取上清，轉(zhuǎn)移到另一等份O細(xì)胞中汲取后的血清與標(biāo)準(zhǔn)A、B紅細(xì)胞反響Ac:-，Bc:+（患者血清中有抗-B，無抗-A）患者血型最后確立為A型RhD（），輸注2U經(jīng)過挑選的A型懸浮RBC后，未見任何不良反響三、交錯(cuò)配血試驗(yàn)中常有問題剖析和辦理交錯(cuò)配血原則：除非極為緊迫狀況，輸血前患者

12、與獻(xiàn)血者一定進(jìn)行交錯(cuò)配血R受血者血清中無馬上或遲發(fā)性地凝集和(或)溶解所輸入的紅細(xì)胞的抗體R獻(xiàn)血者血清中無馬上或遲發(fā)性地凝集和(或)溶解受血者紅細(xì)胞的抗體交錯(cuò)配血方法：鹽水介質(zhì)交錯(cuò)配血：只好檢出IgM類抗體（主為ABO血型系統(tǒng)抗體），沒法檢出IgG，擁有很大的危險(xiǎn)性，只好在受血者血清中不含臨床存心義抗體的狀況下進(jìn)行。檢測不完好抗體的交錯(cuò)配血：臨床最常有的遲發(fā)型輸血反響ABO系統(tǒng)之外的其余血型(如Rh）的IgG類抗體致使的血型不相容有輸血史、妊娠史或血清中存心外抗體的患者一定進(jìn)行不完好抗體的交錯(cuò)配血試驗(yàn)包含抗人球蛋白法、蛋白酶法、促凝劑法等抗人球蛋白法:判定不完好抗體最靠譜的方法，傳統(tǒng)的抗人球法

13、不可以成為臨床輸血的慣例查驗(yàn)。1986年,Lapierre發(fā)明的微柱凝膠抗球蛋白試驗(yàn)正確、靠譜、不需清洗，可方便的應(yīng)用于抗體篩檢和交錯(cuò)配血試驗(yàn)交錯(cuò)配血不相容的原由及解決方法血型判定錯(cuò)誤：出現(xiàn)問題最多的是受血者、獻(xiàn)血者紅細(xì)胞ABO血型不相容，其次才是技術(shù)錯(cuò)誤。復(fù)查血型（責(zé)任錯(cuò)誤）患者存在冷反響自己抗體：采納自己比較和37水浴以及遞加鹽水溫度清洗患者紅細(xì)胞等方法清除非特異性凝集的擾亂患者存在溫反響自己抗體：采納汲取放散試驗(yàn)后取患者的紅細(xì)胞與血清和同型的清洗紅細(xì)胞進(jìn)行交錯(cuò)配血。血清蛋白雜亂及白球蛋白比率倒置惹起的假凝集：如多發(fā)性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表現(xiàn)為主側(cè)凝集E:ABO之外的其余血型系統(tǒng)惹

14、起的交錯(cuò)配血不合：常發(fā)生于有輸血史、妊娠史的患者，產(chǎn)生主側(cè)凝集。如抗D、抗E、抗C、抗c、抗I、抗e和抗Fyb等，用經(jīng)挑選的不含相應(yīng)抗原的血液進(jìn)行交錯(cuò)配血即可除去。獻(xiàn)血者紅細(xì)胞DAT陽性：大概萬分之一健康人包被了IgG或補(bǔ)體的紅細(xì)胞，不該輸用此類細(xì)胞。獻(xiàn)血者紅細(xì)胞是多凝集紅細(xì)胞：正常人血清中可含有非紅細(xì)胞刺激而產(chǎn)生的自然發(fā)生的抗體，如抗T、抗Tn等。應(yīng)挑選低水平抗T、抗Tn的血液四、不測抗體挑選的意義和方法不測抗體:是指除ABO血型系統(tǒng)抗體之外的其余抗體，如抗D、抗E等。主要經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，人群檢出率為0.32.0，是惹起遲發(fā)性免疫反響的主要原由。臨床存心義抗體：惹起重生兒溶血病、

15、溶血性輸血反響，或許使輸入的紅細(xì)胞存活期減少的、在37反響的同種異型抗體。（IAT陽性?。┡R床無心義抗體：室溫或低溫反響的抗體，但抗-Vel,抗-P等，在體內(nèi)惹起顯然的紅細(xì)胞損壞。挑選方法要求:1.選擇敏感的技術(shù)檢測出受血者血清中特別低水平的臨床存心義抗體。高度注意！即便受血者血清中抗體對輸入的不相容紅細(xì)胞抗原呈弱反響，但也可以發(fā)生迅速的強(qiáng)的回想反響，增添抗體產(chǎn)生，損壞紅細(xì)胞每一試劑瓶中只好有一人份的試劑紅細(xì)胞，不行將多人份紅細(xì)胞混淆，以防止紅細(xì)胞混淆后對弱抗原紅細(xì)胞的稀釋。FDA對試劑紅細(xì)胞抗原表達(dá)的要求：D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb

16、,Jka,Jkb.挑選方法實(shí)驗(yàn)方法:1.鹽水直接凝集試驗(yàn)：是最簡單的血型血清學(xué)方法，緊迫狀況下可在室溫下立刻離心。可檢出室溫或低于室溫反響的臨床意義不大的抗體如抗M、抗N、抗P、抗Lea等球蛋白試驗(yàn)：可檢出絕大多數(shù)臨床存心義的不完好抗體，抗球蛋白試劑要有多特異性抗球蛋白抗體，此中含有抗IgG和抗C3d。含抗補(bǔ)體的球蛋白也能夠檢出聯(lián)合補(bǔ)體的無臨床意義的冷抗體，如抗I、抗HI等其余試驗(yàn):蛋白酶試驗(yàn)、聚乙二醇試驗(yàn)、LISS和微柱凝膠試驗(yàn)等各樣試驗(yàn)都有其自己的特色，合用不一樣范圍，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)依據(jù)自己的條件，成立實(shí)驗(yàn)室慣例試驗(yàn)程序和規(guī)程抗體特異性判定:血清標(biāo)本，EDTA抗凝（防止補(bǔ)體體外致敏紅細(xì)胞）血漿標(biāo)

17、本病史：輸血、妊娠、用藥試劑：譜細(xì)胞、加強(qiáng)介質(zhì)，抗人球蛋白試劑自己比較對譜細(xì)胞的要求A:許多于8人份的O型紅細(xì)胞B:血型系統(tǒng)包含：Rh,Kell,Duffy,Kidd,P,Lewis,MNS自己比較的意義:陰性：血清只與試劑紅細(xì)胞反響，只有同種抗體存在陽性：有自己抗體存在，或與同種抗體并存自己汲取后判定同種抗體！抗體挑選的意義發(fā)現(xiàn)臨床存心義的抗體減少溶血性輸血反響的發(fā)生有益于免疫溶血性疾病的診療有益于提早選擇和準(zhǔn)備相合的血液保證臨床輸血安全、實(shí)時(shí)、有效1抗體挑選陰性，鹽水介質(zhì)交錯(cuò)配血不相容供受血者ABO血型不相容受血者A2或A2B亞型，血清中抗A1與供血者A1或AB型紅細(xì)胞凝集存在室溫反響的同

18、種抗體，如抗-M等獻(xiàn)血者是多凝紅細(xì)胞，隱蔽抗原T、Tn等裸露2抗體挑選陰性，檢測不完好抗體的交錯(cuò)配血不相容獻(xiàn)血者是紅細(xì)胞DAT陽性萬分之一健康人紅細(xì)胞表面包被IgG或補(bǔ)體，不該當(dāng)輸此類紅細(xì)胞抗體與低頻抗原反響人群1%血清中含有針對低頻抗原的抗體挑選細(xì)胞一般缺乏低頻抗原3抗體挑選陽性，交錯(cuò)配血相容自己抗-H，O型紅細(xì)胞含有大批H抗原，而A1、A1B含量很低。室溫反響，37無反響，無臨床意義獻(xiàn)血者紅細(xì)胞正好不含對應(yīng)的抗原抗-Lebh只與O型Le(a-b+）反響，不與A1、A1BLe(a-b+）反響，室溫反響，37無反響，臨床意義不大4抗體挑選陽性，交錯(cuò)配血不相容、同種抗體存在，自己比較陰性選擇對應(yīng)抗原陰性的血做交錯(cuò)。如抗體是抗-M、抗N、抗-P1、抗-Lea等就不必確認(rèn)對應(yīng)抗原缺失，但需37交錯(cuò)配合、同種抗體存在，自己比較陽性近期（2-3月）接受過輸血的患者體內(nèi)的同種抗體可惹起自己比較陽性循環(huán)中的自己抗體可惹起自己比較陽性差別二者很重要（很難），因選擇紅細(xì)胞程序不一樣可用對應(yīng)抗原陽性的細(xì)胞做汲取放散實(shí)驗(yàn)來證明同種抗體存在患者血清中的同種抗體可與輸入的紅細(xì)胞起反響如是存心義的抗體，應(yīng)選擇抗原陰性紅細(xì)胞輸血37度抗人球交錯(cuò)配血相合是一定的、冷反響自己抗體強(qiáng)反響冷抗體（疾?。┤瞧鹧团卸ê徒诲e(cuò)配血困難，臨床