不同藥物對刺參死亡率的影響

1、PAGE PAGE - 7 -不同藥物對刺參死亡率的影響摘要：采用靜水試驗法，在水溫1415的條件下，用重金屬類藥物硫酸銅（CuSO45H2O）、硫酸鋅（ZnSO47H2O）和消毒劑類藥物生石灰（CaO）、過氧化氫（H2O2）對刺參（ApostichopusjaponicusSelenka）幼體進行了單一急性毒性試驗。結果表明：Cu2+對刺參幼體的24hrs、48hrs和96hrs的LC50分別為0.591mg/L、0.350mg/L和0.232mg/L;Zn2+的24hrs、48hrs和96hrs的LC50分別為5.657mg/L、4.538mg/L和2.284mg/L;生石灰的24hrs、

2、48hrs和96hrs的LC50分別為74.369mg/L、71.269mg/L和69.213mg/L;過氧化氫的LC50分別為15.930mg/L、15.178mg/L和14.749mg/L。試驗表明，重金屬類物質(zhì)的毒性遠遠大于消毒劑物。因此，養(yǎng)殖中要盡量避免重金屬的污染;生石灰不宜在刺參養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用，但由于其價格便宜，可以用作刺參空池的清池消毒處理;雙氧水（過氧化氫，H2O2）可用作消毒劑和增氧劑，不能超過安全濃度。關鍵詞：刺參（ApostichopusjaponicusSelenka）;毒性;致死濃度;死亡率中圖分類號：S948文獻標志碼：A刺參（Apostichopusjaponic

3、usSelenka）屬于棘皮動物門（Echinodermata），海參綱（Holothuroidea），楣手目（Asipdochirotida），刺參科（Stichopidae），仿刺參屬（Apostichopus）。刺參是海參中價值最高的一種，既是一種營養(yǎng)豐富的高端保健食材，也是一種能夠延緩衰老、抑制腫瘤、滋陰壯陽的名貴藥材，有很強的經(jīng)濟價值。刺參呈圓筒狀，體長20cm40cm，前端中央口部環(huán)生20個楣狀的觸手，背部生46行大小排列不規(guī)則圓錐形肉刺，腹部生有3行密集的管足，體色呈現(xiàn)黃褐、黑褐、綠褐、純白或灰白等。刺參屬狹鹽性生物（適應鹽度2.8%3.1%，pH7.88.2），適宜生活在水質(zhì)清

4、澈、波流平穩(wěn)、富有底棲硅藻的巖礁底或大型藻類叢生的沙底，水溫高于20會出現(xiàn)“夏眠”、低于3會出現(xiàn)“冬眠”的習性，但不得高于30和低于0。卵生，雌雄異體，體外受精，2年達性成熟。參苗生長到商品規(guī)格在自然海域一般需3年，人工養(yǎng)殖12年。刺參如遇強烈刺激或遇水溫、水質(zhì)突變等，會將內(nèi)臟從肛門全部排出，條件適宜情況下臟器和損傷體段均可再生為一個完整的個體1。近年來隨著人民生活水平的提高，飲食習慣也在逐漸優(yōu)化，刺參的需求量大幅增加，刺參養(yǎng)殖的市場前景廣闊，發(fā)展?jié)摿薮蟆Ｒ蚝Ｑ笏w污染、養(yǎng)殖中藥物濫用、過度投喂等，造成致病菌和病毒等大量繁殖，引發(fā)海參各種疾病泛濫甚至爆發(fā)性死亡，刺參養(yǎng)殖企業(yè)和個人經(jīng)濟損失慘重

5、，嚴重限制了刺參養(yǎng)殖行業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。因此研究解決刺參養(yǎng)殖中的病害問題是該行業(yè)的關鍵所在，迫在眉睫;也是水產(chǎn)科研人員重要的課題方向，刻不容緩;更是應對迫切社會需求和市場需求的有效路徑，意義重大2。從養(yǎng)殖發(fā)展來看，從業(yè)人員理念有所進步，能夠通過優(yōu)化養(yǎng)殖環(huán)境、選育健康苗種等途徑提高刺參的免疫力和抵抗力，但因缺乏經(jīng)驗、急于求成，養(yǎng)殖中還是會使用大量化學藥物消殺各種病原微生物來防治病害。缺乏實踐經(jīng)驗和理論指導盲目的亂施濫用，對刺參本身也有不容忽視的毒害作用，輕則影響生長，重則導致死亡。因藥物種類選擇錯誤、濃度劑量投放不慎重的亂施濫用而造成養(yǎng)殖刺參的中毒死亡的現(xiàn)象在實際生產(chǎn)中屢見不鮮3，因此非常有必要

6、開展各種藥物不同濃度對刺參進行毒性試驗研究。文章選擇具有代表性的重金屬類藥物硫硫酸銅（CuSO45H2O）和硫酸鋅（ZnSO47H2O）、消毒劑類藥物生石灰（CaO）和過氧化氫（H2O2）做刺參幼體的急性毒性試驗，研究其不同濃度范圍和不同時間段對刺參幼體成活率的影響，通過數(shù)據(jù)分析確定其安全濃度。在大面積使用新藥物前可采用此方法進行小水體試驗，舉一反三，從而科學地指導在生產(chǎn)中的藥物應用。1材料與方法1.1材料1.1.1試驗動物試驗所用的刺參幼體來源于河北唐山市樂亭縣姜各莊鎮(zhèn)某家海參育苗場，刺參幼體伸展體長為2.5cm3.0cm，確保所選個體健康有活力。試驗前期在80L的塑料大桶中（水溫1415）

7、暫養(yǎng)5d后分組試驗。暫養(yǎng)期和試驗期，均不投喂任何飼料，且每天早晚各換水一次。1.1.2試驗用水試驗用海水為育苗場日常使用的海水，經(jīng)沉淀、砂濾、曝氣及鍋爐升溫等處理，鹽度為29-30，海水pH值為7.88.2，水溫1415。1.1.3試驗容器試驗所用容器為塑料整理箱，體積為18L，為減少試驗容器對消毒劑的吸附，試驗前用對應藥物濃度的溶液注入容器至少12hrs之后開始試驗，以達到浸泡試驗容器的目的。1.1.4試驗藥物試驗用藥物名稱、含量及生產(chǎn)廠商：硫酸銅（CuSO45H2O），銅（Cu）含量25%，上海浩業(yè)化工有限公司生產(chǎn);硫酸鋅（ZnSO47H2O），鋅（Zn）含量20%，富陽市宏利化工廠生產(chǎn);

8、生石灰（CaO），有效鈣含量90%，淄博海諾化工有限公司生產(chǎn);雙氧水（過氧化氫H2O2含量2.5%3.5%），上海金鹿化工有限公司生產(chǎn)。試驗時用蒸餾水將各試驗藥物配成一定質(zhì)量濃度的儲備液，現(xiàn)用現(xiàn)稀釋配制。1.2預試驗采用靜水式急性毒性試驗4，鹽度為2930，pH值為7.8-8.2，水溫1415，試驗期間不充氣，不投餌。對每種藥物都進行多次預備試驗后，確定96hrs后全活度上限和全致死濃度下限，再根據(jù)日常養(yǎng)殖生產(chǎn)中防治魚病所使用的藥物劑量和說明書指導適當?shù)財U大或者縮小設置梯度，以18L的塑料整理箱為試驗容器，觀察刺參的存活情況，最終確定用于正式試驗的藥物濃度范圍。5F95C273-FBAD-4C

9、23-9470-D9C22435E7F9結合預試驗結果和藥劑指導綜合分析，確定本次試驗藥物濃度范圍分別為：硫酸銅0.07mg/L1.12mg/L（濃度梯度倍數(shù)：2）;硫酸鋅1.80mg/L9.11mg/L（濃度梯度倍數(shù)：1.5）;生石灰10.00mg/L160.00mg/L（濃度梯度倍數(shù)：2）;過氧化氫2.00mg/L32.00mg/L（濃度梯度倍數(shù)：2）。1.3試驗方法1.3.1試驗分組每種藥物分5個等比濃度梯度（藥物濃度梯度見表1）。試驗前先將藥品配成儲備液，再按比例投入整理箱中稀釋成所需濃度。用軟網(wǎng)將刺參從暫養(yǎng)桶中撈出，向每個整理箱隨機投放10只暫養(yǎng)后個體健壯、處于饑餓狀態(tài)下的刺參，每個

10、濃度設定2個平行組，同時設定一個空白對照，投放刺參順序按藥物濃度從低到高5。1.3.2試驗觀察和記錄試驗開始后前8hrs連續(xù)觀察記錄試驗刺參的活動情況和死亡情況，而后分別在24hrs、48hrs和96hrs記錄各箱中刺參的死亡情況。判斷刺參死亡的標準6是當刺參沉落到箱底后用玻璃棒對其進行刺激翻轉(zhuǎn)如無任何收縮反應和移動即判斷刺參死亡。同時觀察刺參中毒癥狀表現(xiàn)，有無吐腸、腫嘴、疣足是否受損、外表有無變色、身體是否蜷曲等現(xiàn)象7。試驗過程中，一旦發(fā)現(xiàn)刺參死亡立即撈出，以防敗壞水質(zhì)。1.3.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計根據(jù)試驗所得數(shù)據(jù)，用直線內(nèi)插法求出24hrs、48hrs和96hrs的半致死濃度LC508。半致死濃度計算公式：LC50=C1+（C2-C1）（50%-P1）/（P2-P1）式中：C1、C2死亡率近50%的低端和高端藥液濃度;P1、P2死亡率近50%的低端和高端死亡率。若對照組出現(xiàn)死亡時，各濃度組的死亡百分率以下式進行校正：P=（P-C）/（1-C），其中P為觀察死亡百分數(shù)，C為對照組死亡百分數(shù)，P為校正后的死亡百分數(shù)9。采用常規(guī)方法SC=96hrsLC500.1計算安全質(zhì)量濃度10。2結果與分析2.1中毒癥狀刺參在藥物的刺激下經(jīng)常吐出內(nèi)臟，口部腫脹，疣足往往受損，體色變黑變暗或者變白，身體蜷曲等。在高濃度組刺參