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文檔簡介

1、第1章 原核微生物 復(fù)習(xí)題問答:作業(yè)題簡述古生菌細胞膜的特點。簡述細菌三類絲狀特殊結(jié)構(gòu)鞭毛、菌毛和性毛在數(shù)量、形態(tài)和功能上的主要差異。簡述細菌糖被的生理功能及其應(yīng)用。判斷:1. 脂多糖是革蘭氏陰性細菌細胞壁特有成分;而脂蛋白是革蘭氏陽性細菌細胞壁特有成分,二者均含有磷璧酸質(zhì)。2、細菌的大小一般為1m左右,不會隨培養(yǎng)條件而改變。但細菌的形態(tài)會隨培養(yǎng)時間不同而不同。3、自然界中球菌最多,但發(fā)酵生產(chǎn)中大多菌株為桿菌。4、所有原核微生物均具有細胞壁;而且所有原核微生物細胞壁中均具有肽聚糖。5、作為天然可降解塑料的原料是細菌中的儲藏顆粒-異染粒;是一種碳源和能源的儲藏物。6、一些細菌細胞中可形成顆粒性硫

2、,可以用作該細菌的能源儲藏物質(zhì)。7、產(chǎn)芽孢細菌多為革蘭氏陽性細菌。且多為桿菌。但一些球菌也可以產(chǎn)生芽孢。8、衣原體比立克次氏體更小,是能源寄生物。9、立克次氏體是能源寄生物,因為其不能直接傳播。10、支原體是目前所發(fā)現(xiàn)的最小原核微生物;11,所以必須營活細胞內(nèi)專性寄生。12、引起斑疹傷寒的病原體是衣原體,其具有大小兩種細胞,大細胞叫始體,小細胞叫原體。13、沙眼的病原體具有獨特的生活史。14、所有原核微生物均為單細胞,且均以二分裂的方式進行繁殖。15、原核微生物的細胞壁組成雖然不同于真核微生物,但細胞膜組成與功能基本與真核生物相同。16. 藍細菌能夠固氮,也能進行光合作用。其固氮作用是在其特化

3、的細胞羧酶體中進行的。第2章 真核微生物 復(fù)習(xí)題問答:1. 簡述酵母菌細胞壁的化學(xué)組成及其結(jié)構(gòu)特點。2. 從數(shù)量、形態(tài)、著生部位、抗逆能力、及功能比較細菌芽孢與真菌孢子的區(qū)別。判斷:酵母菌的主要無性繁殖方式為出芽生殖,有性繁殖為接合生殖。酵母菌也能形成與霉菌相同的菌絲狀形態(tài),所以也是多細胞生物。酵母菌有性生殖過程包括質(zhì)配、核配和減數(shù)分裂,核配后形成二倍體,二倍體不能出芽生殖。霉菌中根霉能通過形成無性孢子的方式繁殖,其無性孢子主要包括接合孢子和孢囊孢子。霉菌由交織的菌絲組成,菌絲較粗,均為多細胞生物。組成霉菌細胞壁的主要成分為纖維素,此外還有糖蛋白等。霉菌的氣生菌絲和營養(yǎng)菌絲均可以特化成許多特殊

4、的結(jié)構(gòu),其中,營養(yǎng)菌絲特化可以提高其生存能力,而氣生菌絲特化為子實體。第3章 病毒 復(fù)習(xí)題問答:作業(yè)題判斷題:1. 病毒不具細胞結(jié)構(gòu),要檢測是否存在病毒感染,必須通過電子顯微鏡。2. 組成病毒核心成分的物質(zhì)是RNA和DNA。病毒核心中核酸的特點與原核生物基本類似。3. 制作病毒生長曲線時,常通過病毒樣品與敏感細菌等比例混合后涂布雙層平板。4. 類病毒僅含RNA, 可引起動、植物病害。5.類病毒是雙鏈RNA病毒,所以在電子顯微鏡下呈棒狀結(jié)構(gòu)。6、衛(wèi)星DNA和擬病毒同為缺陷病毒,二者均需借助輔助病毒才能增殖。7、Prion 粒子只含蛋白質(zhì),所以不能增殖,但能引起機體免疫反應(yīng)。第5章微生物營養(yǎng) 復(fù)習(xí)

5、題問答:1.簡述設(shè)計與制備培養(yǎng)基的基本原則。并述原則1(有的放矢)的具體內(nèi)容。2. 配制培養(yǎng)基時為什么控制pH?如何控制?3.制備培養(yǎng)基時各營養(yǎng)物質(zhì)的濃度一般遵循何種規(guī)律?4.光能自養(yǎng)型微生物劃分的依據(jù)是什么?可分為幾種類型?5.設(shè)計一種能定向分離石油降解細菌的合成培養(yǎng)基(寫出具體配方和用量并簡要說明其依據(jù))第7章微生物生長與控制 復(fù)習(xí)題問答:1. 現(xiàn)需對下列材料進行微生物數(shù)量測定,請指出最好的方法及一種不能采用的方法,并簡要說明其原因。1)發(fā)酵酸奶中的乳酸菌 最好的方法:傾注平板法。該方法是根據(jù)在稀釋情況下一個菌落是由一個活細胞繁殖形成的,優(yōu)點是能夠測出樣品中的活菌數(shù),且靈敏度高,廣泛應(yīng)用于

6、生物、醫(yī)藥制品的鑒定及食品、水質(zhì)的衛(wèi)生測定。不能采用的方法:比濁法。酸奶自身不透明,難比色 2)搖瓶培養(yǎng)中的放線菌 最好的方法:比濁法。培養(yǎng)液中,因為放線菌細胞對光有消散作用而呈渾濁,細胞數(shù)目越多,對光的消散作用越強,渾濁度就越高,故而可用吸光度表示。不能采用的方法:顯微鏡直接計數(shù)法,因為其在顯微鏡下呈絲狀不分散,難以測定。3)酵母蛋白飼料中的酵母菌 最好的方法:涂布計數(shù)法。將待測樣品適當稀釋,其中的酵母菌充分分散成單個細胞,取一定稀釋液加到平板上,經(jīng)過培養(yǎng),由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落代表原樣品中的一個單細胞,統(tǒng)計菌落數(shù),根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的

7、含菌數(shù)。不能采用的方法:微孔濾膜法,因為此方法一般用于菌數(shù)很低的樣品,對于菌數(shù)多的樣品不適用。4)紙巾中的細菌總數(shù)最好的方法:平板菌落計數(shù)法,取一定稀釋液加到平板上,經(jīng)過培養(yǎng),由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落代表原樣品中的一個單細胞,統(tǒng)計菌落數(shù),根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。不能采用的方法:微孔濾膜法,因為取樣時將紙巾溶解后,通過濾膜時會有紙碎殘留,對計數(shù)結(jié)果造成干擾。5)碳酸飲料中的細菌和霉菌總數(shù)最好的方法:微孔濾膜法,因為被檢測樣品為液體,菌數(shù)較低時,可直接通過膜過濾器,然后將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),對形成的菌落進行統(tǒng)計,方便快捷。不能采用

8、的方法:顯微計數(shù)法,因為細菌含量較低,采用這種方法易造成較大誤差。2.畫出一條典型細菌生長曲線,簡述其制作要點及各時期菌體主要的個體和群體特征。制作要點:細菌生長先后經(jīng)歷了延滯期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期四個階段,因此生長曲線中,細菌數(shù)量先保持不變(甚至下降),然后對數(shù)上升,到一定值后,保持平穩(wěn),在末端有下降趨勢時期群體體征個體體征延滯期(分裂遲緩、代謝活躍。原因:適應(yīng)新的環(huán)境條件,合成新的酶,積累必要的中間產(chǎn)物)活菌數(shù)沒有增加甚至略有減少,生長速率=0(曲線平行于橫軸)細胞形態(tài)變大或增長;合成代謝活躍(核糖體、酶類、ATP合成加快);對外界不良反應(yīng)敏感對數(shù)期曲線與時間呈直線關(guān)系。細胞數(shù)目以幾何

9、級數(shù)增加,生長速率最大,且恒定。酶系活躍,代謝旺盛;細胞進行平衡生長,菌體內(nèi)各種成分最為均勻。穩(wěn)定期(原因:營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;營養(yǎng)物的比例失調(diào),如碳氧比不合適;有害代謝廢物的積累,如酸、醇、毒素等)活菌數(shù)保持恒定,總菌數(shù)達到最大值。細胞轉(zhuǎn)向衰老,生長不平衡次生代謝產(chǎn)物如抗生素、生物堿、色素逐漸積累。衰亡期(原因:生長條件的進一步惡化,使細胞內(nèi)的分解代謝大大超過合成代謝,繼而導(dǎo)致菌體的死亡)細胞的死亡率不斷增加,群體中活的細胞數(shù)目急劇下降。細胞內(nèi)顆粒更明顯,細胞出現(xiàn)多形態(tài)、畸形或衰退形,芽孢釋放;細胞裂解或自溶,釋放出一些代謝產(chǎn)物3. 如果要利用某一細菌發(fā)酵生產(chǎn)抗生素,應(yīng)設(shè)法延長?

10、 期?應(yīng)在哪一時期收獲?為什么?在大規(guī)模分批發(fā)酵生產(chǎn)時,有哪些措施可縮短生產(chǎn)周期,增加生產(chǎn)效率?應(yīng)設(shè)法延長延長期,在延長期收獲,在衰老期,細胞裂解或自溶,釋放對人類有用的抗生素等次生代謝產(chǎn)物。提高生產(chǎn)效率方法:選擇繁殖速度快的菌種、用對數(shù)期的健壯菌種接種、加大接種量;在穩(wěn)定器補充營養(yǎng)物質(zhì),調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件(pH、溶氧量等),移去代謝產(chǎn)物。4.簡述微生物在溫度三基點的生長特性及其原因。基點名稱生長特性原因最低生長溫度生長溫度的下限,低于此溫度,微生物停止生長溫度太低,可使原生質(zhì)膜處于凝固狀態(tài),不能正常地進行營養(yǎng)物質(zhì)的運輸或形成質(zhì)子梯度,因而生長不能進行。最適生長溫度此時微生物的生長速度最大酶的溫度最

11、適,反應(yīng)速率達最高生長溫度生長溫度的上限,高于此溫度,停止生長溫度過高,蛋白質(zhì)、核酸和細胞其他成分就會發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變性作用,細胞膜熱裂解崩潰5.簡述嗜酸、堿微生物的耐酸、堿機理;有機酸殺菌機理。嗜酸微生物機理:細胞本身具有維持胞內(nèi)pH接近中性的能力,在酸性環(huán)境下,細胞可以阻止H+進入胞內(nèi),不斷將胞內(nèi)H+排出胞外。嗜堿微生物機理:細胞本身可以阻止Na+進入胞內(nèi)并將其排出胞外,以維持胞內(nèi)接近中性pH。有機酸殺菌機理:并不是直接由于H+或OH-濃度引起的,而是由于在這樣pH的條件下造成的非解離狀態(tài)的弱酸或弱堿水平的增加造成的,因為非解離狀態(tài)的弱酸或弱堿更容易穿過細胞膜進入胞內(nèi),因而比解離形式的弱酸

12、或弱堿生理活性更強,毒性更大。如水楊酸在中性或堿性環(huán)境中可以電離,在酸性時則電離被抑制,但酸性環(huán)境中殺菌力是中性時的100倍。乳酸桿菌和一些產(chǎn)生有機酸的微生物,當培養(yǎng)基質(zhì)在發(fā)酵過程中積累乳酸和丙酮酸等有機酸時,也就抑制了自身的生長,說明不是H+而是酸本身抑制了生長。6.簡述專性好氧菌必須、且能在高氧環(huán)境中生長的原因。列舉3種以上提高液體培養(yǎng)時專性好氧菌生長的措施。原因:(相比于以除氧以外的物質(zhì)作為最終電子受體)氧作為最終電子受體,必須在有分子氧的條件下才能生長,氧分壓越高,生長速度越快。(相比于缺乏這兩種酶的微生物)而對在氧還原成水的過程中,形成的有毒中間產(chǎn)物如過氧化氫、超氧陰離子和羥自由基等

13、,專性好氧菌含有超氧化物歧化酶和過氧化物歧化酶。促進生長的措施:固體培養(yǎng)方法:試管鞋面(加棉塞)、平板培養(yǎng)液體培養(yǎng):淺層培養(yǎng)、利用搖床震蕩培養(yǎng)(加棉塞或透氣膜)、發(fā)酵罐:電機攪拌7.簡述專性厭氧菌不需氧、且不能在在有氧環(huán)境中生長的原因。(相比于氧作為最終電子受體)這類菌以除氧以外的物質(zhì)作為最終電子受體,必須在無分子氧的條件下才能生長,。(相比于含有這兩種酶的微生物)而對在氧還原成水的過程中,形成的有毒中間產(chǎn)物如過氧化氫、超氧陰離子和羥自由基等,專性厭氧菌缺乏部分或全部超氧化物歧化酶和過氧化物歧化酶,因而死于O2-和H2O2的毒害作用。8.在分批培養(yǎng)中,營養(yǎng)物質(zhì)的濃度是如何影響微生物的生長?什么

14、叫限制性營養(yǎng)因子?碳、氮等營養(yǎng)物質(zhì)被耗盡時,將產(chǎn)生底物抑制某種營養(yǎng)物質(zhì)被耗盡時,即使其他營養(yǎng)物質(zhì)過量,菌體也停止生長。限制性營養(yǎng)因子濃度影響菌體生長速度和細胞產(chǎn)率這種影響也反應(yīng)在微生物的細胞生物量上,在分批培養(yǎng)中,當?shù)孜锢盟俾蔬_到零時,微生物的生長也恰好達到穩(wěn)定期,此時,底物轉(zhuǎn)化為細胞的產(chǎn)率已經(jīng)最大。某種營養(yǎng)物質(zhì)被耗盡時,即使其他營養(yǎng)物質(zhì)過量,菌體也停止生長。這種首先被耗盡的物質(zhì)(可以是碳、氮、無機鹽、生長因子等)稱為限制性營養(yǎng)因子。簡述磺胺類物質(zhì)、青霉素和鏈霉素的殺菌機理。簡述生長因子類似物和抗生素的異同?;前奉愇镔|(zhì)殺菌機理:很多細菌不能利用外界提供的葉酸,需要利用對氨基苯甲酸合成生長所需

15、的葉酸。對氨基苯甲酸可由細菌自身合成,也可以從生長介質(zhì)中獲得。而磺胺的存在則可與對氨基苯甲酸競爭性地域二氫葉酸合成酶結(jié)合,阻止葉酸的合成,因而可抑制細菌的生長。人類因為沒有二氫葉酸合成酶等,不能利用外界提供的對氨基苯甲酸合成葉酸,只能從飲食中獲得葉酸,因而對磺胺類藥物不敏感。同理,凡無二氫葉酸還原酶,需要從外界獲得四氫葉酸作為生長因子的細菌,也不受磺胺類藥物的影響。青霉素殺菌機理:青霉素含-內(nèi)酰胺環(huán),可特異性地結(jié)合在細菌細胞壁肽聚糖上,抑制細胞壁的合成,因而只作用于細菌特別是肽聚糖成分豐富的G+菌。鏈霉素殺菌機理:鏈霉素是一種氨基糖苷類藥,經(jīng)主動轉(zhuǎn)運通過細菌細胞膜,與細菌核糖體30S亞單位的特

16、殊受體蛋白結(jié)合,干擾信息核糖核酸與30S亞單位間起始復(fù)合物的形成,抑制蛋白合成。使DNA發(fā)生錯讀,導(dǎo)致無功能蛋白質(zhì)的合成;使多聚核糖體分裂而失去合成蛋白的功能,使大量氨基糖苷類進入菌體,細菌細胞膜斷裂,細胞死亡。生長因子類似物和抗生素的異同:化學(xué)治療劑相同點不同點生長因子類似物特異性地作用于某些微生物并具有選擇性毒性,與非特異性的化學(xué)藥劑相比對人體幾乎每有什么毒性或毒性很少,可治療微生物引起的疾病。來源:人工合成作用機理:作為競爭性抑制劑,阻止微生物對生長因子的利用??股貋碓矗何⑸锂a(chǎn)生作用機理:抑制細胞壁合成破壞細胞膜的功能抑制蛋白質(zhì)的合成。判斷:血球計數(shù)板計數(shù)法因簡便快速,廣泛用于食品中

17、微生物數(shù)目的測定。錯。血球計數(shù)板計數(shù)法存在下列缺陷:小的細胞在顯微鏡下很難看到;菌液濃度不能低于106個/mL;不能用于菌絲體或呈鏈狀而不分散的微生物測定。而活菌計數(shù)方法(涂布平板法、倒平板法)的優(yōu)點是能夠測出樣品中的活菌數(shù),且靈敏度高,因而被廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥制品的檢定級食品、水質(zhì)的衛(wèi)生檢定。如果要獲得堿性蛋白酶,可以從嗜堿微生物細胞中提取。錯。嗜堿微生物能夠耐堿,主要是由于細胞本身具有維持胞內(nèi)pH接近中性的能力,在堿性環(huán)境下,可以阻止Na+進入胞內(nèi)并將其排出胞外,以維持胞內(nèi)接近中性pH。因此,胞內(nèi)的蛋白酶幾乎都是接近中性pH時發(fā)揮作用的。如果要獲得高溫蛋白酶,可以從嗜熱微生物細胞中提取。

18、對。因為其酶和蛋白在高溫時比中溫微生物更穩(wěn)定。食品如放入冰箱中,不會有微生物生長。錯。耐冷微生物的最低生長溫度為0-5放線菌與細菌同為原核微生物,其最適生長溫度及pH接近。錯。放線菌的細胞結(jié)構(gòu)和細胞壁化學(xué)組成與細菌相似,與細菌同屬原核生物,但它們最適生長溫度及pH沒有直接關(guān)系,如嗜熱脂肪芽孢桿菌,在65-75當培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度不斷增加時,菌體的生長速度也隨之不斷加快。錯。營養(yǎng)物角度:某種營養(yǎng)物質(zhì)被耗盡時,即使其他營養(yǎng)物質(zhì)過量,菌體也停止生長。限制性營養(yǎng)因子濃度影響菌體生長速度和細胞產(chǎn)率菌體角度:這與菌體的菌齡有關(guān),處于對數(shù)期的菌體生長速度最快。這種影響也反應(yīng)在微生物的細胞生物量上,在分批

19、培養(yǎng)中,當?shù)孜锢盟俾蔬_到零時,微生物的生長也恰好達到穩(wěn)定期,此時,底物轉(zhuǎn)化為細胞的產(chǎn)率已經(jīng)最大。其他角度:微生物代謝產(chǎn)生的廢物和毒素也不斷增加;培養(yǎng)基空間也是限制因素。因此,即使培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)的濃度不斷增加,菌體的生長速度也不一定不斷加快。微好氧菌之所以能在較低的氧濃度下生長,是因為能通過發(fā)酵作用產(chǎn)生能量。錯。微好氧菌能在分壓低于0.2標準大氣壓下也能夠良好生長,但其在代謝過程中,以分子氧為最終電子受體,進行有氧呼吸。耐氧菌之所以能在高氧濃度下生長,是因為能產(chǎn)生SOD.對。好氧生物因為有SOD,因此劇毒的超氧陰離子自由基(O2-)被歧化成毒性稍低的H2O2,在過氧化氫酶的作用下,H2O2再變

20、成無毒的H2O2;而厭氧生物因為沒有SOD和過氧化氫酶,因此劇毒超氧陰離子自由基不能清除,暴露在有氧環(huán)境死忙。無分支單細胞微生物與絲狀微生物的生長曲線特征基本相同.對。無分支單細胞微生物生長曲線分為遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期與衰亡期;而絲狀微生物的群體生長有著與單細胞微生物類似的規(guī)律,生長過程大致分為生長停滯期、迅速生長期和衰退期。因為穩(wěn)定期微生物細胞數(shù)目恒定,如果要測量某一細菌的大小,應(yīng)取穩(wěn)定期的菌體進行。錯。穩(wěn)定期細胞的特征是從生理上的年輕轉(zhuǎn)化為衰老,代謝活力鈍化,細胞含有較少的核糖體,RNA和蛋白質(zhì)合成緩慢,mRNA的水平低下,因此細胞的生長變得不平衡,細胞的形狀有的也發(fā)生改變。因不能維持細

21、胞壁的合成與修復(fù),細胞的染色特點也發(fā)生變化,如G+轉(zhuǎn)變?yōu)镚-。因此,要測量某一細菌大小,應(yīng)選擇在對數(shù)期,因為這時的細胞分裂速度最快,代時最短,代謝活動旺盛(拓展:但此時細胞的許多功能,如能量代謝和某些生物合成過程還在進行,某些代謝產(chǎn)物特別是次生代謝產(chǎn)物主要就是在穩(wěn)定期,特別是在對數(shù)期與穩(wěn)定期轉(zhuǎn)換階段所產(chǎn)生,這些產(chǎn)物包括抗生素和某些酶。)如果要利用某一細菌發(fā)酵生產(chǎn)氨基酸,應(yīng)設(shè)法延長穩(wěn)定期。錯。穩(wěn)定期細胞的特征是從生理上的年輕轉(zhuǎn)化為衰老,代謝活力鈍化,細胞含有較少的核糖體,RNA和蛋白質(zhì)合成緩慢,mRNA的水平低下,因此細胞的生長變得不平衡,細胞的形狀有的也發(fā)生改變。應(yīng)該設(shè)法延長對數(shù)期,因為這時的細胞分裂速度最快,代時最短,代謝活動旺盛,細胞內(nèi)核糖體等組分也像細胞數(shù)目一樣以同樣的對數(shù)生長速率增加,細胞合成核糖體以及蛋白質(zhì)最多。因?qū)?shù)生長期微生物生長最為活躍,如果要測定某一細菌對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化程度,應(yīng)在對數(shù)期進行。錯。應(yīng)選擇在遲緩期,遲緩期細胞的主要特征是代謝活躍、體積增大,從基質(zhì)中快速吸收各種營養(yǎng)物質(zhì),大量合成細胞分裂所需的酶類、ATP和其他細胞成分,為細胞分裂做準備。.因延遲期的菌體對不良環(huán)境敏感,食品應(yīng)盡量在此期進行消毒、滅菌處理。錯。對數(shù)期菌體對不良反應(yīng)敏感,生長速率變化很大,且這時各種生命活動旺盛,應(yīng)選在這期。酒精是常用的化學(xué)消毒劑,其濃度越高,其消毒效果越好。錯。高濃

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