Bayer1650全自動生化分析儀檢測血清總膽汁酸的試劑交叉污染及消

1、Bayer1650全自動生化分析儀檢測血清總膽汁酸的試劑穿插污染及消bayer1650全自動生化分析儀檢測血清總膽汁酸的試劑穿插污染及消除措施全自動生化分析儀具有微量、快速、多項、準確等特點，已廣泛應(yīng)用于臨床生化檢驗中。檢驗的工作效率得到了大大進步。但同時出現(xiàn)的穿插污染問題卻給工作帶來了不少費事，特別是隨著儀器使用時間的累加，儀器狀況的下降，穿插污染的程度會日益加劇。假如不能及時排除穿插污染，甚至有可能影響病人的檢測結(jié)果，造成誤診。我們實際工作中發(fā)現(xiàn)，在批量檢測中經(jīng)常會出現(xiàn)一些總膽汁酸t(yī)ba的異常高值，而單獨復(fù)查后又正常。為此，我們調(diào)整了工程的檢測順序1，又設(shè)置了試劑針特殊清洗程序2，但仍不能

2、解決該問題。據(jù)文獻報道3，試劑的穿插污染以比色杯污染更為嚴重，當(dāng)比色杯清洗不完全或者黏附性增加時，比色杯中殘留物會對在這個比色杯中進展的下一個檢測工程造成影響。為了找到確切的原因，我們進展了一系列相關(guān)的實驗。1材料與方法1.1儀器與試劑儀器請為bayer1650全自動生化分析儀。試劑：總膽汁酸采用循環(huán)酶法測定，高密度脂蛋白膽固醇(hdl-)、低密度脂蛋白膽固醇(ldl-)采用直接法測定，試劑均購自上海執(zhí)誠生物技術(shù)。三酰甘油(tg)、總膽固醇(t)采用酶法測定，試劑均購自北京康大泰科醫(yī)學(xué)科技。膽堿酯酶采用丁酰硫代膽堿法測定，試劑購自寧波博泰生物技術(shù)。混合血清采用朗道公司的質(zhì)控血清。1.2方法1.

3、3統(tǒng)計學(xué)處理采用spss16.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進展處理，測定組與對照組之間比擬采用配對t檢驗，以p0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1疑似穿插污染工程試劑中tba的測定值在本科室使用的35種常規(guī)生化試劑中tba測定值前5位的是tg、t、hdl-、ldl-和he，其中he試劑中最低，見表1表15種試劑中tba的測定值ll)試劑tg單t單hdl-ldl-he2.25種試劑對tba檢測的穿插污染情況通過分析tg、t、hdl-、ldl-、he5個檢測組的tba的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，tg、t、hdl-、ldl-4個工程對tba的測定有顯著干擾p0.05，其中干擾最大的是tg，偏倚為42.6ll，相對偏倚率高達63

4、.68%，s=43.6，其次是t、hdl-和ldl-，而he對tba的檢測無影響，見表2。表2tg、t、hdl-、ldl-和he對tba檢測的穿插污染情況ll)組別例數(shù)tgthdl-ldl-he注：與對照組比擬，*p0.05；與對照組比擬，#p0.052.3設(shè)置特殊清洗設(shè)置比色杯特殊清洗程序后，各組的穿插污染能被有效消除，與對照組比擬差異無統(tǒng)計學(xué)意義p0.05。見表3。表3設(shè)置比色杯特殊清洗程序后穿插污染污染情況ll)組別例數(shù)tgthdl-ldl-注：與對照組比擬，#p0.053討論tba是臨床實驗室的常規(guī)檢測工程，對肝功能損害，膽管阻塞及肝內(nèi)膽汁淤積的診斷具有重要的價值。鑒于總膽汁酸在臨床應(yīng)

5、用方面的重要作用，須重視試劑間的穿插污染對總膽汁酸測定的影響，并采取措施盡可能防止穿插污染的發(fā)生。試穿插污染問題較為普通，相對隱匿且消除費事，主要包括：試劑針污染、攪拌棒污染和比色杯污染。實際工作中通常以比色杯污染最為突出。由表2可知，tgthdl-ldl-4個工程對tba的檢測存在著明顯的正干擾，其中以tg的干擾最大，偏倚率高達63.68%，且重復(fù)性差(s=43.6)。說明tg試劑中的某些成分可能比另外幾個工程更難清洗，反響杯穿插污染程度參差不齊，有的反響杯未能徹底洗凈造成了較大的污染。試劑間的穿插污染原因是多方面的，主要有：試劑成分中含有某種被污染的工程；試劑中含有下一個測試所要測定底物或

6、含有的某種試劑成分，與下一反響所測定的底物有作用，因此直接影響下一反響測定的結(jié)果；該試劑所引導(dǎo)的反響給下一個工程反響進程帶來了間接干擾4。經(jīng)與試劑研發(fā)人員共同討論，發(fā)現(xiàn)是試劑中膽酸鹽的成份干擾了tba的測定，這與有些文獻報道相一致5,6。膽酸鹽是試劑中加速終點反響的輔助成分，往往很多試劑說明書中并沒有標明。它易沉積在反響杯的內(nèi)壁，很可能具有膽汁酸的反響特性，易與tba試劑反響，從而干擾了tba的檢測。通過實驗發(fā)現(xiàn)，常規(guī)沖洗不能完全消除穿插污染的現(xiàn)象，設(shè)置比色杯特殊清洗程序后，消除了試劑間的穿插污染現(xiàn)象。綜上所述，當(dāng)平時工作中遇到試劑穿插污染現(xiàn)象時，假如調(diào)整工程的檢測順序和設(shè)置試劑針特殊清洗程序仍然