細(xì)胞免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容提要E花環(huán)實(shí)驗(yàn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)2大吞噬實(shí)驗(yàn)3小吞噬實(shí)驗(yàn)4E花環(huán)試驗(yàn)人外周血T淋巴細(xì)胞上能與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合的受體，稱為E受體，即CD2分子或LFA-2 （淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-2） ；在一定的試驗(yàn)條件下，綿羊紅細(xì)胞能與該受體結(jié)合形成以T細(xì)胞為中心，四周繞以綿羊紅細(xì)胞的玫瑰花團(tuán)，故稱E花環(huán)形成試驗(yàn)。 TTBSRBCCD2固定、染色固定：取出孵育后的細(xì)胞，滴加0.8%戊二醛200l （等體積），輕輕懸浮混勻，4孵育放置20-30min。涂片：向上述細(xì)胞懸液中加50l美蘭染液，混勻，靜置5min，取一滴于載玻片上，加蓋玻片。鏡檢鏡檢：淋巴細(xì)胞呈藍(lán)色，SRBC呈紅色圍繞淋巴細(xì)胞形成花環(huán)，凡

2、表面粘附有3個(gè)或3個(gè)以上SRBC者為花環(huán)形成細(xì)胞（即E陽性細(xì)胞） 計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞，算出花環(huán)形成百分率，并推測其T淋巴細(xì)胞百分率。正常值為：5080%。注意：計(jì)數(shù)及搖勻細(xì)胞時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，避免打散已形成的花環(huán)結(jié)果E花環(huán)分類Ea-RFC(效應(yīng)T細(xì)胞)：正常值為1535%。 （activated rosette formation cells,A-RFC）。 E-RFC(總和)：正常值為6080%。意義： E-受體為T細(xì)胞所特有，是鑒定T細(xì)胞的重要標(biāo)志之一，還用于T細(xì)胞的分離。 用于檢測患者外周血中T細(xì)胞的比例及數(shù)目，間接反映患者細(xì)胞免疫功能。視頻動(dòng)畫內(nèi)容提要淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)2E花環(huán)實(shí)驗(yàn)1大吞噬

3、實(shí)驗(yàn)3小吞噬實(shí)驗(yàn)4淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）選擇性刺激T細(xì)胞增殖；脂多糖（LPS）、葡萄球菌A蛋白（SPA）可刺激B細(xì)胞增殖；T細(xì)胞、B細(xì)胞表面具有抗原識別受體和有絲分裂原受體美洲商陸淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)原理當(dāng)T淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，加入PHA或ConA刺激， T淋巴細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，同時(shí)伴有DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成的增加，最終導(dǎo)致細(xì)胞分裂。根據(jù)其轉(zhuǎn)化率可測定T淋巴細(xì)胞的功能，從而反映機(jī)體的細(xì)胞免疫功能。 DNA合成分化淋巴母細(xì)胞刺激物細(xì)胞變大細(xì)胞漿擴(kuò)大空泡核仁明顯核染色質(zhì)疏松T淋巴細(xì)胞未轉(zhuǎn)化細(xì)胞過渡態(tài)細(xì)胞淋巴母細(xì)胞 轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞的判斷標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞類別形態(tài)特征

4、轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞未轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞淋巴母細(xì)胞過渡型細(xì)胞胞體大?。ㄖ睆剑?020m或更大1216m68m胞 核位 置多偏于一側(cè)，少數(shù)位于中央中央或稍偏多位于中央染 色 質(zhì)疏松，呈粒狀較疏松致密團(tuán)聚核 仁清晰，可見13個(gè)有或無無有絲分裂有時(shí)可見無無胞 漿量豐富，核之一側(cè)較寬廣稍寬較少，常呈一窄環(huán)嗜堿性+空 泡?？梢娪谢驘o無偽 足?？梢娪谢驘o無內(nèi)容提要大吞噬實(shí)驗(yàn)3淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)2E花環(huán)實(shí)驗(yàn)1小吞噬實(shí)驗(yàn)4原理巨噬細(xì)胞對顆粒性抗原有強(qiáng)大的吞噬能力。常用細(xì)胞型抗原如雞紅細(xì)胞、白色念珠菌、酵母細(xì)胞等與巨噬細(xì)胞孵育，檢測巨噬細(xì)胞的吞噬能力。原理16大吞噬試驗(yàn)雞紅細(xì)胞大吞噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞消化程度分級：級：未消化，

5、雞紅細(xì)胞核清晰，著色正常。級：輕度消化，雞紅細(xì)胞核模糊，核腫脹，著色淡。級：完全消化，雞紅細(xì)胞核溶解，染色極淡。 結(jié)果計(jì)算可觀察雞紅細(xì)胞的消化程度，以判斷巨噬細(xì)胞胞內(nèi)殺傷功能。吞噬百分比吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/所計(jì)數(shù)的巨噬細(xì)胞總數(shù)（吞噬的未吞噬的）100%吞噬指數(shù)100個(gè)巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/100個(gè)巨噬細(xì)胞臨床意義參考值：正常人吞噬百分比為60%65%，吞噬指數(shù)1%左右臨床意義：可作為機(jī)體抗腫瘤能力的判斷指標(biāo)。惡性腫瘤病人吞噬百分比為34%38%。吞噬指數(shù)為0.6%左右。有人報(bào)告，食道癌、胃癌、腸癌、乳腺癌以及其它惡性腫瘤患者的吞噬百分比都在45%以下，吞噬指數(shù)也降低。不少患者在術(shù)后有不同程度的回升，提示本試驗(yàn)也可作為判斷腫瘤療效及預(yù)后的一個(gè)參考指標(biāo)。內(nèi)容提要3214E花環(huán)實(shí)驗(yàn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)大吞噬實(shí)驗(yàn)小吞噬實(shí)驗(yàn)原理血液中的中性粒細(xì)胞通稱小吞噬細(xì)胞。有強(qiáng)大的吞噬和消化異物的功能，構(gòu)成機(jī)體天然抵抗力。在機(jī)體固有免疫和適應(yīng)性免疫中