新會陳皮中總黃酮的提取工藝

1、新會陳皮中總黃酮的提取工藝【摘要】目的優(yōu)化新會陳皮總黃酮提取的工藝條件。方法在單因素試驗的根底上，以總黃酮含量為指標(biāo)，采用正交試驗方法考察液固比、乙醇濃度、提取時間等因素。結(jié)果各因素的影響次序是液固比提取溫度提取時間；最正確提取工藝為：乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%，液固比125，提取溫度70，提取時間3h，提取1次。結(jié)論優(yōu)選得到的工藝穩(wěn)定可行?！娟P(guān)鍵詞】新會陳皮;總黃酮;正交設(shè)計ptiizatinfextratinpressfttalflavnidsinXinhuidryrangepeelbyrthgnaldesignLINLin,LINZi-xia,HUANGQing-hua(SetinfAnaly

2、tialheistry,GuangdngPharaeutialUniversity,Guangzhu,Guangdng510006,hinaAbstrat:bjetiveTptiizeextratinpressnditinfrttalflavnidsinXinhuidryrangepeel.ethdsnthebasisfthesingleexperientalfatr,theptiizedextratinnditinnthebasisfttalflavnidseredeterinedbyrthgnaldesign.ResultsTherderffatrshihaffetedthettalfla

3、vnidsextratinas:slventquantityextratinteperatureextratinduratin;Theptiuextratinnditinsareextratinneith60%ethanl,slventrati125at70fr3hursinaterbath.nlusinTheethdissiple，nvenient,andaurate.Keyrds:XinHuidryrangepeel;ttalflavnids;rthgnaldesign陳皮是蕓香科植物橘itusretiulataBlan及其栽培變種的枯燥成熟果皮，藥材分為“陳皮和“廣陳皮?！皬V陳皮為茶枝柑

4、itusretiulatahahi的枯燥成熟果皮，主產(chǎn)于廣東新會，是廣東十大道地藥材之一。據(jù)報道陳皮的有效成分為黃酮類化合物和揮發(fā)油，具有抗衰老、軟化心血管、減輕實驗動物的動脈粥樣硬化等成效1-4。影響陳皮總黃酮提取的因素很多，本文選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，提取時間，液固比和提取次數(shù)進展單因素試驗，在此根底上采用正交試驗，優(yōu)選得到新會陳皮總黃酮提取的最正確工藝。1材料與儀器TU-1810紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)，恒溫水浴鍋，索氏抽提器等。樣品由新會陳皮協(xié)會提供，并由廣東藥學(xué)院中藥鑒定教研室李書淵教授鑒定為茶枝柑itusRetiula

5、tahahi的枯燥成熟果皮。樣品粉碎成粗粉，置枯燥箱于60烘12h以上。于閉光、陰涼處存放。橙皮苷購自中國藥品生物制品檢定所，批號110712-202212，其他試劑為分析純。2方法與結(jié)果2.1陳皮總黃酮的提取稱取約5g陳皮粗粉置250L燒瓶中，參加石油醚(3060)80L，60回流脫脂2h；揮干石油醚后，根據(jù)實驗要求，按照不同的水提取溫度、提取時間以不同液固比及提取次數(shù)進展提取，抽濾，洗滌濾渣，合并濾液和洗液，濃縮去適量的乙醇，然后轉(zhuǎn)入100L量瓶中，定容，搖勻，即為供試品溶液。2.2橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取0.2274g/L的橙皮苷對照品貯備液，精細(xì)汲取0.5、1、1.5、2.0和2.5L置

6、25L量瓶中，加體積分?jǐn)?shù)為60的乙醇至刻度。在285n處測定吸收度,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果說明：在4.54822.74g/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，回歸方程為A=0.033+0.013，r=0.9993。2.3測定方法取一定提取條件下所得的供試品溶液，適當(dāng)稀釋，在285n處測定樣品的吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算總黃酮的含量。以陳皮總黃酮的得率()為指標(biāo)，確定最正確提取條件。2.4單因素試驗選取水浴溫度、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時間、液固比、提取次數(shù)這5個可能影響提取效果的因素做單因素試驗，以確定相關(guān)因素對陳皮提取物中黃酮含量的影響，結(jié)果見圖1。A.提取溫度;B.乙醇體積;.提取時間;D.液固比;E.提取次

7、數(shù)轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.圖15種因素對陳皮總黃酮得率的影響略Fig.1Effetffivefatrsntheyieldfttalflavnids由圖1可以得出：在70時陳皮總黃酮得率到達(dá)最大，故可以確定最正確的提取溫度為70;乙醇體積分?jǐn)?shù)大于60，陳皮總黃酮得率逐漸減少，故可以確定最正確的乙醇體積分?jǐn)?shù)為60;提取時間從2h后得率增長不大，以5h為最高;液固比在30倍后有顯著減少，以25倍為最高;提取1次后得率增長不大，從節(jié)省本錢和節(jié)省溶劑的角度，提取次數(shù)為1次。論文聯(lián)盟.LL.編輯。2.5正交試驗設(shè)計優(yōu)選最正確提取條件通過單因素實驗選取影響較大的三個因素：提取時間、提取溫度和液固比，運用正交設(shè)

8、計實驗法，選用三因素三程度來確定陳皮總黃酮提取的最正確條件。實驗結(jié)果見表13。表1實驗因素程度表略Tab.1Fatrsandlevels從表2的直觀分析可以看出，3個因素對總黃酮提取含量的影響次序：液固比、提取溫度、提取時間。從表3的方差分析可以看出，液固比和提取溫度對結(jié)果有顯著性影響，提取時間對結(jié)果的影響不顯著，從經(jīng)濟、省時的原那么考慮，提取時間定為3h。綜合上面的因素，最正確提取工藝：體積分?jǐn)?shù)為60的乙醇，提取溫度70，液固比125，提取時間3h，提取1次。表2L9(34)正交實驗結(jié)果與直觀分析略Tab.2ResultfL9(34)rthgnalexperientandanalysis表3

9、L9(34)正交實驗方差分析表略Tab.3ANVAanalysisfL9(34)rthgnalexperient2.6驗證實驗按上述優(yōu)化提取條件平行做3份樣品，結(jié)果穩(wěn)定，證明該方案可行。3討論3.1測定陳皮中總黃酮時，文獻大多采用蘆丁為對照品和“NaN2-AlN3-NaH體系，使得吸收峰向高處挪動，以減少干擾5-6。但實際上陳皮總黃酮根本不含蘆丁，絡(luò)合后蘆丁最大的吸收峰和陳皮總黃酮的吸收峰相差較大。本文用陳皮總黃酮的主要成分橙皮苷為標(biāo)準(zhǔn)品，直接測定。實驗結(jié)果顯示兩者的最大吸收波長很接近。該方法簡單，易操作，技術(shù)成熟，重現(xiàn)性好。3.2陳皮總黃酮主要為黃酮苷類，用乙醇提取較水提好，得率高，雜質(zhì)少，有利于后續(xù)的別離，溶劑可回收，適于工業(yè)消費。【參考文獻】1王姝梅，何春蘭.陳皮提取物去除氧自由基和抗脂質(zhì)過氧化作用J.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1998,29(6):462465.2蘇丹，秦德安.陳皮提取液抗氧化及延緩衰老作用研究J.華東師范大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,1999(1):100102.3李琴山，婁桂予，錢民章,等.橙皮苷與蘆丁體外抗高密度脂蛋白氧化修飾的作用J.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報,2022,3(2):115120.4趙國華，陳宗道.柑桔類黃酮生物活性的研