鹽酸水蘇堿在中藥生產(chǎn)過程中的含量變化及影響因素研究

1、鹽酸水蘇堿在中藥消費過程中的含量變化及影響因素研究【摘要】目的討論鹽酸水蘇堿在中藥消費過程中的含量變化及影響因素。方法建立鹽酸水蘇堿HPL含量測定方法，考察提娶濃縮、枯燥工藝中各影響因素對鹽酸水蘇堿保存率的影響，分析益母草藥材儲藏過程中的各主要影響因素。結(jié)果水提取工藝中提取時間、提取溫度、提取次數(shù)、水用量對鹽酸水蘇堿的影響較?。粷饪s過程中鹽酸水蘇堿有一定損失，但濃縮溫度、濃縮時間、真空度并非主要影響因素；枯燥過程中的溫度、真空度、時間等參數(shù)對鹽酸水蘇堿的影響較校在益母草儲藏過程中，見光降解是鹽酸水蘇堿含量下降的主要原因。結(jié)論光對鹽酸水蘇堿的穩(wěn)定性有重大影響?！娟P(guān)鍵詞】鹽酸水蘇堿益母草高效液相色

2、譜見光降解Abstrat：bjetiveTexplrethententhangefstahydrinehydrhlrideinhineseediineprdutinpress.ethdsAnHPLethdasestablishedstahydrinehydrhlridetdeterinethententfretentinratefstahydrinehydrhlrideasappliedastheparaeterstinvestigatethepressesfextratin,nentratinanddryingandtheainfatrsinthestragefherbalenuriasin

3、vestigatedbyfatrialanalysis.ResultsTheinflueneftie,teperature,frequeny,andatervlueinextratinpresststahydrinehydrhlrideaseak.Thereisalittlelssfstahydrinehydrhlrideinnentratinpress;theinfluenefteperature,tie,andvauuvaluetstahydrinehydrhlrideaseak.Depsebylightasthestiprtantfatrtntentdelinefstahydrinehy

4、drhlrideinthestragefherbalenuri.nlusinLightshedaarkedinfluenenthestabilityfstahydrinehydrhlride.Keyrds：Stahydrinehydrhlride；Herbalenuri；HPL；Depsebylight益母草為唇形科植物益母草LenurusjapniusHutt.的新穎或枯燥地上局部，主治月經(jīng)不調(diào)、胎漏難產(chǎn)、行經(jīng)腹痛及產(chǎn)后瘀阻等癥，有“血家圣藥“經(jīng)產(chǎn)良藥之稱。近年來其逐步被應(yīng)用于心腦血管疾病的防治，臨床效果較好，療效甚至超過復(fù)方丹參注射液1。現(xiàn)代藥理研究說明2，益母草中的益母草堿、鹽酸水蘇堿等

5、多種生物堿具有較強(qiáng)的興奮子宮、抗血小板聚集、降低血液黏度、抑制血栓形成等作用。據(jù)統(tǒng)計，藥典及部頒標(biāo)準(zhǔn)中含益母草的多數(shù)中成藥，其鹽酸水蘇堿的理論保存率理論保存率成品中待測成分的標(biāo)示總量/處方中待測成分的藥典規(guī)定最低總量100%均低于40。在產(chǎn)后逐瘀膠囊及婦血安片的成品檢驗中同樣發(fā)現(xiàn)，兩者的鹽酸水蘇堿理論保存率均低于20，局部批次甚至不合格。同時，在對益母草藥材進(jìn)展挑選的過程中發(fā)現(xiàn)，各產(chǎn)地的藥材鹽酸水蘇堿含量差異較大，且同一產(chǎn)地新上市藥材的含量明顯高于去年上市的老藥材。為了考察其原因，本研究討論了中藥消費中提娶濃縮、枯燥工藝過程對鹽酸水蘇堿含量的影響，并對益母草藥材的穩(wěn)定性影響因素進(jìn)展了初步研究。

6、1儀器與試藥HP1100高效液相色譜儀(G1322ADegasser，G1311AQuatPup，G1313AAlS，G1316Al，G1315ADAD)HPheStatin色譜工作站；KQ3200DE型醫(yī)用數(shù)控超聲儀昆山市超聲儀；GL45型密閉耐壓瓶SHTT；N-11型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀日本EYELA；S101-1E電熱鼓風(fēng)枯燥箱重慶萬達(dá)儀器；DZF-6050真空枯燥箱上海精宏實驗設(shè)備；B-290Buhiinispray-dryer瑞士Buhi公司；HZ-B型動態(tài)微波真空枯燥機(jī)廣州興興微波能設(shè)備。益母草藥材購于廣州清平藥材市場，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)賴小平教授鑒定；鹽酸水蘇堿對照品供含量測定用，批號：11

7、0712-202207，購自中國藥品生物制品檢定所；磷酸二氫鉀、三乙胺、磷酸是分析純。2方法與結(jié)果2.1鹽酸水蘇堿含量測定2.1.1色譜條件PhenenexLunasx色譜柱(4.6250，5)；流動相為0.05lL-1磷酸二氫鉀含0.03三乙胺和0.1磷酸，pH=3；流速1lin-1，柱溫30，進(jìn)樣量10l。鹽酸水蘇堿在上述色譜條件下與其他成分實現(xiàn)了基線別離。見圖12。2.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取鹽酸水蘇堿對照品適量，精細(xì)稱定，加0.1lL-1鹽酸溶制成每毫升含鹽酸水蘇堿1g的對照品溶液。分別精細(xì)汲取對照品溶液2，4，6，8，10，12l進(jìn)展色譜測定，按上述色譜條件測定峰面積，以進(jìn)樣量Y，g對

8、峰面積X,Ause進(jìn)展線性回歸，回歸方程為：Y=290.44X+125，r=0.9998。2.1.3供試品溶液的制備取樣品溶液，鹽酸調(diào)節(jié)pH值至12，通過D101大孔樹脂內(nèi)徑1.5,柱高10，以0.1lL-1鹽酸溶液150l洗脫，合并洗脫液；將上述洗脫液通過0017732強(qiáng)酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂內(nèi)徑1.5，柱高15，水洗至流出液呈中性，棄去水洗脫液；再用2lL-1氨溶液150l洗脫，搜集洗脫液，蒸干，殘渣用0.1lL-1鹽酸溶液溶解并轉(zhuǎn)移至5l容量瓶中，加0.1lL-1鹽酸溶液至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。精細(xì)汲取10l，進(jìn)樣，按上述色譜條件進(jìn)展HPL測定，即得。2.2水提

9、取工藝對鹽酸水蘇堿的影響結(jié)合益母草消費中多以水為提取溶媒的實際情況，為考察水提取過程中各工藝參數(shù)對鹽酸水蘇堿含量的影響，本研究選用L934正交表進(jìn)展實驗，設(shè)定提取時間、提取溫度、提取次數(shù)、水用量為考察因素見表1，以鹽酸水蘇堿總量為考察指標(biāo)。結(jié)果見表2。對表2結(jié)果進(jìn)展統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果見表3。表1因素程度，表2正交實驗方案及結(jié)果，表3方差分析略。極差及方差分析結(jié)果說明，各因素對提取效果的影響程度依次為BAD，但各因素均無顯著性差異。結(jié)果顯示，隨著各工藝參數(shù)強(qiáng)度的增加，其鹽酸水蘇堿提取率也逐漸升高，最高到達(dá)93。提示常規(guī)水提取工藝過程對鹽酸水蘇堿的影響較校轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3濃縮工藝對鹽酸水

10、蘇堿的影響模擬消費狀態(tài)下水提取液在濃縮過程中常采用的工藝參數(shù)，以考察濃縮過程對鹽酸水蘇堿的影響。將益母草切段1左右，稱取500g，加20倍量水80溫浸2h，濾過，濾液備用。將所得濾液加水補(bǔ)足至6000l，等分成12份，每份500l，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，通過控制加熱溫度70100、真空度-0.07Pa常壓，分別使其濃縮至稠膏狀態(tài)10g左右，記錄相應(yīng)濃縮時間，并按照前面建立的鹽酸水蘇堿含量測定方法測定含量，并計算鹽酸水蘇堿總量及實際保存率實際保存率樣品中待測成分的實際總量/投料藥材中待測成分的實際總量100%。結(jié)果見表4。表4不同濃縮狀態(tài)下鹽酸水蘇堿的含量測定略結(jié)果顯示，在常壓濃縮及不同溫度的減壓濃

11、縮狀態(tài)下，益母草提取液中的鹽酸水蘇堿總量均有所降低，各狀態(tài)間相差并不明顯。提示濃縮過程對鹽酸水蘇堿有一定影響，但濃縮溫度、真空度、時間等并非主要影響因素。2.4枯燥工藝對鹽酸水蘇堿的影響結(jié)合目前國內(nèi)中藥消費的實際情況，分別考察常壓枯燥、減壓枯燥、真空微波枯燥、噴霧枯燥等常用枯燥方法對鹽酸水蘇堿的影響。將益母草切段1左右，稱取2000g，加20倍量水80溫浸2h，濾過，濾液減壓濃縮溫度90，真空度-0.07Pa至相對密度為1.1580的清膏，等分成4份，分別采用常壓105枯燥，真空枯燥溫度80，真空度-0.08Pa，真空微波枯燥溫度75，真空度-0.08Pa，噴霧枯燥入口風(fēng)溫度180，出口風(fēng)溫度

12、100。每步均取樣測定鹽酸水蘇堿的含量，并計算鹽酸水蘇堿總量及實際保存率，結(jié)果見表5。表5不同枯燥工藝對鹽酸水蘇堿含量的影響略結(jié)果顯示，鹽酸水蘇堿保存率的上下順序為真空微波枯燥噴霧枯燥真空枯燥常壓枯燥，枯燥時間以噴霧枯燥、真空微波枯燥最少。提示枯燥過程中的溫度、真空度、時間等參數(shù)對鹽酸水蘇堿的影響較校2.5益母草藥材穩(wěn)定性研究結(jié)合上述提取濃縮枯燥工藝的研究結(jié)果，將溫度因素排除后，初步分析益母草藥材在儲存過程中出現(xiàn)含量下降的因素可能包括酶解、見光降解等，并按照析因設(shè)計法進(jìn)展以下實驗：普通處理：取益母草藥材1000g，分裝于透明塑料封口袋中，封口，室溫保存；滅酶處理：取益母草藥材1000g，置于高

13、壓滅菌鍋中，121高壓滅菌20in，取出，曬干，分裝于透明塑料封口袋中，封口，室溫保存；避光處理：取益母草藥材1000g，分裝于鋁箔袋中，封口，室溫保存；滅酶、避光處理：取益母草藥材1000g，置于高壓滅菌鍋中，121高壓滅菌20in，取出，曬干，分裝于鋁箔袋中，封口，室溫保存。以上各批試驗分別于0，1，2，3，5，8，12月進(jìn)展取樣，測定鹽酸水蘇堿的含量，并采用SPSS統(tǒng)計軟件對各組保存率進(jìn)展析因分析，結(jié)果見表6。表6益母草藥材穩(wěn)定性研究略表6及析因分析結(jié)果說明，見光降解為鹽酸水蘇堿含量下降的主要原因P0.01，酶解并非其主要原因P0.05，且不存在交互作用P0.05。在缺乏避光處理的情況下

14、，益母草藥材中的鹽酸水蘇堿保存率急劇下降，儲存1年后僅保存40左右。3討論在HPL樣品制備過程中，通過結(jié)合使用大孔樹脂和離子樹脂，減少了雜質(zhì)成分對鹽酸水蘇堿在紫外末端吸收的干擾影響，使本方法的簡便性、重復(fù)性較?中國藥典?2022版所采用的TLS顯著進(jìn)步。產(chǎn)后逐瘀膠囊及婦血安片的HPL含量測定結(jié)果說明，本方法同樣適用于含益母草中成藥的含量測定。中藥消費包含炮制加工、儲藏、煎煮、濃縮、枯燥等過程，各過程中有效成分所受到的影響因素及作用大小又不盡一樣。在本研究中，針對含益母草成藥中鹽酸水蘇堿含量低下的問題，我們對益母草的常規(guī)水提娶濃縮、枯燥工藝進(jìn)展細(xì)致研究。結(jié)果說明，鹽酸水蘇堿在提娶濃縮、枯燥過程中沒有明顯損失，即高溫、高壓、濕熱等并非其主要影響因素。排除消費中可能存在的原因后，本研究對益母草藥材的自身穩(wěn)定性按照析因設(shè)計進(jìn)展研究。結(jié)果說明，鹽酸水蘇堿易見光降解，儲