腸桿菌科知識(shí)講座培訓(xùn)課件

1、腸桿菌科知識(shí)講座腸桿菌科知識(shí)講座第一節(jié) 埃希菌屬 （Escherichia) 埃希菌屬有5個(gè)種，其中最重要的是大腸埃希菌俗稱大腸桿菌（E.coli)，是最常見的臨床分離菌。腸桿菌科知識(shí)講座2第一節(jié) 埃希菌屬 （Escherichia) 埃一、形態(tài)及染色特性 革蘭氏陰性小桿菌，散在或成對(duì)，周毛菌，有菌毛。腸桿菌科知識(shí)講座3一、形態(tài)及染色特性 革蘭氏陰性小桿菌，散在或成對(duì)，二、培養(yǎng)特性1.普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，光滑、濕潤(rùn)、半透明、灰白色菌落；2. 麥康凱瓊脂上形成紅色菌落，伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落；3.致病菌株在綿羊血平板上呈型溶血；4.生化特性：糖發(fā)酵試驗(yàn)（發(fā)酵乳糖）和IMViC（+

2、-）試驗(yàn)。 H2S陰性。麥康凱培養(yǎng)基腸桿菌科知識(shí)講座4二、培養(yǎng)特性1.普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，光滑、濕潤(rùn)、半透明、灰三、抗原及血清型（一）抗原菌體抗原（O抗原）：其成分為L(zhǎng)PS的多糖側(cè)鏈。173種，耐熱，1個(gè)菌株僅含1種。莢膜抗原（K抗原）：其成分多數(shù)為多糖（K88、K99為蛋白質(zhì)），80種， 1個(gè)菌株可含1-2種甚至無。根據(jù)對(duì)熱的耐受程度不同分L、A和B型。3. 鞭毛抗原（H抗原）：其成分為蛋白質(zhì)，不耐熱，55種， 1個(gè)菌株僅含1種。（二）血清型（抗原式） 表示方法：O：K：H， 如： O8：K23(L)：H19 腸桿菌科知識(shí)講座5三、抗原及血清型（一）抗原腸桿菌科知識(shí)講座5H抗原(鞭毛) O

3、抗原(LPS側(cè)鏈)K抗原或Vi(莢膜)F抗原(菌毛)復(fù)雜的抗原構(gòu)造腸桿菌科知識(shí)講座6H抗原 O抗原K抗原或ViF抗原復(fù)雜的抗原構(gòu)造腸桿菌科四、致病性根據(jù)毒力因子與發(fā)病機(jī)制不同，將病原性大腸桿菌分為5類：（1）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC）（2）產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌（SLTEC）（3）腸致病性大腸桿菌（EPEC）（4）尿道致病性大腸桿菌（UPEC）（5）敗血性大腸桿菌（SEPEC）腸桿菌科知識(shí)講座7四、致病性根據(jù)毒力因子與發(fā)病機(jī)制不同，將病原性大腸桿菌分為5 （一）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC） 引起人和動(dòng)物腹瀉，主要毒力因子有兩類：1. 黏附素（定居因子）：菌毛，能黏附宿主的小腸上皮 細(xì)胞，雖不是

4、直接的致病因子，卻是首要的毒力因子。腸毒素：分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素。 （1）不耐熱腸毒素（heat-labile enterotoxin,LT) 對(duì)熱敏感，可轉(zhuǎn)變成類毒素，具有A和B亞單位。 （2）耐熱腸毒素（heat-stable enterotoxin,ST) 耐熱，分子量小，無免疫原性。腸桿菌科知識(shí)講座8 （一）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC） 引起人和動(dòng)物腹瀉（二）產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌（SLTEC）引起豬水腫病，有兩類毒力因子：黏附性菌毛 F18，有助于細(xì)菌在腸黏膜上皮細(xì)胞定居和繁殖。致水腫病2型類志賀毒素 直接導(dǎo)致該病發(fā)生的主要毒力因子。腸桿菌科知識(shí)講座9（二）產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌

5、（SLTEC）引起豬水腫病，有兩類仔豬黃?。罕静“l(fā)生于一周以內(nèi)的仔豬，以一至三日齡最為常見，一周齡以后不發(fā)生。同窩發(fā)病率很高在90%以上。病死率很高，有的全窩死亡。腸桿菌科知識(shí)講座10仔豬黃痢：本病發(fā)生于一周以內(nèi)的仔豬，以一至三日齡最為常見，腸 五、診斷標(biāo)本采集： 根據(jù)臨床疾病類型的不同，采集適當(dāng)?shù)臉?biāo)本。如敗血癥病例采集病變的內(nèi)臟組織，腹瀉病例采集小腸內(nèi)容物。檢查方法： （一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基 （二）生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵、IMViC試驗(yàn)、H2S陰性（三 糖鐵培養(yǎng)基）。 （三）血清學(xué)試驗(yàn)：玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型腸桿菌科知識(shí)講座11 五、診斷標(biāo)本采集： 根據(jù)臨床疾病類型的不同，采集適當(dāng)?shù)臉?biāo)微生物學(xué)

6、診斷對(duì)敗血癥病例可無菌采集其病變的內(nèi)臟組織，直接在血瓊脂或麥康凱平板上劃線分離培養(yǎng)。對(duì)幼畜腹瀉及豬水腫病病例應(yīng)取其各段小腸內(nèi)容物或粘膜刮取物以及相應(yīng)腸段的腸系膜淋巴結(jié)，分別在麥康凱平板和血平板上劃線分離培養(yǎng)。挑取麥康凱平板上的紅色菌落或血平板上呈溶血的典型菌落，分別轉(zhuǎn)種三糖鐵（TSI）培養(yǎng)基和普通瓊脂斜面做初步生化鑒定和純培養(yǎng)。將TSI瓊脂反應(yīng)模式符合埃希菌屬的生長(zhǎng)物或其相應(yīng)的普通斜面純培養(yǎng)物做O抗原鑒定。進(jìn)而檢測(cè)毒力因子，便可確定其屬于何類致病性大腸桿菌。腸桿菌科知識(shí)講座12微生物學(xué)診斷對(duì)敗血癥病例可無菌采集其病變的內(nèi)臟組織，直接在血移植CAYE培養(yǎng)基大腸桿菌分離鑒定程序病料糞便或腸內(nèi)容物及

7、腸粘膜刮取物麥康凱或伊紅美蘭瓊脂平板劃線分離血、腸淋巴結(jié)或其他病變組織血瓊脂和麥康凱瓊脂平板劃線分離挑取疑似大腸桿菌菌落510個(gè)以上分別同時(shí)接種TSI瓊脂和普通瓊脂斜面革蘭氏染色鏡檢形態(tài)，不符合者可終止鑒定生化試驗(yàn)證實(shí)為大腸桿菌血清型鑒定ETEC菌株毒力因子鑒定移植粘附素專用培養(yǎng)基腸毒素鑒定（LT和ST）粘附素抗原定型豬水腫病菌株Stx2e鑒定TSI呈A（K）/A反應(yīng)者，其TSI +（-），-生長(zhǎng)物或普通斜面純菌腸桿菌科知識(shí)講座13移植CAYE培養(yǎng)基大腸桿菌分離鑒定程序病料糞便或腸內(nèi)容物及腸六、防治目前國(guó)內(nèi)外已有多種疫苗預(yù)防大腸桿菌病，如全菌滅活苗、亞單位疫苗、類毒素苗、基因工程疫苗等。腸桿菌

8、科知識(shí)講座14六、防治目前國(guó)內(nèi)外已有多種疫苗預(yù)防大腸桿菌病，如全菌滅活苗、第二節(jié) 沙門氏菌屬（Salmonella)絕大多數(shù)沙門氏菌對(duì)人和動(dòng)物有致病性，人類食物中毒的主要病原之一，在公共衛(wèi)生上占有重要地位。腸桿菌科知識(shí)講座15第二節(jié) 沙門氏菌屬（Salmonella)絕大多數(shù)沙門氏一、形態(tài)及染色與大腸桿菌相似，除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌無鞭毛不運(yùn)動(dòng)外，其余均以周鞭毛運(yùn)動(dòng)。腸桿菌科知識(shí)講座16一、形態(tài)及染色與大腸桿菌相似，除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌無鞭毛二、培養(yǎng)及生化特性麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：發(fā)酵乳糖（大腸桿菌）；不發(fā)酵乳糖（沙門氏菌）在選擇培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖而呈無色菌落。IMViC試驗(yàn)：-+-+；多

9、數(shù)菌株H2S陽性。腸桿菌科知識(shí)講座17二、培養(yǎng)及生化特性麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：發(fā)酵乳糖（大腸桿菌）；不三、抗原及血清型（一）抗原1 .菌體抗原（O抗原）：其成分為L(zhǎng)PS的多糖側(cè)鏈。58種，耐 熱，1個(gè)菌株可含多種，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示。2. 莢膜抗原（K抗原）：與毒力有關(guān)，又稱Vi抗原。有的菌株有， 有的菌株無。 3.鞭毛抗原（H抗原）：其成分為蛋白質(zhì)，不耐熱，63種, 分為兩相： （1）第1相（特異相）：小寫英文字母表示 （2）第2相（非特異相）：阿拉伯?dāng)?shù)字表示腸桿菌科知識(shí)講座18三、抗原及血清型（一）抗原1 .菌體抗原（O抗原）：其成分表示方法： O抗原：第1相H抗原：第2相H抗原 如： 1，4，

10、5，12：i : 1,2 有Vi抗原的，則表示為：（二）血清型（抗原式）O抗原： Vi抗原：第1相H抗原：第2相H抗原腸桿菌科知識(shí)講座19表示方法： （二）血清型（抗原式）O抗原： Vi抗原：第1四、致病性多數(shù)具有致病性，是一種重要的人畜共患病原菌，很容易在動(dòng)物與動(dòng)物、動(dòng)物與人、人與人之間間接或直接傳播。根據(jù)對(duì)宿主適應(yīng)性不同，可分為：專嗜性：如雞白痢、雞傷寒沙門氏菌、馬流產(chǎn)、牛流產(chǎn)、羊流產(chǎn)沙門菌 、豬傷寒沙門菌 2. 偏嗜性：如豬霍亂沙門氏菌和都柏林沙門菌 3. 泛嗜性：如鼠傷寒和腸炎沙門氏菌腸桿菌科知識(shí)講座20四、致病性多數(shù)具有致病性，是一種重要的人畜共患病原菌，很容易致病機(jī)理 與侵襲有關(guān)。

11、 侵襲的兩個(gè)途徑： 1. 通過侵襲動(dòng)物腸道粘膜表面腸系膜淋巴結(jié)集結(jié)（Payers patch）的淋巴上皮中的特殊抗原捕獲細(xì)胞（microfold cell，M細(xì)胞），進(jìn)入上皮下層組織 2. 直接侵襲M細(xì)胞周圍具有吸收能力的上皮細(xì)胞，通過上皮細(xì)胞進(jìn)入上皮下層組織。 細(xì)菌在膜小泡中存活、繁殖并被釋放，被巨噬細(xì)胞吞噬或皮下淋巴組織吞噬。在巨噬細(xì)胞中生存，隨巨噬細(xì)胞進(jìn)入腸系膜淋巴結(jié)，最終侵入肝、脾、骨髓等不同器官或組織，進(jìn)一步產(chǎn)生毒素，從而引起各種臨床癥狀。巨噬細(xì)胞為沙門菌提供了逃避中性粒細(xì)胞和體液免疫的攻擊。 對(duì)本菌毒力因子的研究長(zhǎng)期以來未能取得突破性進(jìn)展，目前從毒力島及毒力基因水平研究其致病機(jī)理，

12、將認(rèn)識(shí)提高到新水平。腸桿菌科知識(shí)講座21致病機(jī)理 與侵襲有關(guān)。腸桿菌科知識(shí)講座21 （一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基 （二）生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵、IMViC試驗(yàn)、H2S陽性（三 糖鐵培養(yǎng)基）。 （三）血清學(xué)試驗(yàn)：玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型五、診斷腸桿菌科知識(shí)講座22 （一）分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基 （二）生化試驗(yàn)：糖發(fā)酵、沙門桿菌屬的分離鑒定程序腸桿菌科知識(shí)講座23沙門桿菌屬的分離鑒定程序腸桿菌科知識(shí)講座23復(fù)習(xí)思考題1.大腸桿菌和沙門氏菌的血清型表示方法。2.大腸桿菌和沙門氏菌的鑒別診斷要點(diǎn)。腸桿菌科知識(shí)講座24復(fù)習(xí)思考題1.大腸桿菌和沙門氏菌的血清型表示方法。腸桿菌科知第三章 巴氏桿菌科及相關(guān)屬巴氏桿菌屬里

13、氏桿菌屬嗜血桿菌屬腸桿菌科知識(shí)講座25第三章 巴氏桿菌科及相關(guān)屬巴氏桿菌屬腸桿菌科知識(shí)講座25 巴氏桿菌屬（Pasteurella) 本屬細(xì)菌已報(bào)道有20多種，多殺性巴氏桿菌(P.multocida)是本屬中最重要的畜禽致病菌，可引起多種動(dòng)物發(fā)生出血性敗血癥或傳染性肺炎。腸桿菌科知識(shí)講座26 巴氏桿菌屬（Pasteurel一、形態(tài)及染色兩端鈍圓，中央微凸的短桿菌G-菌，單個(gè)存在，有時(shí)成雙排列,病料涂片用瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí)，可見典型的兩極著色，培養(yǎng)物所作的涂片，兩極著色不明顯。巴氏桿菌腸桿菌科知識(shí)講座27一、形態(tài)及染色兩端鈍圓，中央微凸的短桿菌G-菌，單個(gè)存在，有二、培養(yǎng)特性 對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較嚴(yán)格

14、。在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，血液或血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好，長(zhǎng)成灰白色露珠狀針尖大小菌落，不溶血，麥康凱培養(yǎng)上不生長(zhǎng)。 腸桿菌科知識(shí)講座28二、培養(yǎng)特性 對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較嚴(yán)格。在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，血 1.菌體抗原 :16個(gè)型，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示 2.莢膜抗原 :多糖成分，有6個(gè)型， 大寫英文字母表示 我國(guó)分離的禽多殺性巴氏桿菌以5A為多 ，其次為8：A。豬以5：A和6:B為主三、血清型腸桿菌科知識(shí)講座29三、血清型腸桿菌科知識(shí)講座29 本菌抵抗力不強(qiáng)，普通消毒藥常用濃度對(duì)本菌都有很好的消毒力。在無菌蒸餾水和生理鹽水中很快死亡。凍干菌種在低溫中可保存長(zhǎng)達(dá)26年 。四、抵抗力腸桿菌科知識(shí)講座30四、抵抗力

15、腸桿菌科知識(shí)講座30腸桿菌科知識(shí)講座培訓(xùn)課件六、微生物學(xué)診斷 1.涂片或觸片鏡檢 染色（美藍(lán)或瑞氏），兩極著色 2.分離培養(yǎng) 麥康凱瓊脂不生長(zhǎng),血平板不溶血 3.動(dòng)物試驗(yàn) 病料懸液或培養(yǎng)物接種小白鼠,引起小白鼠迅速死亡 腸桿菌科知識(shí)講座32六、微生物學(xué)診斷 1.涂片或觸片鏡檢 腸桿菌科知病變組織分離培養(yǎng)純培養(yǎng)動(dòng)物接種觸片鏡檢革蘭氏染色，鏡檢生化鑒定腸桿菌科知識(shí)講座33病變組織分離培養(yǎng)純培養(yǎng)動(dòng)物接種觸片鏡檢革蘭氏染色，鏡檢生化鑒 里氏桿菌屬（Riemerella ) 鴨疫里氏桿菌（R. anatipestifer）是本屬的代表種，原名鴨疫巴氏桿菌，是雛鴨傳染性漿膜炎的病原菌。腸桿菌科知識(shí)講座34

16、 里氏桿菌屬（Riemerella ) 鴨一.形態(tài)及染色 菌體呈桿狀或橢圓形，多為單個(gè)，少數(shù)成雙或短鏈排列?？尚纬汕v膜，無芽胞，無鞭毛。 G-菌，兩極著色。腸桿菌科知識(shí)講座35一.形態(tài)及染色菌體呈桿狀或橢圓形，多為單個(gè)，少數(shù)成雙或短鏈排 營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在巧克力或胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA）平板上，呈圓形、微突起、表面光滑、奶油狀小菌落。生化試驗(yàn)大多陰性，不發(fā)酵葡萄糖和蔗糖，與多殺性巴氏桿菌相區(qū)別。 二.培養(yǎng)及生化特性腸桿菌科知識(shí)講座36 營(yíng)養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在三.血清型 21個(gè)型，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示，我國(guó)多數(shù)屬1型。腸桿菌科知識(shí)講座37

17、三.血清型 21個(gè)型，以阿拉伯?dāng)?shù)字表示，我國(guó)多數(shù)四.致病性主要感染雛鴨，尤其23周齡者，引起急性或慢性的敗血癥和漿膜炎。 腸桿菌科知識(shí)講座38四.致病性主要感染雛鴨，尤其23周齡者，引起急性或慢性的敗五.診斷涂片鏡檢:兩極著色分離培養(yǎng):巧克力培養(yǎng)基生化試驗(yàn):不發(fā)酵葡萄糖和蔗糖腸桿菌科知識(shí)講座39五.診斷涂片鏡檢:兩極著色腸桿菌科知識(shí)講座39 嗜血桿菌屬（Haemophilus） 嗜血桿菌是一群酶系統(tǒng)不完全的革蘭氏陰性桿菌，生長(zhǎng)需要血液中的生長(zhǎng)因子，尤其是X因子和V因子。 腸桿菌科知識(shí)講座40 嗜血桿菌屬（Haemophilus） 一、形態(tài)及染色 多為短桿狀，有時(shí)呈多形性，無鞭毛，無芽胞，新分離

18、的致病菌株有莢膜。G-菌，兩極著色。 腸桿菌科知識(shí)講座41一、形態(tài)及染色 腸桿菌科知識(shí)講座41二、培養(yǎng)特性 初次分離培養(yǎng)時(shí)供給5%10%CO2可促進(jìn)生長(zhǎng),本屬菌生長(zhǎng)需供給X因子和V因子（細(xì)菌呼吸過程中起遞氫作用的兩種脫氫輔酶），在巧克力平板上生長(zhǎng)較佳。腸桿菌科知識(shí)講座42二、培養(yǎng)特性 初次分離培養(yǎng)時(shí)供給5%10%CO2可促進(jìn) 本屬菌對(duì)外界的抵抗力不強(qiáng),分離到的嗜血桿菌要及時(shí)移植或凍干保存 。三、抵抗力腸桿菌科知識(shí)講座43三、抵抗力腸桿菌科知識(shí)講座43四、致病性 可引起人和多種動(dòng)物發(fā)病，其毒力因子包括莢膜、菌毛和內(nèi)毒素等。與獸醫(yī)有關(guān)的嗜血桿菌有：副豬嗜血桿菌：可引起豬的心肌炎、腹膜炎、胸 膜炎及關(guān)節(jié)炎等，常與豬流感病毒聯(lián)合引起豬流感。副禽嗜血桿菌：可引起雞傳染性鼻炎，導(dǎo)致產(chǎn)蛋量 迅速下降。腸桿菌科知識(shí)講座44四、致病性 可引起人和多種動(dòng)物