實(shí)驗(yàn)五血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)與肥達(dá)實(shí)驗(yàn)_第1頁(yè)
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1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)五血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)與肥達(dá)實(shí)驗(yàn)第1頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三目錄一 血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第2頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三熟悉血漿凝固酶試驗(yàn)的意義。目的:一 血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)材料:菌種 : 金黃色葡萄球菌 表皮葡萄球菌其他: 新鮮兔血漿(或人血漿)、 NS等第3頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三纖維蛋白原+血漿凝固酶 不溶性纖維蛋白 玻片法原理:一 血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)細(xì)菌形成凝塊黏附于細(xì)菌第4頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三 充分混合,觀察結(jié)果。 結(jié)果:陽(yáng)性無(wú)法混勻,細(xì)菌在血

2、漿中聚集成團(tuán)塊; 陰性呈均勻混濁 ; 血漿+NS+細(xì)菌1 血漿+NS+細(xì)菌2 方法:一 血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌意義: 鑒定致病性與非致病性葡萄球菌。 第5頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三目的:二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)1、掌握肥達(dá)試驗(yàn)的原理,操作方法及結(jié)果判斷。2、熟悉其臨床意義。第6頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三一、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)材料:1標(biāo)本 感染待測(cè)血清(稀釋度1:20)。2試劑 傷寒沙門(mén)菌菌體抗原(O)及鞭毛抗原 (H)、甲型副傷寒沙門(mén)菌鞭毛抗原及乙型 副傷寒沙門(mén)菌鞭毛抗原。3其他 微孔反應(yīng)板、50l移液器、吸頭、水浴 箱等

3、。第7頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三原理:一、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第8頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三(1)在微孔反應(yīng)板編號(hào)4排6列。(2)每孔加入生理鹽水50l 。(3)吸取待檢血清50l加入每排第1孔,連續(xù)倍比稀釋 到第5孔。從第5孔吸出50l棄去。第6孔為對(duì)照管。 這樣每排從第1孔至第5孔的血清稀釋度為1:40, 1:80,1:160,1:320,1:640。 (4)每排每孔加入對(duì)應(yīng)的傷寒菌液50l 。(5)混勻,置于52水浴箱中1h后觀察 。方法:二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第9頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三50實(shí)驗(yàn)方法

4、5050505050505050501:401:801:1601:3201:64050棄掉1234550650NS(l )待測(cè)血清對(duì)照管50505050滅活的傷寒菌液50l 50l 50l 50l 50l 50l 抗體稀釋度徹底混勻52, 1h二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第10頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三結(jié)果: 先觀察對(duì)照管,應(yīng)無(wú)凝集現(xiàn)象?!?” 細(xì)菌全部凝集,液體清澈,孔底形成大片凝集物?!?” 細(xì)菌大部分凝集,液體澄清,孔底明顯凝集物?!?” 細(xì)菌部分凝集,液體半澄清,孔底有明顯凝集物“+” 少量細(xì)菌凝集,液體較混濁,孔底少量凝集物?!?” 液體混濁,細(xì)菌無(wú)凝集。與對(duì)照

5、孔相同。二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第11頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三 效價(jià)(滴度)的判定: 產(chǎn)生明顯凝集反應(yīng)(+)的最高血清稀釋度為血清中所測(cè)抗體的效價(jià)。效價(jià)愈高,表示血清中所含該抗體愈多。如血清的最低稀釋度仍無(wú)凝集,或血清效價(jià)低于1:80 ,則為陰性,應(yīng)報(bào)“1:1280”。二、肥達(dá)氏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)第12頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果+很小的凝集顆粒混濁-無(wú)凝集現(xiàn)象與對(duì)照相同+小、部分凝集塊中等混濁+大多凝集管底輕度混濁+大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清第13頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三H與O抗體的性質(zhì)及其消長(zhǎng)意義預(yù)防接種; 非特異性回憶反應(yīng)感染早期、其他沙門(mén)菌引起的交叉反應(yīng)患腸熱癥可能性大高低高出現(xiàn)較晚,維持時(shí)間長(zhǎng)IgGH抗體低高高出現(xiàn)較早, 維持時(shí)間短IgMO抗體體內(nèi)出現(xiàn)情況體內(nèi)出現(xiàn)情況抗體類(lèi)型第14頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測(cè)血清的滴度效價(jià)第15頁(yè),共17頁(yè),2022年,5月20日,22點(diǎn)11分,星期三思考題1. 李某發(fā)熱、全身不適,體溫持續(xù)升高,最高達(dá)40,采血進(jìn)行肥達(dá)氏實(shí)驗(yàn)檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果是O抗體凝集效價(jià)是1:80, H抗體凝集效價(jià)是1:320。

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