結(jié)直腸癌患者外周血CRDBPRNA表達的探索性研究

1、結(jié)直腸癌患者外周血CRDBPRNA表達的探索性研究研究背景大腸癌的發(fā)病現(xiàn)狀 全球結(jié)直腸癌每年發(fā)病新病例數(shù)達94萬，每年近50萬人死于結(jié)直腸癌。結(jié)直腸癌死亡居癌癥死因第3位。結(jié)直腸癌在我國也是最常見的惡性腫瘤之一，目前居惡性腫瘤發(fā)病率第4位。近年來，結(jié)直腸癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢，此趨勢在大中城市較明顯。結(jié)直腸癌發(fā)病與生活方式的改變及膳食結(jié)構(gòu)不合理密切相關(guān)。隨著人們生活方式、飲食結(jié)構(gòu)的改變、期望壽命的提高，大腸癌的發(fā)病率還將進一步提高。 新發(fā)病數(shù) 死亡數(shù)Lung & bronchus - 1.35millionBreast - 1.15millionColon & rectum - 1.02mi

2、llionStomach - 934,000Liver - 626,000Lung & bronchus - 1.18millionStomach - 700,000Liver - 598,000Colon & rectum 529,000Breast 411,000Parkin DM, CA Cancer J Clin. 2005 Worldwide-2002研究背景研究背景TNM分期與結(jié)直腸癌存活率的關(guān)系StageTMN5 yr Survival rates0，Tis/1N0M0 90 % T1/2N0M08590%A/B T3/4N0M07075 %AT1/2N1M7791%BT3/4N

3、1M0 54-63%C T4N2 M02637% AnyT AnyN M15cm 14例 選取寧夏醫(yī)學院附屬醫(yī)院2006年1月2006年4月門診就診者，經(jīng)腸鏡活檢確診良性腸道疾病患者15例對照組（共35例）選取寧夏醫(yī)學院附屬醫(yī)院2006年1月2006年4月門診就診者健康體檢者20例對照組試驗方法熒光定量巢式RT-PCR（FQ-nRT-PCR） 實驗操作步驟病例選擇采集外周靜脈血離心提取淋巴細胞RNA提取及定量：采用Trizol總RNA提取液提取細胞總RNA 巢式熒光定量PCR結(jié) 果樣本總RNA的提取質(zhì)量和純度 圖中28s、18s二條清晰的條帶 和稍欠清晰的5s條帶，說明提 取的RNA樣品純度較

4、高，完整 性較好，無DNA污染，無降解。 圖1 RNA提取結(jié)果定性檢測結(jié)果 M: DNA marker0: RNA fragment amplified from samples (negative)1-10：CRD-BP RNA fragment amplified from samples (positive) Inner 圖2 結(jié)直腸癌外周血CRD-BP RNA檢測陽性樣本電泳圖CRD-BP RNA陽性樣本的動力曲線 圖3熒光定量PCR檢測樣本CRD-BP RNA動力曲線圖CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌患者及對照組的表達 組別例數(shù)CRD-BP RNA (n)陽性(n)陰性(n)陽性率（%

5、）結(jié)直腸癌組 3210*2231.25 對照組健康體檢 200200.00良性疾病組150150.00與健康對照及良性腸道疾病比較 *P0. 05 CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌不同Dukes分期中的表達水平的比較臨床分期例數(shù)(n)CRD-BP RNA 陽性(n)陰性(n)陽性率(%)A+B期 2031715.00C+D期 12 7*558.30與A+B期比較 * P0. 05CRD-BP RNA在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌患者中的表達水平的比較與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者比較 * P0. 05病理特征 例數(shù)（n）CRD-BP RNA 陽性(n)陰性(n)陽性率（%）淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有127*558.30無203

6、1715.00討 論 CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌患者外周血中的陽性表達率為31. 25%（10/32），20健康體檢者和15例良性結(jié)直腸疾病患者外周血中均未檢出，差異具有統(tǒng)計學意義(P0. 05）， 提示CRD-BP RNA表達與以上兩個因素無關(guān)。CRD-BP RNA在不同分化程度、不同浸潤深度、不同腫瘤大小的結(jié)直腸癌患者外周血中的表達差異無統(tǒng)計學意義(P0. 05)，提示CRD-BP RNA表達可能與以上因素無關(guān)。CRD-BP RNA的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),同時也與臨床分期相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者外周血中陽性表達率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，在+期患者外周血中的陽性表達率明顯高于+期，差異有統(tǒng)計學意義(P0. 05)，提示CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。以上結(jié)果提示，CRD-BP RNA有可能成為新的結(jié)直腸癌腫瘤指