M食品安全突發(fā)事件實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)及樣品采集

1、食品安全突發(fā)事件樣品采集及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)（微生物部分）本溪市疾控中心郭振坤1醫(yī)學(xué)PPT疾控中心微生物檢驗(yàn)室面臨的形勢隨著突發(fā)公共衛(wèi)生事件處理?xiàng)l例的實(shí)施，各級(jí)各部門對突發(fā)公共衛(wèi)生事件引起了高度重視，特別是涉及人數(shù)多的，大型活動(dòng)期間的，發(fā)生在托有機(jī)構(gòu)，學(xué)校的，社會(huì)影響較大的，更受到各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)及社會(huì)各界的關(guān)注，這給我們疾控中心的檢驗(yàn)?zāi)芰μ岢隽烁叩囊?，也給我們微生物實(shí)驗(yàn)室增加了壓力,迫切需要提高食物中毒檢驗(yàn)專業(yè)技術(shù)水平。2醫(yī)學(xué)PPT概述食物中毒是指人攝人了含有生物性、化學(xué)性有毒有害物質(zhì)后或把有毒有害物質(zhì)當(dāng)作食物攝入后所出現(xiàn)的而非傳染性的急性或亞急性疾病，屬于食源性疾病的范疇。食物中毒既不包括因暴飲暴食而

2、引起的急性胃腸炎、食源性腸道傳染病(如傷寒)和寄生蟲病(如囊蟲病)，也不包括因一次大量或者長期少量攝入某些有毒有害物質(zhì)而引起的以慢性毒性為主要特征 。3醫(yī)學(xué)PPT細(xì)菌性食物中毒實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的意義細(xì)菌性食物中毒，有易發(fā)性和發(fā)病普遍性的特點(diǎn)，它全年皆可發(fā)生，對人類的健康構(gòu)成危害細(xì)菌性食物中毒實(shí)驗(yàn)室診斷資料是判定是否為細(xì)菌性食物中毒的重要依據(jù)。實(shí)驗(yàn)室診斷是為確定中毒病因，查明中毒原因，控制中毒事件蔓延；對食物中毒事故責(zé)任人的確定及處罰提供證據(jù)的。4醫(yī)學(xué)PPT細(xì)菌性食物中毒定義：(1)細(xì)菌性食物中毒：指因攝人被致病菌或其毒素污染的食物引起的急性或亞急性疾病，是食物中毒中最常見的一類。（2）特點(diǎn)：發(fā)病率較

3、高而病死率較低，有明顯的季節(jié)性，不具傳染性。與食物有關(guān)，停止食用就不再有病例。血清學(xué)：微生物性食物中毒可有雙相血清抗體凝集價(jià)上升；非微生物性食物中毒血清抗體凝集價(jià)不升高。無論從國內(nèi)還是從國際的資料都表明，微生物污染食品是最重要的食品衛(wèi)生問題，細(xì)菌性食物中毒無論從發(fā)生的起數(shù)人數(shù)都是占第一位的。我們每年發(fā)生的細(xì)菌性食物中毒事件約占所有食物中毒事件的3040%，人數(shù)約占整個(gè)中毒人數(shù)的6090%。 在各類食物中毒中，細(xì)菌性食物中毒最多見，占食物中毒總數(shù)的一半左右。細(xì)菌性食物中毒具有明顯的季節(jié)性，多發(fā)生在氣候炎熱的季節(jié)。細(xì)菌性食物中毒發(fā)病率高，病死率低，其中毒食物多為動(dòng)物性食品。2001年，衛(wèi)生部共收到

4、重大食物中毒事件報(bào)告185起，15715人中毒，死亡146人，其中第三季度報(bào)告的重大食物中毒起數(shù)、中毒人數(shù)、死亡人數(shù)最多。報(bào)告的重大食物中毒中，細(xì)菌性食物中毒人數(shù)最多，化學(xué)性食物中毒發(fā)生起數(shù)最多，且死亡人數(shù)最多。按就餐形式分類，集體食堂中毒人數(shù)最多，家庭食物中毒死亡人數(shù)最多。在餐館或家庭廚房內(nèi)常見是細(xì)菌性食物中毒。之所以發(fā)生細(xì)菌性食物中毒，是因?yàn)槭紫仁鞘称繁患?xì)菌污染；其次是細(xì)菌在適宜的條件下，在被污染的食品中大量繁殖或產(chǎn)生毒素；最后是未對食品加熱或加熱處理不徹底，未能殺死細(xì)菌或破壞細(xì)菌毒素。5醫(yī)學(xué)PPT細(xì)菌性食物中毒分類1）感染型：是指食入含有大量活菌的食物導(dǎo)致的食物中毒。其前提是食物被致病菌

5、污染，并且有一定的時(shí)間和條件使細(xì)菌在食品中大量繁殖達(dá)到可引起發(fā)病的數(shù)量，如沙門氏菌屬中的某些細(xì)菌，蠟樣芽胞桿菌等。（2）毒素中毒型：是由于食品受到細(xì)菌污染后，在食品中繁殖并在適宜的條件下產(chǎn)生大量的外毒素所引起的中毒。常見的有葡萄球菌腸毒素，肉毒梭菌素毒引起的食物中毒。 6醫(yī)學(xué)PPT世界公認(rèn)的8種細(xì)菌性食物中毒病原菌 沙門氏菌屬、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽孢桿菌、付溶血性孤菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌，肉毒梭菌、致病性大腸菌等，椰毒假單胞菌。 7醫(yī)學(xué)PPT我國常見食物中毒病原菌 除以上8種外，還有變形桿菌，小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌，空腸彎曲菌，溶血性鏈球菌，糞鏈球菌，志賀氏菌，氣單胞菌，類志賀氏鄰單胞菌，溶藻弧菌，

6、麥?zhǔn)匣【荒【?8醫(yī)學(xué)PPT我市近年來引起食物中毒細(xì)菌 變形桿菌，蠟樣芽孢桿菌，沙門氏菌，致瀉大腸埃希氏菌，副溶血性弧，志賀氏菌，弗尼斯桿菌。9醫(yī)學(xué)PPT我市食物中毒情況我市2002-2010年共實(shí)驗(yàn)室診斷檢測食物中毒26起，中毒人數(shù)454人。引起食物中毒常見原因是食品受到細(xì)菌污染，共發(fā)生細(xì)菌性食物中毒18起，中毒人數(shù)299人。10醫(yī)學(xué)PPT食物中毒病原檢驗(yàn)情況11醫(yī)學(xué)PPT12醫(yī)學(xué)PPT2009 西湖區(qū)慧海幼兒園 20 蠟樣芽孢13醫(yī)學(xué)PPT標(biāo)本采集 樣品質(zhì)量對微生物檢驗(yàn)有非常重要的作用，樣品的采集應(yīng)在邊調(diào)查邊分析的基礎(chǔ)上確定，這樣可采集到典型的樣品。同時(shí)在調(diào)查分析時(shí)，檢驗(yàn)人員與流調(diào)

7、人員的密切配合可確定更合理的檢驗(yàn)樣品和檢驗(yàn)方法。14醫(yī)學(xué)PPT樣品采集的關(guān)鍵因素（1）樣品采集的數(shù)量與質(zhì)量直接關(guān)系到治病物質(zhì)的判定，要查明食物中毒的治病子，必須采集與中毒相關(guān)的所有樣品，并根據(jù)病人的臨床癥狀，結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查資料，有重點(diǎn)，有目的地采集。這些樣品包括剩余食物，患者便樣，從業(yè)人員便樣，血液，嘔吐物，工具容器涂抹物。特別是剩余食物，便樣，血液（初期，恢復(fù)期）15醫(yī)學(xué)PPT樣品采集的關(guān)鍵因素（2）采樣的及時(shí)準(zhǔn)確是查明食物中毒致病物質(zhì)的重要環(huán)節(jié)。不同采樣時(shí)間與食物中毒的確證率有很大關(guān)系，由于采樣不及時(shí)，導(dǎo)致可疑食物被處理，中毒現(xiàn)場被打掃干凈，即使采到剩余食物，檢出致病菌，也可能與來至病人

8、的樣品不符合，因此，及時(shí)準(zhǔn)確采樣致關(guān)重要。16醫(yī)學(xué)PPT食物中毒現(xiàn)場采樣常備用品 注射器 止血帶 消毒棉簽 75%酒精棉球 碘酒棉球 滅菌空試管 酒精燈 火柴 消毒紗布 調(diào)匙 勺子 夾子 鑷子 剪刀 記號(hào)筆 記錄 無菌廣口瓶 滅菌玻璃試管 滅菌糞便盒 無菌塑料袋 肛拭棉棒 工作衣 口罩 帽子 手套 滅菌生理鹽水 無菌平皿 膠布 膠水 無菌干棉球 其他根據(jù)需要培養(yǎng)基。17醫(yī)學(xué)PPT細(xì)菌性食物中毒病原菌檢驗(yàn)方法選擇食物中毒是突發(fā)事件，在食物中毒事件過程中檢驗(yàn)時(shí)間要求，所以實(shí)驗(yàn)室為了盡快出具報(bào)告，要根據(jù)具體情況，選擇正確的檢驗(yàn)方法。引起食物中毒的細(xì)菌種類繁多，臨床癥狀和潛伏期各不相同，檢驗(yàn)人員要了解

9、各種食物中毒的機(jī)理，了解食物中毒的治病環(huán)節(jié)進(jìn)行分析尋找食物中毒的污染來源和可能感染途徑。以確定原因食品，判定檢驗(yàn)方向，當(dāng)臨床癥狀不明顯，原因食品不明確時(shí)，有針對性的選擇會(huì)顧此失彼而漏檢，而且目前發(fā)生的食物中毒，已由單一的菌轉(zhuǎn)為兩種或兩種以上共同引起，在開始檢測時(shí)，就要多選幾個(gè)項(xiàng)目。18醫(yī)學(xué)PPT幾種常用方法經(jīng)典方法：常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)方法，包括形態(tài)觀察，培養(yǎng)特征，生化特性，血清學(xué)試驗(yàn)，噬菌體應(yīng)用，抗體測定，毒力試驗(yàn)。新的快速檢驗(yàn)方法：自動(dòng)鑒定儀器，手工API方法，一些特殊顯色培養(yǎng)基，紙片法。經(jīng)典方法準(zhǔn)確性高，穩(wěn)定性也較好，但時(shí)間較長：快速方法時(shí)間短，但準(zhǔn)確性差，食物中毒檢驗(yàn)中，應(yīng)采用多種方法，快速

10、方法靈敏性高，可以用于初篩，用其他方法同時(shí)驗(yàn)證，進(jìn)行確認(rèn)。19醫(yī)學(xué)PPT食物中毒檢驗(yàn)的物資準(zhǔn)備（1）合成培養(yǎng)基：一些選擇性培養(yǎng) 基。 新鮮羊血，一些涉及到的抗菌素。（2）光電兩用雙目顯微鏡。（3）診斷用品：血清。（4）消耗性材料。（5）根據(jù)情況儲(chǔ)備一些新的快速檢驗(yàn)材 料。 20醫(yī)學(xué)PPT常見中毒細(xì)菌在食品中的分布沙門氏菌。 動(dòng)物和人的腸臟。 蛋、奶類及奶類制成品、肉類及肉類制成品，特別是家禽類食品 金黃葡萄球菌。 咽喉、鼻腔、皮膚、頭發(fā)和傷口。 糕點(diǎn)、雪糕、奶及奶類制成品、蛋制品 副溶血性弧菌。海洋和海產(chǎn)品海產(chǎn)品和腌制食品（例如海蜇、墨魚、咸菜、熏蹄等）。臘樣芽孢桿菌米飯，乳制品，蔬菜，點(diǎn)心。

11、空氣，土壤，塵埃，植物。21醫(yī)學(xué)PPT食物中毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則 中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 1.沙門氏菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 13一19962.變形桿菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 9一19963.蠟樣芽孢桿菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 82一19964.副溶血性弧菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 81一19965.葡萄球菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 80一19966病原性大腸埃希氏食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 8一19967肉毒梭菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 83一19968產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒診斷標(biāo)

12、準(zhǔn)及處理原則 ws/T 7一19969椰毒假單胞酵米面亞種食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 ws/T 12一199622醫(yī)學(xué)PPT中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則（GB 14938-94） 4.2 細(xì)菌性和真菌性食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)總則食入細(xì)菌性或真菌性中毒食品引起的食物中毒，即為細(xì)菌性食物中毒或真菌性食物中毒，其診斷標(biāo)準(zhǔn)總則主要依據(jù)包括；4.2.1 流行病學(xué)調(diào)查資料；4.2.2 病人的潛伏期和特有的中毒表現(xiàn)；4.2.3 實(shí)驗(yàn)室診斷資料，對中毒食品或與中毒食品有關(guān)的物品或病人的標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)的資料。23醫(yī)學(xué)PPT4診斷標(biāo)準(zhǔn)總則41食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)總則食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)主要以流行病學(xué)調(diào)查資

13、料及病人的潛伏期和中毒的特有表現(xiàn)為依據(jù)，實(shí)驗(yàn)室診斷是為了確定中毒的病因而進(jìn)行的。4。11中毒病人在相近的時(shí)間內(nèi)均食用過某種共同的中毒食品，未食用者不中毒。停止食用中毒食品后，發(fā)病很快停止。412潛伏期較短，發(fā)病急劇，病程亦較短413所有中毒病人的臨床表現(xiàn)基本相似。414一般無人與人之間的直接傳染。415食物中毒的確定應(yīng)盡可能有實(shí)驗(yàn)室診斷資料，由于采樣不及時(shí)或已用藥或其他技術(shù)、學(xué)術(shù)上的原因而未能取得實(shí)驗(yàn)室診斷資料時(shí)，可判定為原因不明食物中毒，必要時(shí)可由三名副主任醫(yī)師以上的食品衛(wèi)生專家進(jìn)行評定24醫(yī)學(xué)PPT。42細(xì)菌性和真菌性食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)總則食入細(xì)菌性或真菌性中毒食品引起的食物中毒，即為細(xì)菌性

14、食物中毒或真菌性食物中毒，其診斷標(biāo)準(zhǔn)總則主要依據(jù)包括：42。1流行病學(xué)調(diào)查資料；422病人的潛伏期和特有的中毒表現(xiàn)：423實(shí)驗(yàn)室診斷資料，對中毒食品或與中毒食品有關(guān)的物品或病人的標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)的資料。25醫(yī)學(xué)PPT幾種常見食物中毒的檢驗(yàn)程序26醫(yī)學(xué)PPT副溶血性弧菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則WS/T 8119961主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了副溶血性弧菌食物中毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)、判定原則和處理原則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于副溶血性弧菌食物中毒。2 引用標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.794 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn)GB 1493894 食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則3 診斷標(biāo)準(zhǔn)3.1 流行病學(xué)特點(diǎn)3.1.1

15、主要引起中毒的食品為海產(chǎn)品(魚、蝦、蟹、貝類等及其制品)和直接或間接被本菌污染的其他食品。3.1.2 本菌引起食物中毒多發(fā)生在夏、秋季節(jié)(69月)。27醫(yī)學(xué)PPT3.2 臨床表現(xiàn)3.2.1 發(fā)病急，潛伏期短。3.2.2 主要癥狀為腹痛、腹瀉(大部為水樣便，重者為粘液便和粘血便)、惡心、嘔吐、發(fā)燒，其次尚有頭痛、發(fā)汗、口渴等癥狀。3.3 實(shí)驗(yàn)室診斷3.3.1 由中毒食品、食品工具、患者腹瀉便或嘔吐物中檢出生物學(xué)特性(見GB 4789.7)或血清型別一致的副溶血性弧菌。3.3.2 動(dòng)物(小鼠)試驗(yàn)具有毒性或與患者血清有抗體反應(yīng)。3.3.3 按GB 4789.7進(jìn)行檢驗(yàn)。28醫(yī)學(xué)PPT4 判定原則4

16、.1 符合本菌的流行病學(xué)與臨床表現(xiàn)。4.2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)的檢定結(jié)果符合3.3.1的要求。有條件時(shí)做3.3.2。29醫(yī)學(xué)PPT沙門氏菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則WS/T 131996 1 主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了沙門氏菌食物中毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)、判定原則和處理原則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于沙門氏菌引起的食物中毒。2 引用標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.4 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)GB 4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑GB 14938 食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則3 診斷標(biāo)準(zhǔn)3.1 流行病學(xué)特點(diǎn)3.1.1 中毒食品多為動(dòng)物性食品。3.1.2 中毒患者均食用過某些可疑原因食品。出現(xiàn)

17、的臨床癥狀基本相同，潛伏期多為448h。3.2 臨床表現(xiàn)主要癥狀有：惡心、頭暈、頭痛、寒戰(zhàn)、冷汗、全身無力、飲食不振，嘔吐、腹瀉、腹脹、腹痛、發(fā)燒，重者可引起痙攣、脫水、休克等。急性腹瀉以黃色或黃綠色水樣便為主，有惡臭。以上癥狀可因病情輕重而反應(yīng)不同。3.3 實(shí)驗(yàn)室診斷30醫(yī)學(xué)PPT3.3.1 由可疑食品、病人嘔吐物或腹瀉便中檢出血清學(xué)型別相同的沙門氏菌。如無可疑食品，從幾個(gè)病人嘔吐物或腹瀉便中檢出血清學(xué)型別相同的沙門氏菌也可。3.3.2 有必要時(shí)可觀察分離出的沙門氏菌與病人血清的凝集效價(jià)，恢復(fù)期應(yīng)比初期有所升高(一般約升高4倍)。3.3.3 沙門氏菌檢驗(yàn)方法按GB 4789.4進(jìn)行。4 判定

18、原則4.1 符合本菌的流行病學(xué)特點(diǎn)與臨床表現(xiàn)。4.2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)符合3.3.1或3.3.2的要求(如均未檢出相同的細(xì)菌時(shí)，可用食品中檢出的沙門氏菌與病人血清作凝集試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí))。4.3 符合4.1，不符合4.2條則按GB 14938執(zhí)行。31醫(yī)學(xué)PPT蠟樣芽胞桿菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則1 主題內(nèi)容與適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)、判定原則及處理原則。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于蠟樣芽胞桿菌引起的食物中毒。2 引用標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.1494食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 蠟樣芽胞桿菌檢驗(yàn) GB 1493894食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則。3診斷標(biāo)準(zhǔn)3.1流行病學(xué)特點(diǎn)3.1.1

19、 引起中毒的食品多為剩米飯、米粉、甜酒釀、剩菜、甜點(diǎn)心及乳、肉類食品。3.1.2 引起中毒食品常因食前保存溫度較高(20以上)和放置時(shí)間較長，使食品中的蠟樣芽胞桿菌得到繁殖。3.2臨床表現(xiàn)3.2.1嘔吐型：以惡心、嘔吐為主，并有頭暈、四肢無力、潛伏期較短(一般為0.55 h)。3.2.2腹瀉型：以腹痛、腹瀉為主，潛伏期較長(一般為816 h)。32醫(yī)學(xué)PPT3.3實(shí)驗(yàn)室診斷3.3.1 中毒食品中蠟樣芽胞桿菌菌數(shù)測定(按GB 4789.14)i每克食品中一般均 。3.3.2 中毒病人嘔吐物或糞便中檢出的蠟樣芽胞樣桿菌與中毒食品檢出的菌株，其生化狀或血清型須相同。4判定原則4.1符合本標(biāo)準(zhǔn)的流行病

20、學(xué)特點(diǎn)和臨床表現(xiàn)。4.2實(shí)驗(yàn)室診斷必須符合3.3.1或3.3.8方可判定。5處理原則 按GB 14938執(zhí)行。33醫(yī)學(xué)PPT變形桿菌食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則WS/T 919961主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了變形桿菌食物中毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)、判定原則和處理原則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于變形桿菌食物中毒。2 引用標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.28 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑GB 14938 食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則3 診斷標(biāo)準(zhǔn)3.1 流行病學(xué)特點(diǎn)：3.1.1 變形桿菌食物中毒在細(xì)菌性食物中毒中是較常見的一種，發(fā)病季節(jié)多在夏秋季節(jié)。3.1.2 引起中毒的食品，主要以動(dòng)物性食品為主，其次為豆制品和涼拌菜等

21、，由于制作時(shí)造成污染而引起食物中毒。3.1.3 本菌食物中毒潛伏期多數(shù)為518h。34醫(yī)學(xué)PPT3.2 臨床表現(xiàn)臨床特征以上腹部刀絞樣痛和急性腹瀉為主，有的伴以惡心、嘔吐、頭疼、發(fā)熱，體溫一般在3839之間，病程較短，一般13d可恢復(fù)，很少有死亡。35醫(yī)學(xué)PPT3.3 實(shí)驗(yàn)室診斷3.3.1 由中毒食品和患者吐瀉物中檢出占優(yōu)勢、且生化及血清學(xué)型別相同的變形桿菌。3.3.2 取患者急性期和恢復(fù)期(中毒后1215d)的血清，用分離的菌株做血清凝集效價(jià)測定，恢復(fù)期 滴度高于急性期滴度四倍，即有診斷意義。同時(shí)以健康人做為對照，應(yīng)為陰性。3.3.3 變形桿菌檢驗(yàn)方法見附錄A。36醫(yī)學(xué)PPT4 判定原則4.

22、1 具有本菌的流行病學(xué)與臨床表現(xiàn)。4.2 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的各項(xiàng)指標(biāo)的檢定結(jié)果均與變形桿菌的特點(diǎn)相符。4.3 綜合分析上述特點(diǎn)，作出正確判定。37醫(yī)學(xué)PPT變形桿菌食物中毒檢驗(yàn)方法A1 增菌培養(yǎng)：固體樣品加適量滅菌鹽水，均質(zhì)后吸取混懸液接種于GN肉湯，36士1培養(yǎng)24h。A2 分離平板：接種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板或SS平板，36士1培養(yǎng)24h。38醫(yī)學(xué)PPTA3 伊紅美藍(lán)平板和SS瓊脂平板，生長菌落無色透明或半透明圓形菌落，普通變形桿菌和奇異變形桿菌在伊紅美藍(lán)平板上可呈現(xiàn)片狀蔓延生長菌落，挑取菌落接種三糖鐵培養(yǎng)基。A4 生化試驗(yàn)：三糖鐵培養(yǎng)基，乳糖陰性，葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，硫化氫陽性或陰性。尿

23、素和苯丙氨酸酶陽性，可進(jìn)行生化試驗(yàn)，其鑒別見表A1、表A2、表A3、表A4。39醫(yī)學(xué)PPT表A1 變形桿菌屬、普羅菲登斯菌屬、摩根氏菌屬鑒別表 表A2 變形桿菌屬四個(gè)生化群的鑒別 表A3 摩根氏菌屬兩個(gè)生化群的鑒別 表A4 普羅菲登斯菌屬四個(gè)生化群的鑒別 A5 血清學(xué)凝集分型試驗(yàn)：普通變形桿菌和奇異變形桿菌O抗原為49個(gè)，H抗原為19個(gè)，見表A5。表A5 普通和奇異變形桿菌簡化抗原表 40醫(yī)學(xué)PPTA6 患者血清效價(jià)測定：A6.1 取患者急性期(發(fā)病后23d)和恢復(fù)期血清(1215d)進(jìn)行血清效價(jià)測定，同時(shí)取健康人血清做為對照。A6.1.1 稀釋血清：以生理鹽水稀釋血清，1：4，1：8倍比稀釋

24、到1：640，每管0.5mL，同時(shí)做一鹽水對照，每個(gè)血清稀釋兩列。A6.1.2 將不同樣品中分離出的菌株，接種營養(yǎng)瓊脂斜面36士1培養(yǎng)1824h，用鹽水洗下，制成H和O抗原，H抗原在菌液中加入0.2%甲醛，O抗原系將濃菌加入等量的95%酒精，于361過夜，兩種抗原分別經(jīng)離心沉淀，棄去上清液，其沉淀物用鹽水稀釋成含10億菌/mL。41醫(yī)學(xué)PPTA6.1.3 在每管0.5mL的稀釋血清中一列加H抗原，一列加入O抗原，各加0.5mL，振蕩搖勻，置3611824h，觀察結(jié)果。A6.1.4 凝集反應(yīng)呈“+”的最后一管，為其效價(jià)滴度。A7 交互吸收試驗(yàn)：取不同樣品中分離的菌株，進(jìn)行交互吸收試驗(yàn)。42醫(yī)學(xué)P

25、PTA7.1 抗原制備：將菌株接種營養(yǎng)瓊脂3611824h，用生理鹽水洗下菌苔，制成含菌量為100億/mL2000億/mL，按0.5%的濃度加入甲醛，殺菌，置3611824h。43醫(yī)學(xué)PPTA7.2 免疫血清制備：選擇體重2kg左右的健康家兔，從耳靜脈接種上述抗原，第一次2.5億個(gè)菌，第二次5億個(gè)菌，第三次10億個(gè)菌，第四次20億個(gè)菌體，每次間隔5d，在最后一次710d從耳靜脈取血做效價(jià)測定，一般效價(jià)在16400以上，即可從頸動(dòng)脈或心臟取血44醫(yī)學(xué)PPTA7.3 交互吸收：A7.3.1 吸收菌制備：將菌株接種于克氏瓶中營養(yǎng)瓊脂，置361培養(yǎng)24h，用少許鹽水洗下，制成濃厚菌液，每毫升含500億

26、菌體。加入2%甲醛，于36123d殺菌，經(jīng)做無菌試驗(yàn)合格后使用。A7.3.2 吸收試驗(yàn)：血清用110000硫柳汞的生理鹽水稀釋成15或110，每毫升血清中加入吸收菌0.20.8g，振搖混勻，置3613h，并經(jīng)常搖動(dòng)，離心沉淀，分出血清與制備免疫血清的抗原細(xì)菌做玻片凝集試驗(yàn)，如還有凝集，繼續(xù)吸收，直至無凝集。再與吸收菌做凝集試驗(yàn)，如不凝集證實(shí)為同一型別，反之則認(rèn)為不是同一型別的變形桿菌。45醫(yī)學(xué)PPT蠟樣芽胞桿菌檢驗(yàn) 菌數(shù)測定：以無菌操作將檢樣25g(mL),用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-110-5的稀釋液。取各稀釋液0.1mL,接種在兩個(gè)選擇性培養(yǎng)基甘露醇卵黃多粘菌素(MYP)瓊脂培養(yǎng)

27、基上,用L形棒涂布于整個(gè)表面,置361溫箱培養(yǎng)1220h后選取適當(dāng)菌落數(shù)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),蠟樣芽胞桿菌在此培養(yǎng)基上的菌落為粉紅色(表示不發(fā)酵甘露醇)周圍有粉紅色的暈(表示產(chǎn)生卵磷脂酶)。計(jì)算后,從中挑取5個(gè)此種菌落做證實(shí)試驗(yàn)。根據(jù)證實(shí)為蠟樣芽胞桿菌的菌落數(shù)計(jì)算出該平板上的菌落數(shù),然后乘其稀釋倍數(shù),即得每克(或毫升)樣品中所含蠟樣芽胞桿菌數(shù)。 46醫(yī)學(xué)PPT 分離培養(yǎng) 取檢樣（便樣）或稀釋液劃線分離培養(yǎng)于選擇性培養(yǎng)基(MYP)上,置37培養(yǎng)1220h,挑取可疑的蠟樣芽胞桿菌菌落(見6.1)接種于肉湯和營養(yǎng)瓊脂做成純培養(yǎng),然后做證實(shí)試驗(yàn) 47醫(yī)學(xué)PPT 形態(tài)觀察本菌為革蘭氏陽性大桿菌,寬度在1m或1

28、m以上,芽胞呈卵圓形,不突出菌體,多位于菌中央或稍偏于一端。48醫(yī)學(xué)PPT 培養(yǎng)特性 本菌在肉湯中生長混濁,常微有菌膜或壁環(huán),振搖易乳化;在普通瓊脂平板上生成的菌落不透明、表面粗糙、似毛玻璃狀或融蠟狀,邊緣不齊。49醫(yī)學(xué)PPT生化性狀 本菌有動(dòng)力;能產(chǎn)生卵磷脂酶和酪蛋白酶;過氧氫酶試驗(yàn)陽性;溶血;不發(fā)酵甘露醇和木糖;常能液化明膠和使硝酸鹽還原;在厭氧條件下能發(fā)酵葡萄糖。50醫(yī)學(xué)PPT 生化分型 蠟樣芽胞桿菌可根據(jù)對檸檬酸鹽利用、硝酸鹽還原、淀粉水解、V-P反應(yīng)、明膠液化性狀的試驗(yàn),將該菌分成不同的型別 51醫(yī)學(xué)PPT 副溶血性弧菌檢驗(yàn) 樣品25g 加225mL3.5滅菌鹽水，磨碎 氯化鈉結(jié)晶紫

29、 氯化訥遮糖瓊脂平板 增菌液100ml 和選擇性瓊脂平板 3.5氯化鈉三糖鐵斜面 主氏染色鏡檢形態(tài) 主氏染色鏡檢形態(tài) 生化試驗(yàn) 動(dòng)物試驗(yàn) 報(bào) 告 52醫(yī)學(xué)PPT嗜鹽性試驗(yàn) 將上述可疑培養(yǎng)物分別接種于不同濃度的鹽胨水中,37 24h培養(yǎng)后觀察生長情況,在無鹽和10%以上鹽的胨水中不生長,在7%鹽的胨水中生長良好者進(jìn)行有關(guān)試驗(yàn)。53醫(yī)學(xué)PPT 副溶血性弧菌的生化學(xué)性狀葡萄糖產(chǎn)酸 v-p 葡萄糖產(chǎn)氣 靛基質(zhì) 遮 糖 賴氨酸 乳 糖 鳥氨酸 /- 甘露醇 精氨酸 - 硫化氫 溶 血 +/- 甲基紅 54醫(yī)學(xué)PPT變形桿菌食物中毒檢驗(yàn)方法A1增菌培養(yǎng)：固體樣品加適量滅菌鹽 水，均質(zhì)后吸取混懸液接種于GN

30、肉湯，36士1培養(yǎng)24h。A2分離平板：接種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板或SS平板，36士1培養(yǎng)24h。A3伊紅美藍(lán)平板和SS瓊脂平板，生長菌落無色透明或半透明圓形菌落，普通變形桿菌和奇異變形桿菌在伊紅美藍(lán)平板上可呈現(xiàn)片狀蔓延生長菌落，挑取菌落接種三糖鐵培養(yǎng)基。55醫(yī)學(xué)PPT生化試驗(yàn) 三糖鐵培養(yǎng)基，乳糖陰性，葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，硫化氫陽性或陰性。尿素和苯丙氨酸酶陽性，可進(jìn)行生化試驗(yàn). 56醫(yī)學(xué)PPT患者血清效價(jià)測定：1取患者急性期(發(fā)病后23d)和恢復(fù)期血清(12 15d)進(jìn)行血清效價(jià)測定，同時(shí)取健康人血清做為對照。1.1稀釋血清：以生理鹽水稀釋血清，1：4，1：8倍比稀釋到1：640，每管0

31、.5mL，同時(shí)做一鹽水對照，每個(gè)血清稀釋兩列。1.2將不同樣品中分離出的菌株，接種營養(yǎng)瓊脂斜面36士1培養(yǎng)1824h，用鹽水洗下，制成H和O抗原，H抗原在菌液中加入0.2%甲醛，O抗原系將濃菌加入等量的95%酒精，于361過夜，兩種抗原分別經(jīng)離心沉淀，棄去上清液，其沉淀物用鹽水稀釋成含10億菌/mL。1.3在每管0.5mL的稀釋血清中一列加H抗原，一列加入O抗原，各加0.5mL，振蕩搖勻，置3611824h，觀察結(jié)果。1.4凝集反應(yīng)呈“+”的最后一管，為其效價(jià)滴度。 57醫(yī)學(xué)PPT典型案例58醫(yī)學(xué)PPT59醫(yī)學(xué)PPT一起腸炎沙門氏菌健康攜帶者引起食物中毒的調(diào)查分析2004年5月25日，我市疾控

32、中心接到本溪縣衛(wèi)生局的食物中毒報(bào)告，5月24、25日，本溪縣一飯店集體就餐的420人中有87人發(fā)生食物中毒，經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查，臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果分析，認(rèn)定這是一起由飯店廚師健康攜帶腸炎沙門氏菌引起的食物中毒?，F(xiàn)將調(diào)查分析結(jié)果報(bào)告如下 60醫(yī)學(xué)PPT1.中毒經(jīng)過：當(dāng)?shù)鼐用窭钅侈k喪事分別2004年5月24日、25日招待客人320人，當(dāng)?shù)鼐用駨埬?5日辦喜事在該飯店招待客人100人。2004年5月25日16時(shí)30分左右，本溪縣第三人民醫(yī)院陸續(xù)接到17名發(fā)病人員就診，主要癥狀為：發(fā)熱、頭痛、腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐、頭暈、全身乏力?；颊咦允龆挤謩e參加過李、張兩家的喪宴和喜宴。第三人民醫(yī)院立即向縣衛(wèi)生局報(bào)

33、告，由衛(wèi)生局組織衛(wèi)生監(jiān)督所、疾控中心人員展開調(diào)查，并上報(bào)市衛(wèi)生局；市衛(wèi)生監(jiān)督所、市疾控中心人員參與流行病學(xué)調(diào)查，對該飯店的可疑食品、工具、容器進(jìn)行現(xiàn)場封存，并責(zé)令飯店停業(yè)整頓。2004年5月25日22時(shí)，省專家組到達(dá)現(xiàn)場，各方面人員參加現(xiàn)場辦公會(huì)，匯報(bào)情況，分析原因，指導(dǎo)救治，并初步認(rèn)定是一起集體就餐引起的細(xì)菌性食物中毒。61醫(yī)學(xué)PPT2臨床表現(xiàn)及流行病學(xué)調(diào)查：21臨床表現(xiàn)：患者以發(fā)熱、頭痛、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉為主要癥狀；最短潛伏期5小時(shí)，最長潛伏期為30小時(shí)，平均16.8小時(shí)；其中年齡最大74歲，最小5歲；病人普遍發(fā)熱（87.3%）,其中37388人、383944人、39以上27人；腹痛

34、為上腹痛、壓痛；腹瀉為黏液便或不腹瀉；病人外周血白細(xì)胞數(shù)較高，74歲老人曾出現(xiàn)呼吸困難，病人經(jīng)給予抗炎綜合治療、輸液、糾正水電解質(zhì)紊亂支持療法等措施，病情好轉(zhuǎn)，無死亡病例。62醫(yī)學(xué)PPT22流行病學(xué)調(diào)查： 24日、25日喜喪兩宴三餐菜譜相同，該飯店是本鎮(zhèn)一個(gè)較大的飯店，平時(shí)接待就餐人數(shù)能力不超過100人，但本次喜喪兩宴聚餐人數(shù)超過承受能力兩倍，而且無專用冷葷間，盛裝食品容器、數(shù)量不足。該飯店于24日早在農(nóng)貿(mào)市場購豬肝、雞珍、牛肉等食品，上午加工后未經(jīng)冷藏保存，當(dāng)日下午17時(shí)、次日中午11時(shí)、12.30分給客人食用，經(jīng)調(diào)查廚師及服務(wù)員均有健康體檢證。病人中有只參加過24日喪宴一餐后5小時(shí)后就發(fā)病

35、的，也有只參加25日喪宴或喜宴發(fā)病的，還有24日參加喪宴后、25日又參加喜宴的。所有病人除喜喪兩宴聚餐外無其他共同飲食史 ，爆發(fā)時(shí)間為單一峰值，初步認(rèn)為是一起細(xì)菌性食物中毒 。 63醫(yī)學(xué)PPT3實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)：31樣品采集：共采集樣品48份，其中剩余食品5份，患者嘔吐物1份，患者肛拭便樣20份（其中用藥前6份、個(gè)體門診用藥兩天后入院14份），從業(yè)人員肛拭便樣2份，生熟菜板各1份，食品用老湯1份，容器5份，患者發(fā)病初期血樣12份，恢復(fù)期血樣10份。32病原菌檢驗(yàn)：對所有食物及糞便樣品進(jìn)行增菌培養(yǎng)，分離培養(yǎng)，血清學(xué)鑒定，生化鑒定。用傾注SS平板培養(yǎng)法，用沙門氏菌血清鑒定法，測中毒食品中含沙門氏菌數(shù)。6

36、4醫(yī)學(xué)PPT檢驗(yàn)結(jié)果11份患者便樣、1份廚師便樣、2份打包剩余食品（雞珍、豬肝）共14份樣品中檢出腸炎沙門氏菌（S，emtezitdis）其抗原式為1.9.12：g.m。其中用藥前6份肛拭便樣檢出率100%，個(gè)體門診輸液治療兩天后入院患者檢出率37.7%；雞珍樣品含腸炎沙門氏菌1.8106個(gè)/g,豬肝樣品含腸炎沙門氏菌6.7106個(gè)/g。65醫(yī)學(xué)PPT4調(diào)查與分析這次食物中毒事件，經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，確定為腸炎沙門氏菌食物中毒。中毒原因分析：11名患者便樣，2份打包剩余食品檢出腸炎沙門氏菌，經(jīng)調(diào)查該飯店24日早在農(nóng)貿(mào)市場購買豬肝、雞珍、牛肉等食品，上午加工后未經(jīng)冷藏保存，下午17 時(shí)，

37、25日中午11時(shí)，12時(shí)30 分給客人食用，該店一廚師為腸炎沙門氏菌健康帶菌者，是污染源，因?yàn)橥谖窗l(fā)現(xiàn)在市場購買豬肝、雞珍中毒者，判定本次中毒由飯店污染所致，這次李、張兩家聚餐人數(shù)超過飯店平時(shí)接待人數(shù)兩倍，而且無專用冷葷間，盛裝食品容器數(shù)量明顯不足，衛(wèi)生意識(shí)差，極易造成污染。66醫(yī)學(xué)PPT討論分析51沙門氏菌是引起食物中毒的重要病原菌，在我國沙門氏菌食物中毒占首位1，在食品從業(yè)人員健康體檢中，食品衛(wèi)生法2規(guī)定：對于沙門氏菌屬中傷寒沙門氏菌，甲、已、丙型副傷寒沙門氏菌帶菌者實(shí)行掉離崗位，因?yàn)槠浜苌倭壳闆r下（但沙門氏菌屬中其他一些種，如腸炎、豬霍亂、鼠傷寒、都柏林，德爾卑沙門氏菌是引起食物中毒常

38、見的血清型3，廚師攜帶這些沙門氏菌菌對人們的健康存在著極大的潛在的危險(xiǎn)，是引起食物中毒的重大隱患。在基層的衛(wèi)生管理中，這方面存在著漏洞。67醫(yī)學(xué)PPT52這次腸炎沙門氏菌食物中毒，提醒我們衛(wèi)生管理部門，要加強(qiáng)預(yù)防性監(jiān)督工作，要加強(qiáng)食品衛(wèi)生的宣傳教育及廚師的衛(wèi)生培訓(xùn)；大型宴會(huì)應(yīng)與監(jiān)督部門預(yù)約，以考查其承辦能力。近年來我市多起食物中毒均因集中時(shí)間內(nèi)，接待宴會(huì)客人多，熟食品用兩大，提前購買加工后，冷藏容量不足，存放在室溫條件下，存放時(shí)間長，為細(xì)菌繁殖提供了條件，在有污染源存在的條件下，引起食物中毒。68醫(yī)學(xué)PPT53對于食品從業(yè)人員健康體檢項(xiàng)目中，傷寒、副傷寒沙門氏菌檢驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)其他能引起食物中毒常

39、見沙門氏菌血清型的帶菌者，尤其是廚師，是非常危險(xiǎn)的病原雖不實(shí)行掉離崗位，應(yīng)對其提出預(yù)警，加強(qiáng)管理。54對于食物中毒調(diào)查采樣，許多情況下由于報(bào)告不及時(shí)，采集肛拭便樣時(shí)，患者已用藥，通過本文對用藥前后檢出率的對比，用藥前100%，用藥后37.7%。提示我們用藥后樣品量應(yīng)盡量大些。69醫(yī)學(xué)PPT案例270醫(yī)學(xué)PPT案例昨日下午，記者從本溪市衛(wèi)生監(jiān)督所得到證實(shí)：8月3日，本溪市啤酒廠食堂發(fā)生職工集體食物中毒事件，8月4日上午，先后有38人分別被送到本溪市中心醫(yī)院、本溪市第三醫(yī)院、金山醫(yī)院進(jìn)行治療。記者在本溪市第三醫(yī)院采訪時(shí)得知，8月4日下午，在該院接受治療的19名患者中，有一部分在還沒有輸液結(jié)束的情況

40、下，自行拔下輸液針頭離開。昨日上午10時(shí)許，記者趕到了本溪市第三醫(yī)院。據(jù)該院領(lǐng)導(dǎo)介紹，8月4日上午8時(shí)許，本溪市啤酒廠送來了19名食物中毒患者，經(jīng)過檢查后初步確定為急性胃腸炎，詢問患者病史得知這些患者前一天早上在單位食堂用過早餐后出現(xiàn)不良反應(yīng)，部分患者出現(xiàn)嘔吐、腹瀉，當(dāng)即采取輸液措施，但是到了下午，所有患者都自行離開，有的還沒有打完點(diǎn)滴。在該院內(nèi)科病房，一位患者家屬告訴記者，她看到了大約20名患者，都穿著淺藍(lán)色的工作服，有一部分患者就在他們里面的病房打點(diǎn)滴，兩個(gè)人一床，大約在下午3時(shí)許，這些患者非常匆忙地離開了，有的甚至連鞋都穿錯(cuò)了。隨后，記者撥通了本溪市衛(wèi)生監(jiān)督所的電話。據(jù)介紹，他們是8月4

41、日上午10時(shí)許接到報(bào)告的，馬上組織了4個(gè)小組趕赴現(xiàn)場和醫(yī)院進(jìn)行調(diào)查，最后確定這是一起集體食物中毒事件，已經(jīng)向省有關(guān)衛(wèi)生部門報(bào)告。他們還告訴記者，目前本溪市啤酒廠食堂已經(jīng)被停業(yè)，貼上了封條，采取了臨時(shí)控制措施。而事件的性質(zhì)雖然已經(jīng)確定，事件的原因還在進(jìn)一步調(diào)查中，調(diào)查組正在啤酒廠工作，同時(shí)還需要等待實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)結(jié)果才能最終確定事件原因。據(jù)透露，8月3日早上本溪市啤酒廠職工食用的一種豆制品成為重點(diǎn)懷疑目標(biāo)。據(jù)本溪市啤酒廠介紹，該單位食堂屬于職工福利食堂，每天都要到市場上購買新鮮的蔬菜，出現(xiàn)中毒事件后，廠領(lǐng)導(dǎo)非常重視，積極配合食品衛(wèi)生監(jiān)督部門調(diào)查此事，現(xiàn)在初步認(rèn)定可能是從批發(fā)市場“比價(jià)購買”的豆制品

42、存在質(zhì)量問題，他們也正在追查此事。目前大部分中毒職工已經(jīng)基本恢復(fù)，回到企業(yè)開始正常工作。 71醫(yī)學(xué)PPT一起細(xì)菌性食物中毒致病因子檢驗(yàn)的總結(jié)分析2004 年8月3日，我市一企業(yè)職工38人因發(fā)熱、腹痛、腹瀉去市醫(yī)院就診，經(jīng)綜合分析流行病學(xué)資料，確定了中毒餐次，可疑食品，在檢驗(yàn)過程中，從重點(diǎn)分析原因食品入手，確定檢驗(yàn)方向，帶著目標(biāo)尋找不同樣品中共性，又不放過新疑點(diǎn)，在收集到的15份樣品中，5份（剩余原料豆腐卷、冰箱內(nèi)物體表面、3名患者肛拭便樣）檢出相同生物型蠟樣芽胞桿菌，3份（另外3名患者肛拭便樣）檢出奇異變形桿菌，為食物中毒的認(rèn)定及中毒原因的確定提供了有利的證據(jù)。72醫(yī)學(xué)PPT1 流行病調(diào)查資料

43、 1臨床資料（表1） 表1 38名患者臨床癥狀分布頻數(shù) 臨床癥狀例數(shù)百分率（%） 發(fā)熱（其中包括39以上3人） 1950腹瀉（其中包括7次以上16人） 37 97.3嘔吐 20 52.6頭痛 11 28.9頭暈 17 44.4 73醫(yī)學(xué)PPT2 潛伏期：522小時(shí) ，平均潛伏期為13小時(shí)。1 3 就餐情況：2004年8月3日職工食堂84人用早餐，154人用午餐，59人用晚餐。發(fā)病38人全部進(jìn)食早餐，其中11人進(jìn)食午餐，1人進(jìn)食晚餐，未進(jìn)食早餐者不發(fā)病。初步認(rèn)定早餐為中毒餐次。14 早餐食譜及患者進(jìn)食情況：主食：面條、玉米粥、饅頭；副食：涼拌菜豆腐卷、姜豆、海帶絲、豆腐腦?；颊哌M(jìn)食情況：100%

44、食用涼拌豆腐卷，74%食用海帶絲，42%食用江豆，32%食用豆腐腦。74醫(yī)學(xué)PPT2材料與方法2 1 樣品采集情況：現(xiàn)場采樣18份，其中3名廚師12名患者肛拭便樣（抗炎治療中）， 菜 板、棉拭子1份，涼拌豆腐卷原料豆腐卷1份，存放豆腐卷冰箱物體表面棉拭涂抹1份 。22 培養(yǎng)基：SC,GN,SS,EMB,; 營養(yǎng)瓊脂，MYP瓊脂，三糖鐵瓊脂，微量生化管均為杭州天和微生物試劑有限公司產(chǎn)品；沙門氏菌 、志賀氏菌、致病大腸桿菌診斷血清為蘭州生物制品研究所產(chǎn)品，均在有效期內(nèi)使用。 23 檢驗(yàn)方法：參照GB4789-941,WS/T-19962 ,文獻(xiàn)3方法進(jìn)行蠟樣芽胞桿菌、變形桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、致病大腸桿菌檢驗(yàn)。 75醫(yī)學(xué)PPT3結(jié)果31 直接染色結(jié)果： 樣品經(jīng) 過稀釋后涂片革藍(lán)氏染色，在豆腐卷、冰箱涂抹，3份患者便樣中均可見革藍(lán)氏陽性芽胞桿菌，所有樣品均可見革藍(lán)氏陰性桿菌，長短不一。32培養(yǎng)結(jié)果：豆腐卷經(jīng)稀釋后用MYP 瓊脂做蠟樣芽胞桿菌計(jì)數(shù)，取典型菌落鑒定 蠟樣芽胞桿菌計(jì)數(shù)為：3.0106個(gè)/g ，冰箱表面棉拭涂抹后放在生理鹽水中，直接涂MYP瓊脂、營養(yǎng)瓊脂分離蠟樣芽胞桿菌典型菌落；肛拭便樣采取后放在生理鹽水中，稀釋至能在MYP瓊脂或營養(yǎng)瓊脂上分離出單個(gè)菌落，其中3份便樣品分離到蠟樣芽胞桿菌典型菌落。所有樣品經(jīng)腸桿菌科常規(guī)檢驗(yàn)