401專一基礎(chǔ)班2013講義版1-62第31講

1、藥學(xué)專業(yè)知識(shí)（一）藥物分析第十七章 抗生素類藥物的分析主講:朱敬杰常用藥物的分析1.抗生素類藥物分（1）檢查項(xiàng)目析的特點(diǎn)（2）含量和效價(jià)測(cè)定的方法（九）維生素類藥物的分析2.青霉素鈉和青霉素鉀青霉素鈉和青霉素鉀的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法注射用青霉素鈉、注射用青霉素鉀的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和含量測(cè)定方法3.阿莫西（1）阿莫西林的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法林（2）阿莫西林制劑的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和含量測(cè)定方法4.頭孢羥（1）頭孢羥氨芐的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法氨芐（2）頭孢羥氨芐制劑的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和含量測(cè)定方法考試大綱要求常用藥物的分析（1）硫酸慶大霉素

2、的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方5.硫酸慶法大霉素（2）硫酸慶大霉素制劑的鑒別方法、檢查項(xiàng)目、含量測(cè)定方法（九）（3)體內(nèi)樣品中慶大霉素的測(cè)定維生素類藥物的分析6.鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法鹽酸四環(huán)素制劑的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和含量測(cè)定方法7.阿奇霉（1）阿奇霉素的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法素（2）阿奇霉素制劑的鑒別方法、檢查項(xiàng)目和含量測(cè)定方法（3）體內(nèi)樣品中阿奇霉素的測(cè)定考試大綱要求第十七章抗生素類藥物的分析抗生素：是一類在低微濃度下即可對(duì)某些生物（病原微生物）的生命活動(dòng)有特異抑制作用的化學(xué)物質(zhì)的總稱?？股囟鄶?shù)通過(guò)微生物發(fā)酵生產(chǎn)，部分由化學(xué)

3、合成或半合成方法制備。特點(diǎn)：結(jié)構(gòu)復(fù)雜，有些不穩(wěn)定，可能降解或產(chǎn)生聚合物。不僅降低療效，還可能引起過(guò)敏等毒性反應(yīng)，需嚴(yán)格控制質(zhì)量。1.抗生素的檢查生產(chǎn)過(guò)程中可能引入的雜質(zhì)：有關(guān)物質(zhì)、聚合物、殘留溶劑與安全性有關(guān)的項(xiàng)目：異常毒性、降壓物質(zhì)、熱源、細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌等。2.抗生素的含量測(cè)定方法化學(xué)或物理化學(xué)方法：容量法、紫外-可見(jiàn)分光光度法、HPLC法生物學(xué)方法：根據(jù)抗生素對(duì)細(xì)菌作用的強(qiáng)度來(lái)測(cè)定其效價(jià)。中國(guó)藥典收載的“抗生素微生物檢定法屬于此種方法。管碟法：比較抑菌圈的大小。濁度法：比較細(xì)菌濁度值。第一節(jié) 青霉素鈉和青霉素鉀及其制劑的分析重點(diǎn)：1.青霉素類雜質(zhì)檢查項(xiàng)目和方法第一節(jié) 青霉素鈉和青霉素鉀及

4、其制劑的分析青霉素鈉和青霉素鉀屬于-內(nèi)酰胺類抗生素。母核：6-氨基青霉素烷酸母核上有羧基：顯酸性 與堿金屬成鹽，易溶于水與有機(jī)堿成鹽，難溶于水。-內(nèi)酰胺：不穩(wěn)定易水解開(kāi)環(huán)。 側(cè)鏈：芐基，有苯環(huán)，有紫外吸收。高效液相色譜法：測(cè)定青霉素鈉和青霉素鉀的含量，同時(shí)鑒別。 2.紅外分光光度法焰色反應(yīng)：照鈉鹽和鉀鹽的焰色反應(yīng)試驗(yàn)。取鉑絲，用鹽酸潤(rùn)濕后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒現(xiàn)象：青霉素鈉的火焰顯鮮黃色青霉素鉀的火焰顯紫色。一、鑒別吸光度測(cè)定264nm處吸收度控制青霉素鈉、鉀含量。測(cè)定280nm、325nm處吸收度控制降解產(chǎn)物雜質(zhì)的量。 2、有關(guān)物質(zhì)高效液相色譜法3、青霉素聚合物：方法依據(jù)主藥與雜質(zhì)的

5、分子量不同。性質(zhì)：引起過(guò)敏性休克反應(yīng)檢查方法：分子排阻色譜法：葡聚糖凝膠G-10 為固定相，以青霉素作為對(duì)照品，檢查波長(zhǎng)為254nm，按外標(biāo)法計(jì)算。其他：干燥失重，細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌。二、檢查干燥失重：控制水分的量細(xì)菌內(nèi)毒素：鱟試劑法無(wú)菌：薄膜過(guò)濾法其他檢查項(xiàng)目：結(jié)晶性、酸堿度、溶液澄清度與顏色、可見(jiàn)異物、不溶性微粒。中國(guó)藥典用HPLC法ODS為填充劑，青霉素對(duì)照品 ，按外標(biāo)法計(jì)算。三、含量測(cè)定由于青霉素不穩(wěn)定中國(guó)藥典規(guī)定貯藏條件為：嚴(yán)封，在涼暗干燥處保存。四、貯藏1.注射用青霉素鈉：鑒別：同原料藥檢查：溶液澄清度與顏色、青霉素聚合物、水分、酸堿度、細(xì)菌內(nèi)毒素、無(wú)菌含量測(cè)定：同原料藥2.注射用青

6、霉素鉀鑒別：同原料藥檢查：同注射用青霉素鈉含量測(cè)定：同原料藥。五、注射用青霉素鈉和注射用青霉素鉀的分析第二節(jié) 阿莫西林及其制劑的分析重點(diǎn)：1.阿莫西林雜質(zhì)檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法。第二節(jié) 阿莫西林及其制劑的分析阿莫西林屬青霉素類藥物，母核與青霉素鈉相同。側(cè)鏈為：2-氨基-2-（4-羥基苯基）乙?；?。（一）鑒別高效液相色譜法：薄層色譜法紅外分光光度法一、阿莫西林的分析（二）檢查有關(guān)物質(zhì)：主要檢查其降解產(chǎn)物，采用高效液相色譜法阿莫西林聚合物：分子排阻色譜法，葡聚糖凝膠G-10為填充劑，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，青霉素為對(duì)照品，按外標(biāo)法計(jì)算。水分：水分測(cè)定法（費(fèi)休氏水分測(cè)定法）其他檢查項(xiàng)目：酸度、溶

7、液澄清度、熾灼殘?jiān)?。（三）含量測(cè)定方法：高效液相色譜法條件：ODS柱，阿莫西林為對(duì)照品，外標(biāo)法定量。（四）貯藏條件中國(guó)藥典規(guī)定貯藏條件為：避光、密封保存。阿莫西林的制劑有：阿莫西林片、阿莫西林膠囊、阿莫西林顆粒和阿莫西林混懸劑，均為口服制劑。鑒別：四種制劑均采用HPLC法和TLC法（二選一）檢查：片劑、膠囊均檢查有關(guān)物質(zhì)、測(cè)定溶出度；顆粒需進(jìn)行溶化性的檢查。3.含量測(cè)定：四種制劑含量測(cè)定方法均與阿莫西林原料相同。HPLC法二、阿莫西林制劑的分析第三節(jié) 頭孢羥氨芐及其制劑的分析重點(diǎn)：1.頭孢羥氨芐的雜質(zhì)檢查項(xiàng)目和方法、含量測(cè)定方法第三節(jié) 頭孢羥氨芐及其制劑的分析頭孢羥氨芐屬-內(nèi)酰胺類中頭孢菌素類

8、抗生素。母核：7-氨基頭孢烷酸。側(cè)鏈：有苯環(huán)，有紫外吸收。（一）鑒別化學(xué)顯色法：加FeCl3試液，顯棕黃色 2.高效液相色譜法3.紅外分光光度法一、頭孢羥氨芐的分析（二）檢查主要檢查：結(jié)晶性、酸度、有關(guān)物質(zhì)和水分 1.有關(guān)物質(zhì)：主要有降解產(chǎn)物-對(duì)羥基苯甘氨酸、7 - 氨基去乙酰氧基頭孢烷酸及其他有關(guān)物質(zhì)。方法：HPLC外標(biāo)法+不加校正因子的主成分自身對(duì)照法水分：費(fèi)休氏水分測(cè)定法。（三）含量測(cè)定中國(guó)藥典采用高效液相色譜法測(cè)定頭孢羥氨芐原料的含量。色譜條件：ODS柱，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。頭孢羥氨芐的制劑有：頭孢羥氨芐片、頭孢羥氨芐膠囊、頭孢羥氨芐顆粒，均為口服制劑。1.鑒別化學(xué)顯色法：片和膠囊加

9、三氯化鐵試液，即顯棕黃色。顆粒加堿性酒石酸銅試液，即顯墨綠色。高效液相色譜法二、頭孢羥氨芐制劑的分析2.檢查：有關(guān)物質(zhì)：三種制劑均采用HPLC法溶出度：片劑、膠囊檢查，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)。其他檢查水分：膠囊劑檢查干燥失重、酸度：顆粒劑檢查含量測(cè)定三種制劑的含量測(cè)定均與原料相同。HPLC法。第四節(jié) 硫酸慶大霉素及其制劑的分析重點(diǎn)：1.硫酸慶大霉素的雜質(zhì)檢查，含量測(cè)定方法第四節(jié) 硫酸慶大霉素及其制劑的分析硫酸慶大霉素屬于氨基糖苷類抗生素。1.分子結(jié)構(gòu)中有5個(gè)堿性中心，為堿性化合物。 2.無(wú)共軛體系：無(wú)紫外吸收。3.慶大霉素是C組分的復(fù)合物，C1，C2，C1a， C2a等。（一）鑒別 1.

10、薄層色譜法HPLC法紅外分光光度法硫酸鹽反應(yīng)：顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)一、硫酸慶大霉素的分析（二）檢查 1.硫酸鹽HPLC法，C組分項(xiàng)下的色譜條件 2.有關(guān)物質(zhì)HPLC法，以西索米星、小諾霉素為標(biāo)準(zhǔn)品（C組分項(xiàng)下色譜條件） 3.水分：照水分測(cè)定法（費(fèi)休氏水分測(cè)定法）慶大霉素C組分：硫酸慶大霉素為C組分的復(fù)合物，不同的C組分活性無(wú)明顯差異，但是毒副作用不同，所以需控制C組分的含量。HPLC法： ODS為填充劑、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD) 5.細(xì)菌內(nèi)毒素（ 三 ）含量測(cè)定中國(guó)藥典采用微生物法測(cè)定硫酸慶大霉素的含量。硫酸慶大霉素制劑有：片劑、注射液、緩釋片、顆粒劑、滴眼液。 1.鑒別：均與原料藥相同2.

11、檢查：注射液：檢查慶大霉素C組分（方法同原料藥）、pH值、顏色、無(wú)菌和細(xì)菌內(nèi)毒素緩釋片：要求檢查釋放度顆粒：干燥失重滴眼液：檢查pH、顏色、滲透壓摩爾濃度等。3.含量測(cè)定：同原料藥，均采用抗生素微生物檢定法二、硫酸慶大霉素制劑的分析硫酸慶大霉素的療效和毒性與血藥濃度密切相關(guān)，且有效范圍與潛在毒性濃度安全區(qū)間較小。需治療藥物監(jiān)測(cè)樣品處理：液-液萃取分析方法：微生物法、放射免疫測(cè)定法、熒光偏振免疫測(cè)定法以及柱前衍生化熒光或紫外檢測(cè)HPLC法、間接光度檢測(cè)HPLC法。三、硫酸慶大霉素體內(nèi)樣品的分析第五節(jié) 鹽酸四環(huán)霉素及其制劑的分析重點(diǎn)：1.鹽酸四環(huán)霉素的鑒別方法、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定方法第五節(jié) 鹽酸四

12、環(huán)霉素及其制劑的分析鹽酸四環(huán)霉素屬于四并苯的衍生物。長(zhǎng)共軛體系：紫外吸收。有酚羥基：酸性二甲氨基：堿性C4：手性碳原子，在弱酸性條件下能發(fā)生差向異構(gòu)化。一、鹽酸四環(huán)霉素的分析（一）鑒別三氯化鐵反應(yīng)：酚羥基、烯醇基的特征鹽酸四環(huán)霉素可以和鐵離子反應(yīng)形成紅色配位化合物方法：取本品，加硫酸即顯深紫色，再加三氯化鐵試液，變?yōu)榧t棕色。 2.高效液相色譜法紅外分光光度法氯化物反應(yīng)（二）檢查 1.有關(guān)物質(zhì)主要是土霉素、差向四環(huán)素、脫水四環(huán)素、差向脫水四環(huán)素、金霉素方法：采用HPLC法檢查，加校正因子的主成分自身對(duì)照法 2.雜質(zhì)吸光度：主要為了控制差向異構(gòu)體、脫水四環(huán)素、差向脫水四環(huán)素以及一些中性降解產(chǎn)物的量

13、，此類雜質(zhì)顏色深。方法在530nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。此外還需檢查酸度、溶液澄清度、干燥失重、熱原和無(wú)菌。（三）含量測(cè)定：HPLC法，外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。鹽酸四環(huán)霉素制劑有：鹽酸四環(huán)霉素片、鹽酸四環(huán)霉素膠囊和注射用鹽酸四環(huán)霉素。1.鹽酸四環(huán)霉素片和膠囊鑒別：均與原料藥相同檢查有關(guān)物質(zhì)：與原料藥相同溶出度：片和膠囊均需檢查干燥失重：膠囊需檢查含量測(cè)定：與原料藥相同（HPLC法）二、鹽酸四環(huán)霉素制劑的分析2.注射用鹽酸四環(huán)霉素鑒別：與原料藥相同檢查：有關(guān)物質(zhì)：檢查方法同原料藥相同其他：溶液澄清度、干燥失重、酸度、雜質(zhì)吸光度、熱原與無(wú)菌。 3）含量測(cè)定與原料藥相同（HPLC法）第六節(jié) 阿奇霉素及其制劑

14、的分析重點(diǎn)：1.阿奇霉素的雜質(zhì)檢查一、阿奇霉素的分析（一）鑒別 1.薄層色譜法高效液相色譜法紅外光譜法（二）檢查 1.結(jié)晶性：堿度：本品分子結(jié)構(gòu)中的內(nèi)酯環(huán)上的叔氮原子及氨基糖上的二甲氨基具有堿性，因此要求檢查堿度。測(cè)pH值有關(guān)物質(zhì)主要指阿奇霉素B、阿奇霉素Cx和紅霉素A偕亞胺醚等。HPLC法，加校正因子的主成分自身對(duì)照法 4.水分：費(fèi)休氏水分測(cè)定法5.其他：熾灼殘?jiān)?、重金屬（三）含量測(cè)定：HPLC法（ODS柱，外標(biāo)法以峰面積計(jì)算）二、阿奇霉素制劑的分析阿奇霉素制劑有：片劑、分散片、膠囊劑、干混懸劑和顆粒劑 1.鑒別：5種制劑均采用TLC法或HPLC法檢查：有關(guān)物質(zhì)：均需檢查，方法與原料藥相同，HPL