全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用培訓(xùn)課件

1、全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用一、特點(diǎn)二、定義三、CRP的發(fā)現(xiàn)及結(jié)構(gòu)四、 CRP的生理作用五、常規(guī)CRP、hsCRP、全程CRP的區(qū)別六、檢測方法七、健康人CRP濃度正常參考范圍八、 CRP檢測的臨床意義九、全程CRP的應(yīng)用建議十、全程CRP的應(yīng)用小結(jié)2全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用一、特點(diǎn)2全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP（hsCRP+常規(guī)CRP）3全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP（hsCRP+常規(guī)CRP）3全程C反應(yīng)蛋白的檢測一、特點(diǎn) 全程CRP檢測項(xiàng)目，包括：超敏CRP和常規(guī)CRP檢測，檢測線性范圍：0.5-200mg/L,一次檢測同時(shí)出具超

2、敏CRP和常規(guī)CRP兩個(gè)檢測結(jié)果，增加了CRP的臨床運(yùn)用價(jià)值。4全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用一、特點(diǎn) 全程CRP檢測項(xiàng)目，包括：超敏CRP和二 、定義 CRP是一種急性相蛋白，健康人血清中濃度很低，當(dāng)人體受了微生物等多種因子侵襲后，人體的血清在幾小時(shí)后很快產(chǎn)生一種急性期反應(yīng)蛋白，這種蛋白以與肺炎球菌C多糖體超反應(yīng)。CRP由肝細(xì)胞合成，在人的血清、腦脊液、胸腹水等多種體液中均可測出。5全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用二 、定義 CRP是一種急性相蛋白，健康人血清三、C-反應(yīng)蛋白（CRP）的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)1930年由Tillet和Francis發(fā)現(xiàn)一種能在Ca2+存在時(shí)與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖結(jié)合的蛋

3、白質(zhì)1941年， Avery等先后證實(shí)這是一種急性感染時(shí)出現(xiàn)的蛋白質(zhì)（病情恢復(fù)后/健康人血清中沒有這種物質(zhì)）結(jié)構(gòu)對稱的盤狀五聚體，歸于五聚素家族由5個(gè)完全相同的非糖基化單體以非共價(jià)鍵聯(lián)接形成每個(gè)單體每個(gè)含206個(gè)氨基酸殘基（相對分子質(zhì)量23017）C反應(yīng)蛋白（ c-reactive protein ，CRP）6全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用三、C-反應(yīng)蛋白（CRP）的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)1930年由Tille7全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用7全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用C-反應(yīng)蛋白（CRP）的生成由肝細(xì)胞在IL6、IL2、TNF刺激下合成，炎癥局部巨噬細(xì)胞也可少量產(chǎn)生。正常合成率1-10mg/d，急性

4、炎癥時(shí)每天合成1g。半衰期19h，不耐熱，6530min破壞，沉淀系數(shù)615715S，等電點(diǎn)4182。不能通過胎盤，在體內(nèi)分布甚廣，除血液外，胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液中均可測出。8全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用C-反應(yīng)蛋白（CRP）的生成由肝細(xì)胞在IL6、IL2、TNF9全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用9全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用四、C-反應(yīng)蛋白（CRP）的生理作用引發(fā)對侵入細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)和吞噬作用，與配體結(jié)合，激活補(bǔ)體，調(diào)理吞噬功能，促使內(nèi)源性或外源性配體物質(zhì)（載有配體的病理物質(zhì)或病原體）的清除，表現(xiàn)為炎癥反應(yīng)在Ca2+存在下與磷酸膽堿、DNA、組蛋白等結(jié)合與凋亡壞死細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)破

5、壞時(shí)暴露的磷脂或外部侵入的細(xì)菌、真菌、寄生蟲的細(xì)胞壁磷酸膽堿結(jié)合CRP細(xì)菌巨噬細(xì)胞10全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用四、C-反應(yīng)蛋白（CRP）的生理作用引發(fā)對侵入細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)C-反應(yīng)蛋白（CRP）是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白CRP升高見于急性和慢性炎癥（如伴有細(xì)菌感染）、組織損傷（心梗、手術(shù)創(chuàng)傷、燒傷、放射線損傷等 ）、惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾病等 疾病后68h開始升高，2448h達(dá)到高峰比正常值高1001000倍，升高幅度與感染的程度呈正相關(guān)病變好轉(zhuǎn)時(shí)其含量急速下降，1周內(nèi)可恢復(fù)正常（T1/2約19 h)，此反應(yīng)不受放療、化療、皮質(zhì)激素治療影響 時(shí)相性+靈敏性N Engl J Med 1999; 340:

6、448-454.血清淀粉樣蛋白A結(jié)合珠蛋白纖維蛋白原轉(zhuǎn)鐵蛋白白蛋白11全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用C-反應(yīng)蛋白（CRP）是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白CRP升高見于急性和12全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用12全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用五、常規(guī)CRP、hsCRP 、全程CRP的區(qū)別8160mg/L 常規(guī)CRP（低水平區(qū)靈敏度較差） 0.58mg/L hsCRP （準(zhǔn)確的檢測低水平的CRP和微小變化，更敏感）0.5200mg/L 全程CRP=hsCRP+常規(guī)CRP（增強(qiáng)了臨床高CRP標(biāo)本的檢測能力，同時(shí)也提高了低值的靈敏性，更利于動(dòng)態(tài)監(jiān)測）三者檢測血中相同的物質(zhì)（物質(zhì)的唯一性，僅是檢測方法和范圍的差異）

7、13全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用五、常規(guī)CRP、hsCRP 、全程CRP的區(qū)別8160mg六、檢測方法 方法 靈敏度 參考獻(xiàn)試管內(nèi)沉淀試驗(yàn) - JExpMed1930;52561毛細(xì)管內(nèi)沉淀試驗(yàn) 1020mg/LAmJMed1950;8445改良平板雙擴(kuò)散法 1020mg/LIntArchAllergy1962改良瓊脂柱擴(kuò)散法 3.0mg/LProcSocExpBiol1955改良單擴(kuò)散法 1.0mg/L ActaPatholMicrobiolScand瓊脂糖凝膠電泳法 1.0mg/LClinChimActa1969放射電免疫擴(kuò)散法 10g/LJClinLabInvest1973補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

8、 0.6mg/LProcSocExpBiol1954膠乳凝集試驗(yàn) 1.0mg/LNature(London)1961高敏乳膠增強(qiáng)濁度 0.35mg/ml Dade Germany2000熒光抗體法 Nature(London)1961放射免疫測定法 3g/L JLabClinMed197614全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用六、檢測方法 方法 靈敏度CRP定量檢測C方法學(xué)線性分析序號(hào) 檢測方法 線性范圍mg/L 線性范圍有效倍數(shù) 檢測項(xiàng)目 1 免疫熒光 0.5-200 400倍 全程CRP 2 免疫比濁 8-160 20倍 常規(guī)CRP 3 金標(biāo) 8-250或5-150 32倍 常規(guī)CRP 4 紫

9、外分光光度 0.5-5或5-50 10倍 常規(guī)CRP或超敏CRP 5 動(dòng)態(tài)散射比濁 0.08-3.4或5-230 46倍 常規(guī)CRP或超敏CRP15全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用CRP定量檢測C方法學(xué)線性分析序號(hào) 檢測方法 i-CHROMATM全程CRP檢測原理i-CHROMATM全程CRP檢測使用的是免疫熒光，雙抗體夾心法，將血液樣本和檢測緩沖液充分混勻，緩沖液中熒光標(biāo)記的抗CRP抗體和血液中的CRP抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物。當(dāng)混合樣本加入到檢測板的加樣孔后，該復(fù)合物被固相在檢測板上的抗CRP抗體所捕獲。熒光信號(hào)強(qiáng)度反映了被捕獲的CRP數(shù)量。 i-CHROMATM全程CRP默認(rèn)是以mg/L

10、為單位16全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用i-CHROMATM全程CRP檢測原理i-CHROMATM全全程CRP檢測步驟檢查并插入ID芯片確定檢測板和ID芯片相匹配從冰箱中取出檢測緩沖液，放置10分鐘使其平衡至室溫吸取15ul全血（10ul血清，血漿或質(zhì)控品，EDTA抗凝）放入到有檢測緩沖液的管子中，充分混勻。取75ul樣本混合液加入檢測板的加樣孔中，在室溫下反應(yīng)3分鐘將檢測板放在i-CHROMATM免疫熒光分析儀的檢測板承載器中 確保檢測板方向正確并將其完全推入，按“選擇”鍵，儀器開始自動(dòng)掃描。13秒內(nèi)屏幕上即可讀取結(jié)果或直接打印結(jié)果或通過LIS系統(tǒng)輸出數(shù)據(jù)。17全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用

11、全程CRP檢測步驟檢查并插入ID芯片確定檢測板和ID芯片相匹七、健康人CRP濃度正常參考范圍(A) Frequency distribution of CRP concentrations in sera from 100 healthy adults.(B) Serum CRP concentration in monthly samples over 10 months in 10 healthy subjects.Wilkins, J. et al. Clinical Chemistry. 1998;44:1358-1361.正常情況下，CRP濃度很低兒童和成人10mg/L新生兒（16月

12、）2mg/L成人3mg/L即表示存在潛在心血管炎癥CRP一定要使用高敏感的檢測方法（ hsCRP ）常規(guī)CRP ： 8160mgLhsCRP： 0.58mg全程CRP： 0.5200mg = hsCRP +常規(guī)CRP 三者檢測血中相同的物質(zhì)18全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用七、健康人CRP濃度正常參考范圍(A) Frequency 全程CRP濃度的解釋兒童成人檢測結(jié)果臨床應(yīng)用建議檢測結(jié)果臨床應(yīng)用建議25.0細(xì)菌感染100.0提示細(xì)菌感染，可排除病毒感染50.0100.0常為細(xì)菌感染，病毒感染不常見25.050.0提示細(xì)菌或者病毒感染10.025.0提示病毒感染抗生素治療時(shí)hsCRP應(yīng)降至此水平

13、以下如病程尚短，不能排除細(xì)菌感染，應(yīng)數(shù)小時(shí)后復(fù)查10.025.0提示病毒感染抗生素治療時(shí)hsCRP應(yīng)降至此水平以下如病程尚短，不能排除細(xì)菌感染，應(yīng)數(shù)小時(shí)后復(fù)查10.0病程大于6-12小時(shí)，可基本排除細(xì)菌感染或細(xì)菌已被清除3.010.0心血管疾?。焊呶ｋU(xiǎn)性，建議給予抗炎與抗栓同時(shí)治療新生兒（16個(gè)月）2.03.0心血管疾病：中度危險(xiǎn)性，建議給予抗炎治療間隔兩周后再次檢查，取平均值為觀察基礎(chǔ)2.0提示新生兒感染1.0心血管疾?。旱臀ｋU(xiǎn)性濃度下降治療有效，病情好轉(zhuǎn)（ D4 40% ）下降至正常時(shí)，中斷抗菌素治療治療目標(biāo)hsCRP 2mg/L19全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP濃度的解釋兒童成

14、人檢測結(jié)果臨床應(yīng)用建議檢測結(jié)果臨床八、CRP檢測的臨床意義監(jiān)測病情監(jiān)控感染（術(shù)后、產(chǎn)后）鑒別細(xì)菌或病毒感染（首選指標(biāo)）抗生素療效觀察，指導(dǎo)和監(jiān)測治療心血管病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和指導(dǎo)治療20全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用八、CRP檢測的臨床意義20全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP用于評(píng)估疾病活動(dòng)性和療效監(jiān)控CRP的水平和持續(xù)時(shí)間與感染的存在及程度正相關(guān)CRP值越高說明炎性反應(yīng)越明顯，病情越重，預(yù)后越差CRP持續(xù)升高或再度升高提示臨床應(yīng)重視病情的變化 100mg/L提示敗血癥或侵襲性感染1099mg/L提示局灶性或淺表性感染10mg/L100mg/L2mg/L：一般新生兒血清CRP2 mg/L，大

15、于此值即與細(xì)菌感染的嚴(yán)重程度有關(guān)兒童和成人 10mg/L21全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP用于評(píng)估疾病活動(dòng)性和療效監(jiān)控CRP的水平和持續(xù)時(shí)間全程CRP用于感染的鑒別診斷（細(xì)菌性與非細(xì)菌性）當(dāng)機(jī)體被細(xì)菌感染時(shí),血清中CRP 濃度明顯升高,升高的幅度與細(xì)菌感染的程度呈正相關(guān)當(dāng)被病毒感染時(shí),CRP 增高不明顯,血清濃度正常或輕度升高這為疾病早期感染類型的鑒別提供了極其重要的依據(jù),從而判定是否進(jìn)行抗生素治療出生5天后22全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP用于感染的鑒別診斷（細(xì)菌性與非細(xì)菌性）當(dāng)機(jī)體被細(xì)菌全程CRP與感染程度正相關(guān)P0.01各種菌性感染患者組hsCRP檢測值均顯著高于對照

16、組細(xì)菌性感染患者組：148例,男81例,女67例,年齡1個(gè)月至4歲,平均1. 2歲對照組：55例體檢的健康兒童，男31例,女24例,年齡26 (平均2. 9)歲現(xiàn)代診斷與治療，2009， 20 (5)：268270.453329118N5523全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用全程CRP與感染程度正相關(guān)P100 mg/L1.0低5%1.03.0中5%10%3.010.0高10%15%10.0可能存在其他炎癥應(yīng)再測，并應(yīng)查找感染或炎癥來源檢查非心血管原因 hsCRP用于心血管疾病危險(xiǎn)性評(píng)估由于健康人體內(nèi)的CRP水平通常3mg/L，因此篩查一定要使用高敏感的檢測方法（ hsCRP ）38全程C反應(yīng)蛋白

17、的檢測及臨床應(yīng)用hsCRP用于心血管疾病危險(xiǎn)性評(píng)估1 mg/L3 mg/L1急性左心衰竭的實(shí)驗(yàn)室輔助檢查 心電圖：胸部X線檢查：超聲心動(dòng)圖：動(dòng)脈血?dú)夥治觯撼Ｒ?guī)實(shí)驗(yàn)室檢查：包括血常規(guī)和血生化檢查，如電解質(zhì)（鈉、鉀、氯等）、肝功能、血糖、白蛋白及高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）。研究表明，hs-CRP對評(píng)價(jià)急性心衰患者的嚴(yán)重程度和預(yù)后有一定的價(jià)值。 心衰標(biāo)志物：N末端B型利鈉肽原（NT-proBNP）心衰的診斷和鑒別診斷心衰的危險(xiǎn)分層：評(píng)估心衰的預(yù)后：臨床過程中這一標(biāo)志物持續(xù)走高，提示預(yù)后不良 心肌壞死標(biāo)志物：cTnI、CK-MB、肌紅蛋白Myo39全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用急性左心衰竭的實(shí)驗(yàn)室

18、輔助檢查 39全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床十、全程CRP的應(yīng)用小結(jié)：CRP是靈敏的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（炎癥標(biāo)志物）CRP被認(rèn)為是鑒別細(xì)菌感染與非細(xì)菌感染的一個(gè)首選指標(biāo)CRP比WBC在診斷細(xì)菌感染能力方面要高，較外周血WBC作為炎性反應(yīng)的標(biāo)志更為可靠急性感染性疾病：臨床上常見于肺炎、支氣管炎、咽喉炎、細(xì)菌性腦膜炎、傷寒、化膿性關(guān)節(jié)炎、尿路感染、骨盆炎、闌尾炎等等在鑒別細(xì)菌或病毒感染方面，CRP比白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)更準(zhǔn)確，特別是老年人，免疫系統(tǒng)反應(yīng)順應(yīng)性下降，可能有感染發(fā)生但臨床上并無發(fā)熱、白細(xì)胞升高等情況，此時(shí)檢測CRP有助于檢出細(xì)菌感染。CRP、WBC的聯(lián)合檢測或CRP連續(xù)檢測能提高診斷的準(zhǔn)確性

19、40全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用十、全程CRP的應(yīng)用小結(jié)：CRP是靈敏的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（炎hsCRP值是評(píng)估疾病活動(dòng)性的獨(dú)立指標(biāo)hsCRP的高低與感染的存在及程度正相關(guān)，hsCRP 值越高說明炎性反應(yīng)越明顯，病情越重，預(yù)后越差術(shù)后57CRP未恢復(fù)正常，應(yīng)懷疑吻合口漏或合并感染 ,并配合治療作隨訪監(jiān)測產(chǎn)后CRP不降反而升高、始終保持高水平、CRP濃度下降過程中突然升高，應(yīng)懷疑產(chǎn)褥感染存在，進(jìn)行一系列抗感染臨床治療對于燒傷病人，可檢測CRP以警示是否發(fā)生敗血癥，以便及時(shí)應(yīng)對治療對中、大手術(shù)患者,在術(shù)前和術(shù)后37天各作常規(guī)檢測一次41全程C反應(yīng)蛋白的檢測及臨床應(yīng)用hsCRP值是評(píng)估疾病活動(dòng)性的獨(dú)立指標(biāo)41全程C反應(yīng)蛋白的檢hsCRP是評(píng)價(jià)抗生素治療效果的獨(dú)立指標(biāo)根據(jù)hsCRP水平的變化來決定抗炎藥物的劑量對抗菌治療有良好反應(yīng)的患者，其hsCRP值下降迅速（24h50%）；hsCRP值連續(xù)緩慢下降且D440%提示患者預(yù)后良好在hs