湖南版高中生物總復習專題22 微生物的培養(yǎng)與發(fā)酵工程（試題練）教學講練

1、高中生物總復習PAGE PAGE 30成功的大門為你而開。第七單元生物技術(shù)與工程專題22微生物的培養(yǎng)與發(fā)酵工程【考情探究】課標解讀考情分析備考指導考點考向1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)果酒、果醋的制作考查內(nèi)容:本專題考查的熱點內(nèi)容是微生物的培養(yǎng)與應用,集中在微生物的實驗室培養(yǎng)、特定微生物數(shù)量的測定方法、培養(yǎng)基對微生物的選擇作用等;傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)方面主要考查運用發(fā)酵加工食品的基本方法測定食品加工中可能產(chǎn)生的有害物質(zhì),題目情境貼近生活和科技進展,但試題答案落腳于教材主干知識命題規(guī)律:命題體現(xiàn)了對科學探究與科學素養(yǎng)的考查。對微生物的培養(yǎng)與應用的考查多以特定情景為背景,通過對目標微生物的篩選、純化,考查微生物的營養(yǎng)、代

2、謝;傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)考查的內(nèi)容較簡單,常延伸到必修一,如生物的結(jié)構(gòu)與功能、呼吸作用等,進行學科內(nèi)綜合考查1.本專題復習時注意,在掌握各種生物技術(shù)的方法和原理的基礎上進行歸納、比較2.平常注意掌握實驗設計思路、實驗方法、實驗分析與評價等基本知識3.復習時注意與必修知識(生物的結(jié)構(gòu)、代謝等)相聯(lián)系腐乳制作與泡菜的腌制2微生物的實驗室培養(yǎng)培養(yǎng)基與微生物的純化3微生物的分離與計數(shù)微生物的分離與計數(shù)【真題探秘】基礎篇【基礎集訓】考點一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)考向1果酒、果醋的制作1.藍莓富含花青素等營養(yǎng)成分,具有保護視力、軟化血管、增強人體免疫力等功能。某同學嘗試用藍莓來制作藍莓果酒和藍莓果醋。(1)制酒中利用的微生物

3、是,取樣后可用觀察該微生物。發(fā)酵時一般要先通氣,通氣的原理是。制酒過程中可在酸性條件下用橙色的重鉻酸鉀溶液檢驗酒精的存在,檢驗后顏色變成。(2)為鑒定藍莓果醋是否釀制成功,除可以通過觀察菌膜、嘗、嗅之外,還可以通過檢測和比較發(fā)酵前后的做進一步的鑒定。(3)釀制藍莓果酒時,并不需要對藍莓進行嚴格的消毒處理,這是因為在的發(fā)酵液中,絕大多數(shù)微生物無法適應這一環(huán)境而受抑制。(4)釀制成功的藍莓果酒如果暴露在空氣中酒味會逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味,尤其是在氣溫高的夏天更易如此,分析其原因是醋酸菌最適生長溫度為。醋酸菌將乙醇變?yōu)榇姿岬沫h(huán)境條件是糖原(填“充足”或“缺少”)。答案(1)酵母菌(光學)顯微鏡酵母菌可

4、在有氧條件下大量繁殖灰綠色(2)pH(醋酸含量)(3)缺氧、成酸性(4)3035 缺少考向2腐乳制作與泡菜的腌制2.回答下列有關腐乳制作的問題:(1)腐乳是經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品,多種微生物參與了該發(fā)酵過程,其中起主要作用的微生物是,其產(chǎn)生的蛋白酶可以使豆腐中的蛋白質(zhì)被分解為和。(2)發(fā)酵完成后,需裝瓶加鹽腌制,瓶子一般采用的消毒方法是,加鹽的目的是 。腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯,鹵湯除使腐乳具有一定的外,還具有防腐作用。(3)封瓶的時候,需要把瓶口在酒精燈火焰上過一下,原因是。(4)含水量高的豆腐不適合用來制作腐乳,原因是。答案(1)毛霉肽氨基酸(2)煮沸消毒法析出

5、豆腐中的水分,抑制微生物生長風味(3)防止瓶口被微生物污染(4)含水量太高的豆腐在制作過程中容易破碎,不易成形3.泡菜和腐乳是我國的傳統(tǒng)食品,請回答有關問題:(1)制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是。為了縮短制作時間,有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的目的是。(2)乳酸發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物是。泡菜制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害,影響亞硝酸鹽含量的因素有(至少兩項)等。(3)腐乳是豆腐經(jīng)多種微生物發(fā)酵后制成的食品,其中起主要的作用的微生物是毛霉。制作的后期可加入鹵湯,鹵湯除具有一定的防腐作用外,還能使腐乳具有獨特的。實驗室制作的腐乳可能,不宜直接食用。(4)

6、乳酸菌和毛霉在細胞結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是。答案(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境增加乳酸菌含量(2)丙酮酸溫度、食鹽用量、腌制時間(3)風味滅菌不徹底(4)有無以核膜為界限的細胞核考點二微生物的實驗室培養(yǎng)考向培養(yǎng)基與微生物的純化1.瓊脂是一種多糖類物質(zhì),由于很少有微生物能將其降解而成為配制固體培養(yǎng)基時常用的凝固劑之一。某實驗室在處理一批已進行過微生物培養(yǎng)的廢棄固體培養(yǎng)基時發(fā)現(xiàn),幾乎全部培養(yǎng)基上的微生物都已死亡,但在其中一個培養(yǎng)基上存在一個正常生長的菌落。對此,研究人員提出了以下假說:此培養(yǎng)基內(nèi)的營養(yǎng)未被消耗殆盡;形成此菌落的為自養(yǎng)型微生物;形成此菌落的微生物能利用瓊脂。(1)從研究人員所提的假說可以推測所說的“

7、營養(yǎng)”指的最可能是(填“碳源”“氮源”或“無機鹽”)。(2)配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟包括、調(diào)pH、滅菌、倒平板。倒平板所用的培養(yǎng)皿的滅菌方法是。(3)為了檢驗上述假說是否正確,研究人員分別使用兩種培養(yǎng)基對上述微生物進行培養(yǎng),其中一種為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(a),則另一培養(yǎng)基b中不能加入下列的。A.牛肉膏B.蛋白胨C.氯化鈉D.瓊脂(4)用上述a、b培養(yǎng)足夠時間,菌落生長情況為,證明假說正確。(5)若上述實驗否定了假說,為進一步檢驗假說和,研究人員想要配制一種新的培養(yǎng)基c,并通過b與c上是否出現(xiàn)菌落作為觀察指標,則與b相比,c的成分需要做出的變化是。答案(1)碳源(2)計算稱量溶化干熱滅菌法(

8、3)A、B(4)a培養(yǎng)基上長出菌落,b培養(yǎng)基上不長菌落(5)將瓊脂換用其他凝固劑2.為了調(diào)查銀川市自來水水源地的水質(zhì)情況,某研究小組對該地自來水水樣中的大腸桿菌進行了測定,請回答下列問題:(1)該小組采用平板劃線法分離提純水樣中的細菌,劃線時在培養(yǎng)基上共畫了4個區(qū)域,則需要次灼燒接種環(huán)。在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線,這樣做的目的是 。(2)在純化菌種時,所用的培養(yǎng)基都需要在接種前用法進行滅菌。將1 mL水樣稀釋1 000倍,在3個平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1 mL稀釋液,在適宜條件下培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)約為。

9、要使該實驗所得結(jié)果可靠,還應該同時在另一平板上接種作為對照進行實驗。(3)菌種需臨時保藏時,要先將菌種接種到試管的培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當菌落長成后,將試管放入冰箱中保藏。但此方法存在的缺點是 。 (4)在培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿倒置并放在中。實驗結(jié)束時,使用過的培養(yǎng)基應該進行處理后才能丟棄。答案(1)5將聚集的菌種逐步稀釋以便獲得單個菌種的菌落(2)高壓蒸汽滅菌5.0108等量的無菌水(3)固體斜面4 保存的時間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異(4)恒溫培養(yǎng)箱滅菌考點三微生物的分離與計數(shù)考向微生物的分離與計數(shù)1.幽門螺桿菌是一種微厭氧菌,它是引發(fā)胃炎的主要原因。胃總是在不停地蠕動,里面還有胃

10、酸(pH為1.5左右),絕大部分的細菌都適應不了,幽門螺桿菌能產(chǎn)生尿素酶,它將尿素分解成氨和二氧化碳,氨可以中和胃酸保護幽門螺桿菌。請回答以下問題:(1)人體的胃可以為幽門螺桿菌的生長繁殖提供水、無機鹽、等營養(yǎng)物質(zhì),按功能分類,人體胃中的內(nèi)容物相當于 培養(yǎng)基。(2)根據(jù)題干信息可知,若要在體外培養(yǎng)幽門螺桿菌,培養(yǎng)溫度的要求是。氧氣條件是?？稍谔砑恿四蛩氐呐囵B(yǎng)基中加入指示劑觀察菌落周圍是否變紅,以對幽門螺桿菌進行初步鑒定。(3)中國人飲食習慣中的不分餐也不常使用公筷很可能會導致胃幽門螺桿菌交叉?zhèn)鞑?為了驗證這一假說,有人提取了某胃炎患者家庭的100 g剩菜,加入無菌水稀釋至1 000 mL。取0

11、.1 mL上述稀釋液分別接種到3個適宜的培養(yǎng)基中置于適宜的條件下進行培養(yǎng),三個平板上胃幽門螺桿菌菌落數(shù)均介于30300之間且相差不大,求平均值得到菌落數(shù)為A個。實驗過程中,接種的方法一般為,由實驗可知每克剩菜中胃幽門螺桿菌數(shù)量為 個。本方法測得的結(jié)果一般小于實際值,原因最可能是 。答案(1)碳源、氮源(或有機物)(合理即可)選擇(2)37 左右低氧酚紅(3)稀釋涂布平板法A102當兩個或兩個以上的細菌連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落2.自養(yǎng)需氧型的硝化細菌能夠降低水體中的銨鹽,對水體有一定的凈化作用,請回答:(1)培養(yǎng)硝化細菌時,將含固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是。培養(yǎng)基中加入的銨鹽為硝

12、化細菌的生長提供,培養(yǎng)基中沒有加入有機碳,從功能上看這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2)硝化細菌純化并計數(shù)時,對照組應該涂布等量的。樣液稀釋103倍后,取0.1 mL涂布到四個平板,統(tǒng)計其菌落數(shù)分別為251、265、276、348個,可推測原樣液中硝化細菌的濃度為個/mL,該方法測定的硝化細菌的含量和實際值相比,一般(填“偏大”或“偏小”)。(3)若要探究弱酸弱堿條件下硝化細菌對銨鹽轉(zhuǎn)化能力的大小,現(xiàn)提供足量含某銨鹽的液體培養(yǎng)基及pH分別為5、9的弱酸和弱堿緩沖液,寫出你的實驗設計思路: 。答案(1)防止冷凝形成水滴,污染培養(yǎng)基(或防止培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā))氮源(或氮源和能量)選擇(2)無菌水2

13、.64106偏小(3)將含銨鹽的液體培養(yǎng)基均分成三等份,分別加入等量的弱酸、弱堿緩沖液和無菌水(作為對照),將其pH依次調(diào)節(jié)為5、9、7,培養(yǎng)相同時間后,測定培養(yǎng)基中的銨鹽的剩余量來判斷硝化細菌對銨鹽轉(zhuǎn)換能力的大小應用篇【應用集訓】應用制作酸奶的微生物學原理1.關于酸奶制作,下列說法正確的是()A.含抗生素的牛奶更容易發(fā)酵B.溫度越高,制作酸奶需要的時間越長C.牛奶變酸的同時,其中的糖類發(fā)生了變化D.制作過程中需不斷通入無菌空氣答案C2.酸奶不僅美味,還含有豐富的蛋白質(zhì)、鈣以及多種維生素等,酸奶制作也比較簡單,所以廣受人們的喜歡。請結(jié)合實際生活回答下列問題:(1)對奶牛養(yǎng)殖廠售出的新鮮牛奶消毒

14、常用法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是。(2)某同學將超市買來的某品牌老酸奶加入鮮奶中,攪拌均勻后,放入酸奶機中,也可制作美味可口的酸奶,該同學加入適量老酸奶的目的是。(3)若要分離純化得到發(fā)酵效果相對較好的乳酸菌種,所用的培養(yǎng)基中要加入碳酸鈣(有CaCO3的培養(yǎng)基不透明,無CaCO3的培養(yǎng)基透明),其作用除中和產(chǎn)生的乳酸外,還可以,分離純化時應挑選出 的菌落作為候選菌。(4)乳酸菌菌種若要長期保存,菌液中常需要加入一定量的,并在-20 的環(huán)境中存放。答案(1)巴氏消毒在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(2)接種(3)鑒別乳酸菌透明圈大(4)甘油【五年高考】考點一 傳

15、統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)1.(2017課標全國,37,15分)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵,并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}:(1)該實驗的自變量是、。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是。(3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關系,則無法確定發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是 。(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)?。答案(

16、1)菌種發(fā)酵時間(2)好氧菌(3)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油2.(2016課標全國,39,15分)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}:(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程和是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段,在酵母菌細胞的中進行,其產(chǎn)物乙醇與試劑反應呈現(xiàn)灰綠色,這一反應可用于乙醇的檢驗;過程在酵母菌細胞的 中進行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的增殖速度。(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型,該過程需要在條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中,第一階

17、段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度(填“低于”或“高于”)第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于核生物,其細胞結(jié)構(gòu)中(填“含有”或“不含有”)線粒體。答案(1)細胞質(zhì)基質(zhì)重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有3.(2016天津理綜,10,12分)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味,其生產(chǎn)工藝流程如下圖。淀粉類原料成熟酒醅成熟醋醅(1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應溫度,這是因為酶。(2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高的數(shù)量,有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。(3)在醋酸發(fā)酵階段,獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。發(fā)酵過

18、程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點是,由此推測,影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因是 。乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸中層的醋醅有利于乳酸菌繁殖,積累乳酸。成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變,加劇了不同種類乳酸菌的,淘汰了部分乳酸菌種類。答案(12分)(1)在最適溫度條件下催化能力最強(2)酵母菌(3)先快速增長后趨于穩(wěn)定氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動,或下)種間競爭(或競爭)4.(2015廣東理綜,29,16分)泡菜是我國的傳統(tǒng)食

19、品之一,但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害。某興趣小組準備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到圖。(1)制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有 。(2)據(jù)圖,與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食用,因為后者;pH呈下降趨勢,原因是。(3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的實驗方案和食鹽濃度(4%10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件。請你設計一個實驗結(jié)果記錄表,并推測實驗結(jié)論。答案(16分)(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境(1分)丙酮酸、H、ATP(3分)(2)亞硝

20、酸鹽含量已接近最低水平(1分)乳酸積累(2分)(3)結(jié)果記錄表(6分) 亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg)食鹽濃度(%)乳酸菌發(fā)酵時間(d)123456789104普通優(yōu)選7普通優(yōu)選10普通優(yōu)選注:其他合理答案酌情給分。推測實驗結(jié)論:用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜,亞硝酸鹽含量更低(1分)最適條件是亞硝酸鹽含量最低時的食鹽濃度和發(fā)酵時間(2分)考點二 微生物的實驗室培養(yǎng)5.(2019課標全國,37,15分)已知一種有機物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標菌)。號培養(yǎng)基:在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。號培養(yǎng)基:氯化鈉(5

21、 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機鹽(適量),X(15 g/L)。號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機鹽(適量),X(45 g/L)。回答下列問題。(1)在號培養(yǎng)基中,為微生物提供氮源的是。、號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機物是。(2)若將土壤懸浮液接種在號液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后,不能降解X的細菌比例會,其原因是。(3)號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù),接種時,應采用的方法是。(4)假設從號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長提供和。答案(1)牛

22、肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料6.(2019課標全國,37,15分)物質(zhì)W是一種含氮有機物,會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌(目標菌)?；卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分離目標菌,所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應該是。(2)在從土壤中分離目標菌的過程中,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標菌,應該選擇菌落進一步純化,選擇的依據(jù)是 。(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設計實驗進一步確

23、定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源,請簡要寫出實驗思路、預期結(jié)果和結(jié)論,即 。(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異,該小組擬進行如下實驗,請完善相關內(nèi)容。在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液,C處滴加,三處滴加量相同。一段時間后,測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明;若A、B處形成的透明圈直徑大小相近,說明。答案(1)W(2)乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上,若細菌能生長,則說明該細菌能利用空氣中

24、的氮氣作為氮源(4)緩沖液緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近7.(2019課標全國,37,15分)回答下列與細菌培養(yǎng)相關的問題。(1)在細菌培養(yǎng)時,培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是 。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上(填“能夠”或“不能”)生長,原因是 。(2)用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板(填“倒置”或“正置”)。(3)單個細菌在平板上會形成菌落,研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物,原因是。(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過處理,

25、這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。答案(1)蛋白胨不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)倒置(3)在一定的培養(yǎng)條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌8.(2018課標全國,37,15分)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}:(1)在實驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是 。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能。在照射前,適量噴灑,可強

26、化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度,最可能的原因是 。答案(1)可以(2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡 9.(2018課標全國,37,15分)回答下列與酵母菌有關的問題:(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應采用滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進(填“

27、菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是。答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟考點三 微生物的分離與計數(shù)10.(2018課標全國,37,15分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}:(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基

28、中應加入鏈霉素以抑制的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有(答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有(答出兩點即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是 。(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的

29、菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學的結(jié)果中,乙同學的結(jié)果可信度低,其原因是 。答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復性差11.(2018江蘇單科,31,8分)酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請回答下列問題:(1)配制培養(yǎng)基時,按照培養(yǎng)基配方準確

30、稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的,及時對培養(yǎng)基進行分裝,并進行滅菌。(2)取步驟中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟中將溫度約(在25 、50 或80 中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。(3)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟所示進行劃線。下列敘述合理的有。a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時應避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時,應挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株(4)步驟中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和供應。為監(jiān)測酵母的活細

31、胞密度,將發(fā)酵液稀釋1 000 倍后,經(jīng)等體積臺盼藍染液染色,用2516型血細胞計數(shù)板計數(shù)5 個中格中的細胞數(shù),理論上色細胞的個數(shù)應不少于,才能達到每毫升3109個活細胞的預期密度。答案(8分)(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50 (3)a、b、d(4)氧氣無3012.(2017江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸

32、,以達到富集酚降解菌的目的。若如圖平板中菌落過于密集,應進一步,以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加。(3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應,下表中15號比色管的苯酚濃度應分別為。管號123456苯酚濃度(mg/L)1如果廢水為50 mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號:51020)倍后,再進行比色。答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0

33、.813.(2016課標全國,39,15分)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下:配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);制作無菌平板;設置空白對照組和若干實驗組,進行相關操作;將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}:(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于 。若要完成步驟,該培養(yǎng)基中的成分X通常是。(2)步驟中,實驗組的操作是。(3)若在某次調(diào)查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6個

34、菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法(填“正確”或“不正確”)。答案(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間(3)污染不正確14.(2016課標全國,39,15分)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}:(1)分離純化乳酸菌時,首先需要用對泡菜濾液進行梯度稀釋,進行梯度稀釋的理由是 。(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有和。分離純化時應挑選出的菌落作為候選

35、菌。(3)乳酸菌在-20 長期保存時,菌液中常需要加入一定量的(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。答案(1)無菌水(2分)泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(3分)(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透明圈(2分)(3)甘油(2分)15.(2015課標全國,39,15分)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關問題:(1)顯微觀察時,微生物A菌體中的油脂通?？捎萌旧?。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用 (填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單

36、菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應選用以為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用直接計數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選用法進行計數(shù)。(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學測得相同時間內(nèi),在35 、40 、45 溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg,則上述三個溫度中,條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度,應圍繞設計后續(xù)實驗。答案(1)蘇丹(或蘇丹)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)教師專用題組1.

37、(2014課標,39,15分)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復合酶,其中的葡萄糖苷酶可將分解成。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時,CR可與纖維素形成色復合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲+-+培養(yǎng)基乙+-+注:“+”表示有,“-”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素

38、分解菌,原因是;培養(yǎng)基乙(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 。答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會形成CR纖維素紅色復合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌2.(2014課標,39,15分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是 ;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋

39、液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是 。(3)示意圖A和B中,表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高的利用率。答案(15分)(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107(每空2

40、分,共4分)(2)灼燒(2分)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)(每空2分,共4分)3.(2013課標,39,15分)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用法或法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋,用法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四

41、種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明 ;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的。(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗菌目的,最好應選用抗生素。答案(15分)(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(每空2分,共4分)(2)涂布(1分)(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(每空2分,共8分)(4)A(2分)4.(2011課標,39,15分)有些細菌可分解

42、原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}:(1)在篩選過程中,應將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講,該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。(2)純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即和。(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力。(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和。無菌技術(shù)要求實驗操作應在酒精燈附近進行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。答案(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰【三年模擬

43、】時間:70分鐘分值:100分一、選擇題(每小題5分,共10分)1.(2020屆山東等級考模擬,13)在實驗室中可利用酵母菌發(fā)酵的方式制作葡萄酒,下列說法正確的是()A.葡萄糖在酵母菌細胞的線粒體內(nèi)被分解B.制作葡萄酒時酵母菌先在有氧條件下大量增殖C.制作過程中酵母菌始終處于堿性環(huán)境D.酵母菌的發(fā)酵產(chǎn)物不會抑制自身的代謝活動答案B2.(2020屆山東等級考模擬,20)生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類,研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板,然后在平板上劃分數(shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域

44、,培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是(不定項選擇)()A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.倒成平板后需要進行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子為乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選答案AD二、非選擇題(共90分)3.(2020屆山東臨沂階段檢測,36)微生物在自然界中無處不在,隨人類對微生物認識的加深,人類對其利用越來越廣泛。請回答下列問題:(15分)(1)生活中人們利用酵母菌、醋酸菌分別釀制果酒、果醋,與酵母菌相比,醋酸菌在結(jié)構(gòu)上最明顯的特點是。給予適宜的條件,即使沒有經(jīng)過嚴格的滅菌過程,也能夠獲得果酒、果醋,這是因為。(2)在制作腐乳時,需將長滿毛霉的豆腐用鹽腌制,其作用是

45、 和。(3)在工業(yè)生產(chǎn)中,可從被石油污染的土壤中分離出能分解石油的細菌。在分離時需用作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中提取的細菌,可采用的接種方法是。(4)經(jīng)分離得到的菌種,通常再進行處理才可能得到更高效分解石油的微生物。為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力。答案(1)無核膜包被的細胞核酵母菌、醋酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物會抑制其他微生物的生長(2)析出豆腐中的水分抑制雜菌的生長(3)石油稀釋涂布平板法和平板劃線法(4)誘變強4.(2020屆湖南省長沙一中月考,38)牛奶是日常生活中經(jīng)常食用的乳制品,對人體健康有很大好處。環(huán)?？萍寂d趣小組從某牛奶廠排污口獲取水樣,希望從

46、中篩選出能高效降解蛋白質(zhì)的細菌。據(jù)有關知識回答下列問題:(15分)(1)有人認為食用高溫加熱的牛奶更易消化,理由是 。(2)為實現(xiàn)篩選目的,該興趣小組使用了如下配方的培養(yǎng)液。蛋白質(zhì)、K2HPO4、KH2PO4、(NH4)2SO4、CaCl2 、NaCl、 MgSO47H2O,加水定容該配方中,K2HPO4和KH2PO4的作用是 。試分析能否將該配方中的蛋白質(zhì)換成葡萄糖?說明理由。 。(3)為實現(xiàn)目的菌株的分離和計數(shù),應配制固體培養(yǎng)基,制成平板,再使用的方法接種。為檢測所使用的平板滅菌是否徹底或是否被污染,操作方法是 。答案(1)高溫使牛奶中蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)變得伸展、松散,易被蛋白酶水解,更

47、易消化(2)為細菌生長提供無機鹽,作緩沖劑維持細菌生長過程中pH的穩(wěn)定不能,因為要篩選出能高效降解蛋白質(zhì)的細菌,配制培養(yǎng)液時必須以蛋白質(zhì)為唯一碳源和氮源,所以不能把蛋白質(zhì)換成葡萄糖(3)稀釋涂布平板選擇未接種的平板在適宜條件下放置一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生5.(2020屆湖南衡陽一中期末,37)傳統(tǒng)生物技術(shù)與我們現(xiàn)代的生活依舊很貼近,下面是幾則實例,請分析回答下列問題。(15分)(1)圖為某位同學設計的果酒制作裝置。通氣口一側(cè)開關應(“打開”或“關閉”)才能達到目的。經(jīng)過一段時間后,b處有氣泡產(chǎn)生,該氣體是。整個果酒制作過程中,酵母菌先進行有氧呼吸再進行無氧呼吸,進行有氧呼吸的目的是

48、。 (2)腐乳生產(chǎn)工藝:豆腐塊長滿菌絲的豆腐加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制參與a過程的微生物主要是,加鹽的作用是,最后的腌制要密封的原因是 。 (3)某興趣小組為了研究泡菜發(fā)酵過程中亞硝酸鹽的含量變化,選取三只相同的泡菜壇,操作均正確,得出如圖所示的結(jié)果。了解泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量的目的是,據(jù)圖可知,腌制到約第天以后再食用可以較好地避免亞硝酸鹽對人體健康的危害。答案(1)關閉CO2使酵母菌大量繁殖(2)毛霉析水、調(diào)味、殺菌避免雜菌污染(3)掌握取食泡菜的時間106.(2019重慶渝高中學月考一,37)近年來,紀錄片舌尖上的中國引發(fā)全民關注美食的熱潮,其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。根據(jù)相關知識,回答關于果酒、果醋和腐乳制作的相關問題