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1、大腸癌患者外周血T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞檢測(cè)的臨床意義【摘要】目的:討論大腸癌患者外周血t淋巴細(xì)胞亞群和nk細(xì)胞的活性檢測(cè)的臨床意義。方法:采用流式細(xì)胞儀測(cè)定大腸癌患者外周血t淋巴細(xì)胞亞群和nk細(xì)胞的活性,以正常人作對(duì)照分析。結(jié)果:大腸患者外周血d3+、d4+、nk細(xì)胞數(shù)量及d4+/d8+比值較正常對(duì)照組均明顯下降(p0.05),而d8+細(xì)胞程度顯著升高。外周血t淋巴細(xì)胞亞群和nk細(xì)胞數(shù)量的改變與大腸癌臨床病理分期有關(guān),分期越晚,d3+、d4+及nk細(xì)胞數(shù)量d4+/d8+細(xì)胞比值越低,d8+細(xì)胞程度越高(p0.05)。結(jié)論:檢測(cè)t淋巴細(xì)胞亞群、nk細(xì)胞可用于大腸癌患者的免疫狀態(tài)監(jiān)測(cè)。【關(guān)鍵詞】大腸
2、腫瘤t淋巴細(xì)胞亞群流式細(xì)胞術(shù)資料與方法2022年1月2021年8月收治大腸癌患者42例,均經(jīng)病理確診。男27例,女15例;年齡3672歲,平均529.8歲,均經(jīng)病理學(xué)證實(shí)且不伴有自身免疫性疾玻病理組織學(xué)分型:腺癌20例,黏液癌12例,未分化癌10例。臨床分期:期14例,期16例,期12例。另選性別、年齡相匹配的30例安康志愿者作為正常對(duì)照組。所有受檢對(duì)象均無免疫系統(tǒng)疾病或使用過免疫抑制劑。檢測(cè)方法:取肝素抗凝的新穎外周血100l,參加上述單抗20l,混勻,室溫避光20分鐘染色;參加1.5l紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫避光放置10分鐘,破壞紅細(xì)胞;1500轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,棄上清;每管參加2l0.
3、1%疊氮鈉的磷酸鹽緩沖液混勻,1000r/俊逸離心5分鐘,棄上清;加pbs1l,混勻,2小時(shí)內(nèi)上機(jī)檢測(cè)。以fsh/ssh設(shè)定淋巴細(xì)胞門,igg/fit/igg2ape確定fl1和fl2的非特異性結(jié)合程度,同時(shí)調(diào)節(jié)fs、ss電壓,fs閾值,fl1、fl2%、fl2、fl1%熒光補(bǔ)償。每管獲取1萬個(gè)細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件,數(shù)據(jù)用xs表示,組間比較采用t檢驗(yàn),關(guān)聯(lián)分析用線性相關(guān)分析。結(jié)果42例大腸癌患者與正常對(duì)照組t細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果說明:大腸癌組d3+、d4+細(xì)胞百分比明顯低于正常對(duì)照組(p0.01),而d8+百分比兩組無明顯差異(p0.05),大腸癌組d4+/d8+與正常對(duì)
4、照組相比雖有下降趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。淋巴結(jié)陽性組d3+、d4+細(xì)胞又顯著低于淋巴結(jié)陰性組(p0.05)。d4+/d8+比值淋巴結(jié)陰性組與正常對(duì)照組無顯著差異,而淋巴結(jié)陽性組d4+/d8+比值與正常對(duì)照組及淋巴結(jié)陰性組均有非常顯著差異(p0.01)。d8+細(xì)胞變化那么表現(xiàn)特殊,即淋巴結(jié)陰性組d8+細(xì)胞明顯低于正常對(duì)照組及淋巴結(jié)陽性組(p0.05),淋巴結(jié)陽性組d8+細(xì)胞較正常對(duì)照組有增高趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)意義(p0.05)。討論大腸癌是常見的消化道惡性腫瘤,發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。腫瘤的發(fā)生開展與腫瘤宿主的免疫狀態(tài)親密相關(guān),細(xì)胞免疫在機(jī)體的抗腫瘤免疫中占主導(dǎo)地位。機(jī)體的免疫系統(tǒng)是在生物進(jìn)化
5、中逐步建立起來的,其存在與功能的正常建立在機(jī)體穩(wěn)定性的根底上。在正常情況下,機(jī)體的自身免疫功能可以防御病原微生物的侵襲,消除體內(nèi)損傷或變老的自身細(xì)胞,處理體內(nèi)出現(xiàn)的少量異常細(xì)胞。當(dāng)人體的免疫監(jiān)視功能失調(diào)時(shí),??蓪?dǎo)致腫瘤的發(fā)生、開展。腫瘤的發(fā)生、開展與人體的免疫功能親密相關(guān),特別與t淋巴細(xì)胞功能的關(guān)系更親密1。t細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用主要由d4+、d8+完成,d4+協(xié)調(diào)b細(xì)胞分化產(chǎn)生抗體,d8+那么抑制抗體的合成、分泌及t細(xì)胞的增殖,兩者的穩(wěn)態(tài)維持著機(jī)體正常的免疫應(yīng)答。本研究結(jié)果顯示,大腸癌患者外周血d3+細(xì)胞、d4+細(xì)胞、d4+/d8+細(xì)胞比值均明顯低于正常人,而d8+細(xì)胞那么明顯高于正常人,與文
6、獻(xiàn)報(bào)道一致2,說明大腸癌患者免疫功能較正常人明顯低下,其機(jī)制可能與腫瘤在發(fā)生、開展過程中分泌大量的免疫抑制因子(tdsf)有關(guān)3,tdsf可廣泛抑制殺傷細(xì)胞的活性,同時(shí)在腫瘤抗原的刺激下,脾細(xì)胞免疫抑制細(xì)胞前體被激活,分泌免疫抑制因子,從而導(dǎo)致大腸癌患者免疫功能低下。由于這種免疫抑制是腫瘤源性的,因此表現(xiàn)為患者的免疫狀態(tài)與病情呈顯著的負(fù)相關(guān),在本研究中,隨著大腸癌患者病情的開展,由期至期機(jī)體外周血細(xì)胞免疫功能逐漸下降,期與、期患者之間有顯著性差異,提示大腸癌患者免疫狀態(tài)與tn分期呈負(fù)相關(guān),患者的病期越晚,免疫狀態(tài)越差,反之,患者的免疫功能越低下,提示病期越晚、預(yù)后越差。故患者的免疫狀態(tài)可間接提示患者預(yù)后。大腸癌患者外周血d3+、d4+和d8+細(xì)胞隨腫瘤不同階段出現(xiàn)特征性改變,說明大腸癌患者細(xì)胞免疫功能受到抑制。同時(shí)也反映了機(jī)體抗腫瘤作用。d4+/d8+比值隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否而出現(xiàn)相應(yīng)的改變,這一定量檢測(cè)的結(jié)果可以對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為判斷患者預(yù)后指標(biāo)的評(píng)估起輔助作用。同時(shí)提示,腫瘤是一種全身性疾病,在腫瘤根治性切除的根底上,應(yīng)進(jìn)展包括進(jìn)步機(jī)體免疫的綜合治療。【參考文獻(xiàn)】3seddikin,santner-nananb,artinsnj,etal.expressinf
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