設(shè)計性實驗設(shè)計方案模板

1、設(shè)計性實驗設(shè)計方案模板脈通膠囊質(zhì)量控制研究設(shè)計方案一、處方人參大黃川芎葛根二、制法以上四味，取川芎粉碎成0.3-0.5cm的粗粉，加6倍量水，浸泡4小時，水蒸汽蒸餾 法提取揮發(fā)油，分取揮發(fā)油，P -環(huán)糊精包合備用。另取人參、大黃、葛根粉碎成粗粉， 與提取揮發(fā)油后的川芎藥渣及水溶液合并，加乙醇使含醇量為75%，加熱回流提取3次， 每次1小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.051.10（50C）的稠 膏，再進行噴霧干燥，干燥物粉碎成細粉，上述藥粉、川芎揮發(fā)油6 -環(huán)糊精包合物研磨 混勻，制成1000粒膠囊，即得。三、性狀本品為膠囊劑，內(nèi)容物為黃棕色顆粒，氣清香，味辛、涼、微苦。

2、三、定性鑒別研究本品中人參、水蛭、川芎均是經(jīng)過提取后裝入膠囊，所以無法用顯微鑒別進行成分的 定性研究。根據(jù)每種藥材中所含的化學(xué)成分并結(jié)合提取方法，采用理化鑒別，其主要質(zhì)量 研究工作如下。1、人參人參中主要含人參皂苷類有效成分，在制備工藝研究時，選擇提取溶劑主要是用對人 參皂苷類成分溶解度大的含水醇類進行提取，故在進行定性鑒別研究時，宜對皂苷類成分 進行研究。據(jù)報道，人參中人參皂苷Rg1和人參皂苷Re相對含量較高，故以此二者成分 為對照品，但人參皂苷Rg1和人參皂苷Re又不是人參中專屬性成分，故還宜加入人參對 照藥材作為對照，將更具有現(xiàn)實意義。研究方法如下：供試品溶液的制備：取本品5粒，加溫?zé)嵴?/p>

3、餾水30ml使溶解，加乙醚30ml洗滌并入 分液漏斗中，棄去乙醚液，再加乙醚30mL萃取，棄去乙醚液，水溶液加水飽和正丁醇提 取5次（20mL，20mL，15mL，15mL，15mL），合并正丁醇液，加1% NaOH溶液洗滌2次， 每次30mL，棄去堿液，再加用正丁醇飽和的水溶液洗滌2次，每次20mL，收集正丁醇液， 置蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。 陰性對照溶液的制備：取陰性樣品（缺人參藥材的樣品），按照供試品溶液制備的條件制 備樣品，得陰性對照溶液。對照藥材溶液的制備：取人參對照藥材1g，加氯仿40mL，加熱回流1小時，棄去氯 仿液，藥渣揮干溶

4、劑，加水0.5mL拌勻濕潤后，加水飽和的正丁醇10mL，超聲處理30分鐘，吸取上清液， 加3倍量氨試液，搖勻，放置分層，取上層液蒸干，殘渣加甲醇2mL使溶解，作為對照藥 材溶液。薄層層析及檢識方法：照薄層色譜法（中國藥典2000年版一部附錄W B）試驗，吸 取對照藥材溶液，供試品溶液及陰性對照溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿- 甲醇-水（13 ： 7 ： 2）10C以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫 酸乙醇溶液，在105C烘至斑點顯色清晰，并對結(jié)果進行分析。2、川芎川芎含有約1%的揮發(fā)油。主要成分有內(nèi)酯類、酚類、有機酸類、生物堿類及有機酸酯 類等。在制備工藝研究

5、時，采用先提取揮發(fā)油，再用醇提，基本上能將川芎中所含大多有 效成分提出。關(guān)于川芎的鑒別方法多采用TLC法，以對照藥材為對照。進行研究：供試品溶液的制備：方法1取本品4粒，傾出內(nèi)容物，置燒杯中，加30mL水使溶解， 轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15mL，合并乙醚液，用2% Na2CO3提取3次，每 次15mL，合并堿液，用鹽酸調(diào)pH值23，再用乙醚提取3次，每次15mL，合并乙醚液， 蒸干，殘渣加甲醇2mL使溶解，作為供試品溶液。方法2取本品4粒，傾出內(nèi)容物，置燒杯中，加30mL水使溶解，轉(zhuǎn)入分液漏斗中， 用正己烷萃取3次，每次15mL，合并正己烷溶液，用甲醇萃取2次（20mL，15mL

6、），合并甲醇液，回收甲醇至約5mL，作為供試 品溶液。陰性對照溶液的制備：取陰性對照樣品（缺川芎的樣品），按照供試品溶液的制備方 法進行制備，即得。對照藥材溶液的制備：取川芎對照藥材1g，加醋酸乙酯20mL，浸漬 過夜，濾過，濾液蒸干，殘渣加2mL甲醇使溶解，作為對照藥材溶液。薄層層析及檢識方法：照薄層色譜法（中國藥典2000年版一部附錄W B）試驗，吸 取對照藥材溶液、供試品溶液及陰性對照液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷- 醋酸乙酯（9 ： 1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。四、含量測定人參為方中君藥，故以人參為含量測定對象。中國藥典2019年版一部“人

7、參”含量 測定規(guī)定，人參中含人參皂苷Rg1和人參皂苷Re不少于0.25%，含人參皂苷Rb1不少于0.20%,本品中仍以人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1為測定指標(biāo)，并參考有關(guān) 文獻3 12進行研究。儀器與試藥高效液相色譜儀(日本島津)紫外檢測器(日本島津)CLC-ODS C18 柱人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷對照品、人參皂苷Rb1對照品色譜條件選擇色譜條件參照中國藥典2019年版一部“人參”項下含量測定的色譜條件。并經(jīng)研究確定：用 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：乙腈-水梯度洗脫；檢測波長為203nm。理論塔板數(shù)(n)的計算根據(jù)對照品色譜峰計算人參皂苷Re的理論塔板數(shù)(n)。

8、n=16 (tR/w) 2分離度(R)據(jù)公式R=2(tR2-tR1)/(w1+w2)計算分離度拖尾因子據(jù)公式T=W0.05h/2d1計算拖尾因子對照品溶液的制備取人參皂苷Rg1對照品，人參皂苷Re對照品(中國藥品生物制品檢定所)，置五氧化二磷干燥器中，減壓干燥48小時，取出，精密稱 取適量，用甲醇溶解制成每1ml含人參皂苷Rg10.4mg，人參皂苷Re0.35mg的溶液，作為 對照品溶液。供試品溶液的制備取本品5粒，傾出內(nèi)容物，精密稱定，加溫?zé)嵴麴s水30ml使溶解，加乙醚30ml洗滌 并入分液漏斗中，棄去乙醚液，再加乙醚30mL萃取，棄去乙醚液，水溶液加水飽和正丁 醇提取5次(20mL，20m

9、L，15mL，15mL，15mL)，合并正丁醇液，加1% NaOH溶液洗滌2 次，每次30mL，棄去堿液，再加用正丁醇飽和的水溶液洗滌2次，每次20mL，收集正丁 醇液，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即 得。陰性對照試驗將供試品溶液（按正文中條件制備），陰性對照溶液（缺人參藥材的樣品，照供試品 溶液條件同法制備）及對照品溶液（人參皂苷Rg1、人參皂苷Re），分別注入液相色譜 儀，按上述色譜條件進行測，判斷陰性是否有干擾。線性試驗精密吸取人參皂苷Rg1、對照品（0.462mg/ml）、人參皂苷Re對照品（0.414mg/ml）， 注入液相色譜儀，按上條件進行測定，計算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。穩(wěn)定性試驗（考察供試品溶液保存的時間）精密吸取同一供試品溶液10p 1，注入液相色譜儀，按上色譜條件，間隔不同時間0， 0.5h、1h、2h、4h 進行測定，計算 RSD 值（W3%）。精密度試驗（考察儀器的精密度）精密吸取同一對照品溶液10 M 1，注入液相色譜儀，按上條件進行測定，計算RSD 值（W3%）。重復(fù)性試驗對同一批號樣品，按照供試品溶液制備方法制備6次，進行測定，計算RSD值 （W3%）。耐用性試驗液相色譜法典型的變動因素：不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱，流動相的組成 比例的變化，流動相pH值的變化，柱溫，流速，檢測波長等。按