醫(yī)療器械無菌檢查培訓(xùn)課件

1、醫(yī)療器械無菌檢查醫(yī)療器械無菌檢查2 主要內(nèi)容無菌定義及無菌檢查定義 無菌檢驗依據(jù)試驗主要設(shè)備實驗環(huán)境條件及人員要求培養(yǎng)基種類及配制要求培養(yǎng)基適用性檢查試驗菌種及菌液制備無菌檢查方法驗證供試品無菌檢查及結(jié)果判斷 2醫(yī)療器械無菌檢查2 主要內(nèi)容2醫(yī)療器械無菌檢查3 無菌定義:無活微生物的狀態(tài)。無菌檢查定義 ： 無菌檢查法系用于檢查藥典要求無菌的藥品、原料、輔料及其他品種是否無菌的一種方法。若供試品符合無菌檢查法的規(guī)定，僅表明了供試品在該檢驗條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。（1）無菌定義3醫(yī)療器械無菌檢查3 無菌定義:無活微生物的狀態(tài)。（1）無菌定義3醫(yī)療器械無菌4 （2）無菌檢驗依據(jù)本規(guī)范選用于中國藥典2

2、010年版二部附錄XI H無菌檢查法。GB/T 14233.2-2005 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法 ，第二部分：生物試驗方法中規(guī)定的無菌試驗方法。4醫(yī)療器械無菌檢查4 （2）無菌檢驗依據(jù)4醫(yī)療器械無菌檢查5 （3）試驗主要設(shè)備超凈工作臺細菌培養(yǎng)箱霉菌培養(yǎng)箱立式高壓蒸汽滅菌器臺式高壓蒸汽滅菌器顯微鏡生物安全柜電熱恒溫干燥箱集菌儀5醫(yī)療器械無菌檢查5 （3）試驗主要設(shè)備超凈工作臺5醫(yī)療器械無菌檢查6試驗儀器（1） - 超凈工作臺6醫(yī)療器械無菌檢查6試驗儀器（1） - 超凈工作臺6醫(yī)療器械無菌檢查7試驗設(shè)備（2）-隔水式恒溫培養(yǎng)箱7醫(yī)療器械無菌檢查7試驗設(shè)備（2）-隔水式恒溫培養(yǎng)箱7醫(yī)療器械

3、無菌檢查8試驗設(shè)備（3）-霉菌培養(yǎng)箱8醫(yī)療器械無菌檢查8試驗設(shè)備（3）-霉菌培養(yǎng)箱8醫(yī)療器械無菌檢查9試驗設(shè)備（4）-立式高壓蒸汽滅菌器9醫(yī)療器械無菌檢查9試驗設(shè)備（4）-立式高壓蒸汽滅菌器9醫(yī)療器械無菌檢查10試驗設(shè)備（5）-臺式蒸汽滅菌器10醫(yī)療器械無菌檢查10試驗設(shè)備（5）-臺式蒸汽滅菌器10醫(yī)療器械無菌檢查11試驗設(shè)備（6）- 顯 微 鏡11醫(yī)療器械無菌檢查11試驗設(shè)備（6）- 顯 微 鏡11醫(yī)療器械無菌檢查12試驗設(shè)備（7）-生物安全柜12醫(yī)療器械無菌檢查12試驗設(shè)備（7）-生物安全柜12醫(yī)療器械無菌檢查13試驗設(shè)備（8）Equinox 全自動無菌檢驗系統(tǒng)13醫(yī)療器械無菌檢查13試驗

4、設(shè)備（8）Equinox 全自動無菌檢驗系統(tǒng)13醫(yī)療14（4）實驗環(huán)境條件要求： 無菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10 000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進行，其全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進行潔凈度驗證。隔離系統(tǒng)按相關(guān)的要求進行驗證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無菌檢查的要求。14醫(yī)療器械無菌檢查14（4）實驗環(huán)境條件要求： 無菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔15 （4）實驗人員要求： 菌檢人員必須具備微生物專業(yè)知識，并 經(jīng)過無菌技術(shù)培訓(xùn)。 15醫(yī)療器械無菌檢查15 （4）實驗

5、人員要求： 15醫(yī)療器械無菌檢查16（5）培養(yǎng)基種類及要求 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基16醫(yī)療器械無菌檢查16（5）培養(yǎng)基種類及要求 16醫(yī)療器械無菌檢查2012年12月1717（5）培養(yǎng)基種類及要求 無菌檢查：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基17醫(yī)療器械無菌檢查2012年12月1717（5）培養(yǎng)基種類及要求 無菌檢查：硫2012年12月1818（5）培養(yǎng)基種類及要求 無菌檢查 ：改良馬丁培養(yǎng)基：18醫(yī)療器械無菌檢查2012年12月1818（5）培養(yǎng)基種類及要求 無菌檢查19（5）培養(yǎng)基種類及要求 保存時間： 制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在：2 25、避光 非密閉容器中：一般在三周內(nèi)使用 密閉容器中：一般

6、可在一年內(nèi)使用19醫(yī)療器械無菌檢查19（5）培養(yǎng)基種類及要求 保存時間：19醫(yī)療器械無菌20（5）培養(yǎng)基種類及要求 一般采用商品脫水培養(yǎng)基，臨用時按照使用說明書進行配制，配制時須迅速，以免吸潮影響稱量的準(zhǔn)確性，同時需注意滅菌后培養(yǎng)基的pH值應(yīng)符合規(guī)定，否則必須校正后滅菌使用。新鮮配制的培養(yǎng)基，應(yīng)符合中國藥典規(guī)定的配方，對培養(yǎng)基進行挑選。20醫(yī)療器械無菌檢查20（5）培養(yǎng)基種類及要求 一般采用商品脫水培養(yǎng)基，臨用時按21（5）培養(yǎng)基種類及要求 硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基：屬于流體培養(yǎng)基，即在液體培養(yǎng)基中加入0.05%0.07%的瓊脂，增加了培養(yǎng)基的粘度，降低培養(yǎng)基中的含氧量，使培養(yǎng)基在一段時間內(nèi)保持厭氧的

7、條件，有利于厭氧菌的生長。硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基分裝在適宜的容器中，其粉紅色的氧化層適合需氣菌的生長，在供試品接種前，培養(yǎng)基的氧化層的顏色不得超過培養(yǎng)基深度的15，調(diào)PH值滅菌后為7.10.2，分裝，滅菌。硫乙醇酸鹽培養(yǎng)管置：3035培養(yǎng)14天。21醫(yī)療器械無菌檢查21（5）培養(yǎng)基種類及要求 硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基：屬于流體培養(yǎng)基22（5）培養(yǎng)基種類及要求 改良馬丁培養(yǎng)基：取培養(yǎng)基成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)PH值約為6.8，煮沸，搖勻，調(diào)PH值滅菌后為6.40.2，分裝，滅菌。 改良馬丁培養(yǎng)基：置2328培養(yǎng)14天。22醫(yī)療器械無菌檢查22（5）培養(yǎng)基種類及要求 22醫(yī)療器械無菌檢查23（5）培養(yǎng)基種類及要

8、求 培養(yǎng)基裝量：對于采用直接接種法檢查的液體樣品，培養(yǎng)基的裝量與供試品裝量相關(guān)，應(yīng)根據(jù)供試品接種量確定培養(yǎng)基的裝量，使供試品接種體積不大于培養(yǎng)基的10%。對于采用直接接種法檢查的固體樣品，培養(yǎng)基的裝量均為100ml；一次性醫(yī)用材料及醫(yī)療器具，若醫(yī)療器具體積過大，培養(yǎng)基的裝量可2000ml以上，已將其完全浸沒為準(zhǔn)。對于采用薄膜過濾法檢查的樣品，封閉式薄膜濾器的培養(yǎng)基裝量為100ml 。23醫(yī)療器械無菌檢查23（5）培養(yǎng)基種類及要求 培養(yǎng)基裝量：23醫(yī)療器械無菌檢24 （6）培養(yǎng)基適用性檢查新購的培養(yǎng)基或自配的新鮮培養(yǎng)基要求：無菌性檢查：每批培養(yǎng)基隨機取不少于5支（瓶），培養(yǎng)14天，應(yīng)無菌生長。靈

9、敏度檢查：其質(zhì)量均應(yīng)符合靈敏度檢查要求。用于培養(yǎng)基靈敏度檢查的菌種如下：菌種的傳代的次數(shù)不得超過5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為0代）。24醫(yī)療器械無菌檢查24 （6）培養(yǎng)基適用性檢查新購的培養(yǎng)基或自配的新鮮培養(yǎng)基25（6）培養(yǎng)基適用性檢查菌種：試驗用菌株及菌液制備：金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003銅綠色假單胞菌CMCC(B)10104 大腸埃希菌CMCC(B)44102枯草桿菌CMCC(B)63501 生孢梭菌CMCC(B)64941 白色念珠菌CMCC(F)98001 黑曲霉CMCC(F)98003 菌種的要求： 不得超過5代。采用適宜的方法保存；并以保證試驗菌株的生物學(xué)特性

10、。 25醫(yī)療器械無菌檢查25（6）培養(yǎng)基適用性檢查25醫(yī)療器械無菌檢查26（6）培養(yǎng)基適用性檢查 菌液制備 一般當(dāng)日使用。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌，少許接種至營養(yǎng)肉湯基中，生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物少許接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)18 24h；白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種改良馬丁培養(yǎng)基中， 2328培養(yǎng)24 48h，上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成含菌量小于100cfu/ml菌懸液；黑曲霉 菌斜面的新鮮培養(yǎng)物接種至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上， 2328培養(yǎng)5 7天，使大量的孢子成熟。加入3 5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢

11、子洗脫。然后用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管中，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成小于100cfu/ml 的孢子懸液。（見表）26醫(yī)療器械無菌檢查26（6）培養(yǎng)基適用性檢查 菌液制備 26醫(yī)療器械無菌檢27 （6）培養(yǎng)基適用性檢查 中國藥典2010年無菌檢查驗證試驗中使用7株菌見下表菌 種 接種培養(yǎng)基 培養(yǎng)溫度 培養(yǎng)時間金黃色葡萄球菌 營養(yǎng)肉湯或者普通斜面 3035 1824h銅綠假單孢菌 枯草芽孢桿菌 大腸埃希菌 （無）生孢梭菌硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基白色念珠菌 改良馬丁或者普通斜面 2328 2448h黑曲霉 改良馬丁斜面 232857d 27醫(yī)療器械無菌檢查2

12、7菌 種 接種培養(yǎng)基 培養(yǎng)溫度 培養(yǎng)時間金黃色葡萄球菌28（6）培養(yǎng)基適用性檢查 培養(yǎng)基接種 金黃色葡萄球菌2支 銅綠假單胞菌2支硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 枯草芽孢桿菌2支 生孢梭菌2支 9支培養(yǎng)基裝量12ml，空白對照1支。 分別接種小于100cfu/ml金葡、銅綠、枯草、生孢各2管，另1支不接種做空白對照，培養(yǎng)3天，逐日觀察結(jié)果。28醫(yī)療器械無菌檢查28（6）培養(yǎng)基適用性檢查28醫(yī)療器械無菌檢查29（5）培養(yǎng)基適用性檢查 培養(yǎng)基接種 白色念株菌2支改良馬丁培養(yǎng) 黑曲霉2支 （5支培養(yǎng)基裝量9ml，其中1支做空白對照） 分別接種小于100cfu/ml白色、黑曲各兩支，另1支不接種做空白對照。培養(yǎng)

13、5天，逐日觀察結(jié)果。29醫(yī)療器械無菌檢查29（5）培養(yǎng)基適用性檢查 培養(yǎng)基接種29醫(yī)療器械無菌30（6）培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果判斷 空白對照管應(yīng)無菌生長，若加菌的培養(yǎng)管均生長良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定。30醫(yī)療器械無菌檢查30（6）培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果判斷 30醫(yī)療器械無菌檢31（7）試驗(驗證)菌種及菌液制備菌種：試驗用菌株及菌液制備：金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003大腸埃希菌CMCC(B)44102枯草桿菌CMCC(B)63501 生孢梭菌CMCC(B)64941 白色念珠菌CMCC(F)98001 黑曲霉CMCC(F)98003 31醫(yī)療器械無菌檢查31（7）試驗(驗證)菌

14、種及菌液制備菌種：試驗用菌株及菌液制32（6）試驗菌種及菌液制備10倍梯度稀釋選擇適宜的3個稀釋級別要求100cfu/ml32醫(yī)療器械無菌檢查32（6）試驗菌種及菌液制備10倍梯度稀釋32醫(yī)療器械無菌檢33（7）無菌檢查方法驗證驗證準(zhǔn)備條件： 稀釋液、沖洗液及其制備方法 0.1蛋白胨水溶液 pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液 制備的菌液，應(yīng)當(dāng)日使用。33醫(yī)療器械無菌檢查33（7）無菌檢查方法驗證驗證準(zhǔn)備條件： 33醫(yī)療器械無菌檢34（7）無菌檢查方法驗證 目的:證明所采用的方法適合于該供試品的無菌檢查確認供試品在該實驗條件下無抑菌活性或其抑菌活性可以忽略不計。確保在實際檢驗條件下，該供試品的無菌檢查

15、法的準(zhǔn)確性、有效性和重現(xiàn)性。 驗證時，按“供試品的無菌檢查”的規(guī)定及下列要求進行操作。對每一試驗菌應(yīng)逐一進行驗證。34醫(yī)療器械無菌檢查34（7）無菌檢查方法驗證 目的:34醫(yī)療器械無菌檢35（7）無菌檢查方法驗證菌種及菌液制備 ：除大腸埃希菌（Escherichia coli）CMCC(B) 4 4102外，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉同培養(yǎng)基靈敏度檢查。大腸埃希菌的菌液制備同金黃色葡萄球菌。 方法驗證試驗與靈敏度檢驗所有菌種區(qū)別：大腸埃希菌代替銅綠假單胞菌。35醫(yī)療器械無菌檢查35（7）無菌檢查方法驗證菌種及菌液制備 ：除大腸埃希菌（E36（7）無菌檢查方法驗證

16、菌液制備： 金黃色葡萄球菌（大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌) 接種營養(yǎng)肉湯（或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）生孢梭菌接種硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 3035培養(yǎng)1824小時；白色念珠菌接種改良馬丁培養(yǎng)基（或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基）2328培養(yǎng)2448小時上述培養(yǎng)物 用0.9無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)小于l00cfu(菌落形成單位)的菌懸液。 黑曲霉接種改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，2328培養(yǎng)57天，加入35ml 0.9無菌氯化鈉溶液，將孢子洗 吸出孢子懸液(用管口帶有薄的無菌棉花或紗布能過濾菌絲的無菌毛細吸管)至無菌試管內(nèi)用0.9無菌氯化鈉溶液制成每lml含孢子數(shù)小于l00cfu的孢子懸液。36醫(yī)療器械無菌檢查36（7

17、）無菌檢查方法驗證菌液制備： 36醫(yī)療器械無菌檢查37（7）無菌檢查方法驗證薄膜過濾法將規(guī)定量的供試品按薄膜過濾法過濾，沖洗，在最后一次的沖洗液中加入試驗菌（小于100cfu），過濾。取出濾膜接種至相應(yīng)的培養(yǎng)基中，或?qū)⑴囵B(yǎng)基加至濾筒內(nèi)。另取一濾桶，不過濾供試品，其它操作同上，作為對照.將含培養(yǎng)基的容器按規(guī)定溫度培養(yǎng)35天。 各試驗菌及相應(yīng)的培養(yǎng)基逐一進行驗證。（如下圖示）37醫(yī)療器械無菌檢查37（7）無菌檢查方法驗證薄膜過濾法37醫(yī)療器械無菌檢查38（7）無菌檢查方法驗證薄膜過濾法 規(guī)定量的供試品 過濾 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基 濾膜 接種 改良馬丁培養(yǎng)基沖洗 每種菌均作1管不含供試品管作為對照加

18、入試驗菌過濾38醫(yī)療器械無菌檢查38（7）無菌檢查方法驗證薄膜過濾法 38醫(yī)療器械無菌檢39（7）無菌檢查方法驗證 直接接種法 取符合直接接種法培養(yǎng)基用量要求的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8管，分別接人小于l00cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2管；取符合直接接種法培養(yǎng)基用量要求的改良馬丁培養(yǎng)基4管，分別接入小于l00cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2管。其中1管接人規(guī)定量的供試品，另1管作為對照，按規(guī)定的溫度培養(yǎng)35天。（如下表）39醫(yī)療器械無菌檢查39（7）無菌檢查方法驗證 直接接種法 39醫(yī)療器械無菌檢查40（7）無菌檢查方法驗證-直接接種法方法驗證所用菌種（藥典201

19、0版規(guī)定）金黃色葡萄球菌分別接種各菌種新鮮培養(yǎng)物至相應(yīng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，將培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成菌懸液，濃度小100cfu/mL硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8支：分別接種小于100cfu的金葡、大腸、枯草、生孢各2支，其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對照，培養(yǎng)3天。大腸埃希菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌改良馬丁培養(yǎng)基4支：分別接種小于100cfu的白念、黑曲霉各2支，其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對照，培養(yǎng)5天。黑曲霉40醫(yī)療器械無菌檢查40（7）無菌檢查方法驗證-直接接種法方法驗證所用菌種（藥典41（7）無菌檢查方法驗證結(jié)果判斷 與對照管比較，如含

20、供試品各容器中的試驗菌均生長良好，則供試品的該檢驗量在該檢驗條件下無抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計，照此檢查法和檢驗條件進行供試品的無菌檢查。如含供試品的任一容器中微生物生長微弱、緩慢或不生長，則供試品的該檢驗量在該檢驗條件下有抑菌作用?？刹捎茫?)增加沖洗量，或增加培養(yǎng)基的用量；2)使用中和劑或滅活劑、更換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并重新進行方法驗證。41醫(yī)療器械無菌檢查41（7）無菌檢查方法驗證結(jié)果判斷 41醫(yī)療器械無菌檢查42（8）供試品無菌檢查在100級超凈臺內(nèi)，應(yīng)在酒精燈火焰周圍，以無菌操作法將規(guī)定量的供試品分別接種至含硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（不少于15ml/管）和改良馬

21、丁培養(yǎng)基（不少于10ml/管）的容器中。注意事項：嚴(yán)格遵守?zé)o菌技術(shù)操作，切勿人為造成污染；試驗器具溫度不可過高以免將可能存在的菌燙死。42醫(yī)療器械無菌檢查42（8）供試品無菌檢查在100級超凈臺內(nèi)，應(yīng)在酒精燈火焰周43（8）供試品無菌檢查供試品包裝須完好無損，尤其是只有一層包裝的樣品。供試品若有兩層（或兩層以上）包裝的，進入無菌檢驗室需將外包裝在傳遞窗（或緩沖間）拆除后，傳入實驗室。開啟潔凈區(qū)紫外燈和空氣過濾裝置并其工作1小時以上。 操作人員準(zhǔn)備：帶口罩、帽子、穿專用無菌服、鞋進入無菌室。每次試驗中所用物品必須計劃好，并有備用43醫(yī)療器械無菌檢查43（8）供試品無菌檢查供試品包裝須完好無損，尤

22、其是只有一層44（8）供試品無菌檢查無菌檢查法包括：薄膜過濾法和直接接種法。只要供試品性狀允許，應(yīng)采用薄膜過濾法。進行供試品無菌檢查時，所采用的檢驗方法和檢驗條件應(yīng)與驗證的方法相同。 44醫(yī)療器械無菌檢查44（8）供試品無菌檢查無菌檢查法包括：44醫(yī)療器械無菌檢查45（8）供試品無菌檢查細菌檢測管：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基+供試品真菌檢測管：改良馬丁培養(yǎng)基+供試品陽性對照管：對應(yīng)陽性菌+對應(yīng)培養(yǎng)基+供試品陰性對照管：應(yīng)取相應(yīng)的溶劑和稀釋液或沖洗液 +培養(yǎng)基 45醫(yī)療器械無菌檢查45（8）供試品無菌檢查細菌檢測管：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基+供46（8）供試品無菌檢查 檢驗數(shù)量： 是指一次試驗所用供試品最

23、小包裝容器的數(shù)量。 一般情況下，供試品無菌檢查若采用薄膜過濾法，應(yīng)增加最小檢驗數(shù)量的1/2作陽性對照用；若采用直接接種法，應(yīng)增加供試品無菌檢查時每個培養(yǎng)基容器接種的樣品量做陽性對照用。 46醫(yī)療器械無菌檢查46（8）供試品無菌檢查 檢驗數(shù)量：46醫(yī)療器械無菌檢查醫(yī)療器械無菌檢查培訓(xùn)課件48（8）供試品無菌檢查 直接接種法： 每個容器中培養(yǎng)基的用量應(yīng)符合接種的供試品體積不得大于培養(yǎng)基體積的10，同時硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基每管裝量不少于15ml，改良馬丁培養(yǎng)基每管裝量不少于10ml。培養(yǎng)基的用量和高度同方法驗證試驗；每種培養(yǎng)基接種的管數(shù)同供試品的檢驗數(shù)量。48醫(yī)療器械無菌檢查48（8）供試品無菌檢查

24、48醫(yī)療器械無菌檢查4949（8）供試品無菌檢查 陰性對照：供試品無菌檢查時，應(yīng)取相應(yīng)溶劑和稀釋液同法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。 陰性對照：目的是驗證相應(yīng)溶劑和稀釋液本身是否存在污染，防止假陽性。49醫(yī)療器械無菌檢查4949（8）供試品無菌檢查 49醫(yī)療器械無菌檢查5050（8）供試品無菌檢查陽性對照：應(yīng)根據(jù)供試品特性選擇陽性對照菌；無抑菌作用供試品以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌。陽性對照試驗的菌液制備同方法驗證試驗，加菌量小于100cfu/ml，供試品用量同供試品無菌檢查每份接種量相同。陽性對照管培養(yǎng)48 72小時應(yīng)生長良好。陽性對照：目的是驗證試驗結(jié)果可靠性，防止假陰性。50

25、醫(yī)療器械無菌檢查5050（8）供試品無菌檢查陽性對照：應(yīng)根據(jù)供試品特性選擇陽5151（8）供試品無菌檢查 薄膜過濾法：2010年版中國藥典規(guī)定:只要供試品性狀允許，應(yīng)采用薄膜過濾法。供試品無菌檢查所采用的檢查方法和檢驗條件應(yīng)與驗證的方法相同。在蠕動泵的作用下，被測產(chǎn)品通過裝有帶空氣過濾器的針頭及無菌管路直接從樣品容器中進入濾筒中，免去了通常膜轉(zhuǎn)移過程中易產(chǎn)生的污染。無菌檢查法中薄膜過濾法所用的濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45m，直徑約為50mm。51醫(yī)療器械無菌檢查5151（8）供試品無菌檢查 薄膜過濾法：51醫(yī)療器械5252（8）供試品無菌檢查水溶液供試品取規(guī)定量的供試液，直接過濾，或混合至適量稀釋液的無菌容器內(nèi)，混勻，立即過濾。供試液經(jīng)薄膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml，總沖洗量不得超過1000mL，以免濾膜上微生物受損傷。沖洗后分別將100mL硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基加入相應(yīng)的濾筒內(nèi)，進行培養(yǎng)。52醫(yī)療器械無菌檢查5252（8）供試品無菌檢查水溶液供試品取規(guī)定量的供試液，直5353（8）供試品無菌