骨髓形態(tài)學(xué)檢查課件

1、 骨 髓 細(xì) 胞 形 態(tài) 學(xué) 檢 查 珠 江 醫(yī) 院 劉蘭平 骨 髓 細(xì) 胞 形 態(tài) 學(xué) 檢 查 珠 江 第一節(jié) 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的 臨床應(yīng)用 一、臨床應(yīng)用： 1、診斷造血系統(tǒng)疾病及非造血系統(tǒng)疾病 明確診斷： 各型白血病、多發(fā)性骨髓瘤、巨幼細(xì) 胞性貧血、ITP、惡性組織細(xì)胞病、 鐵粒幼細(xì)胞性貧血、尼曼-匹克病、 原發(fā)性轉(zhuǎn)移癌、黑熱病或瘧疾等。第一節(jié) 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的 臨床應(yīng)用 一、臨床應(yīng)用： 輔助診斷： 增生性貧血、粒細(xì)胞 缺乏癥、 類白血病 反應(yīng)等。 2、分析治療效果及預(yù)后。 動態(tài)觀察治療后骨髓變化，如CR、 NR等。 輔助診斷： 增生性貧二、 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法 經(jīng)骨髓穿刺涂片染色，在普通光

2、學(xué)顯微鏡下觀察血細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)。 電鏡-透射、掃描 位相 熒光二、 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查方法 經(jīng)骨髓穿刺涂片染色，在普三、 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的適應(yīng)癥及禁忌癥 適應(yīng)癥： （1）原因不明的發(fā)熱、惡病質(zhì)； （2）肝、脾、淋巴結(jié)腫大； （3）外周血中出現(xiàn)幼稚細(xì)胞某一系統(tǒng) 的細(xì)胞增減或溶血造成細(xì)胞減少。 禁忌癥： （1）凝血因子缺乏，如血友病甲等； （2）晚期妊娠婦女應(yīng)慎重。三、 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的適應(yīng)癥及禁忌癥 適應(yīng)癥：第 二 節(jié) 血細(xì)胞的生成、發(fā)育過程中的形態(tài)學(xué)特征及一般規(guī)律 一、血細(xì)胞的生成 造血微環(huán)境 全能干細(xì)胞 各系造血祖細(xì)胞 造血刺激因子第 二 節(jié) 血細(xì)胞的生成、發(fā)育過程中的形態(tài)學(xué)特征及二、血細(xì)胞的分

3、類及命名 1、分化成：紅細(xì)胞系統(tǒng) 粒細(xì)胞系統(tǒng) 淋巴細(xì)胞系統(tǒng) 單核細(xì)胞系統(tǒng) 巨核細(xì)胞系統(tǒng) 漿細(xì)胞系統(tǒng) 其他細(xì)胞二、血細(xì)胞的分類及命名 1、分化成：紅細(xì)胞系統(tǒng)2、發(fā)育過程： 原始 幼稚 成熟2、發(fā)育過程： 原始 幼稚 三、細(xì)胞形態(tài)變化及一般規(guī)律： 1、胞體 : （1）、大小：大小 巨核細(xì)胞小大； 早幼粒原粒； （2）、形態(tài)：圓橢圓; 圓不規(guī)則三、細(xì)胞形態(tài)變化及一般規(guī)律： 1、胞體 : 2、胞核 （1）、大?。捍笮?巨核細(xì)胞小大； 紅細(xì)胞大無） （2）、核形：圓 分葉不規(guī)則 （3）、染色質(zhì)： 細(xì)粗疏松密集 （4）、核仁：清晰模糊消失 （5）、核膜：不明顯明顯2、胞核 （1）、大小：大小 3、胞漿量

4、（1）、量： 少多 （2）、顏色： 深淺 （3）、顆粒： 無有 （4）、空泡： 4、胞核漿之比： 大小 3、胞漿量 （1）、量： 少多 （2一、骨髓涂片檢查 低倍鏡檢查 油鏡檢查 細(xì)胞化學(xué)染色 檢查結(jié)果的分析第三節(jié)、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的 內(nèi)容與方法一、骨髓涂片檢查第三節(jié)、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的 內(nèi)容與方結(jié)果報告 1、低倍鏡檢查： （1）、觀察骨髓涂片。 取材：骨髓小粒、脂肪小滴。 制片：厚薄，頭、體、尾分布。 染色：細(xì)胞著色情況。 （2）、確定骨髓增生程度： （3）、觀察計數(shù)巨核細(xì)胞： A、數(shù)量、形態(tài)。 B、發(fā)育成熟程度。 （4）、觀察有無特殊細(xì)胞：成堆出現(xiàn)或 體積較大細(xì)胞結(jié)果報告 1、低倍鏡檢查：2、

5、油鏡檢查： （1）、有核細(xì)胞分類： 計數(shù)200-500個有核細(xì)胞，計算 各系統(tǒng)各階段細(xì)胞百分率。 （2）、計數(shù)粒紅比例（ME） （3）、觀察細(xì)胞形態(tài)有無異常 （4）、觀察有無其他特殊細(xì)胞及寄生蟲。2、油鏡檢查： （1）、有核細(xì)胞分類：3、正常骨髓象： a) 增生活躍 b) 粒紅比值正常（ME 24：1） c) 粒系增生良好： a.占有核細(xì)胞的4060%； b.各階段細(xì)胞比例適當(dāng)； c.細(xì)胞形態(tài)無明顯異常。3、正常骨髓象： a) 增生活躍d) 紅系增生良好： a.占有核細(xì)胞的20%左右 b. 各階段比例適當(dāng)； c形態(tài)無明顯異?；蚣t細(xì)胞形態(tài)大致正 常。 e) 淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞百分率、 形態(tài) 無異

6、常（主要是成熟細(xì)胞）d) 紅系增生良好： a.占有核細(xì)胞的20%左右 b.f) 巨核細(xì)胞 a.數(shù)量/全片：7-35個； b.各階段情況正常； c.血小板形態(tài)正常。 g)其他細(xì)胞: 漿細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞及組織嗜堿細(xì)胞 未見異常。 h)無特殊細(xì)胞及寄生蟲。f) 巨核細(xì)胞 a.數(shù)量/二、血涂片檢查： 1. 低倍鏡檢查： （1）、涂片、染色情況； （2）、有無大的異常細(xì)胞； （3）、約略估計血小板數(shù)及其形態(tài)； （4）、寄生蟲；二、血涂片檢查： 1. 低倍鏡檢查：2. 油鏡檢查： （1）、分類計數(shù)100個WBC （注意形態(tài)及有無異常細(xì)胞）； （2）、注意成熟紅細(xì)胞的形態(tài) （如有幼稚紅細(xì)胞應(yīng)在計數(shù)100個 W

7、BC中記幼稚紅細(xì)胞的數(shù)目 及其階段）； （3）、粗略估計血小板數(shù)目； （4）、有無寄生蟲。2. 油鏡檢查： （1）、分類計數(shù)100個WB三、常用的血細(xì)胞化學(xué)染色：定義： 血細(xì)胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，應(yīng)用特殊的染色方法，以觀察單個細(xì)胞內(nèi)在的生化特性，了解它們的代謝活動，生理功能和病理變化，鑒別各種類型血液細(xì)胞。三、常用的血細(xì)胞化學(xué)染色：定義：（一） 過氧化物酶染色 POX 原理 H2O2 細(xì)胞內(nèi) POX O 聯(lián)苯胺 O 聯(lián)苯胺藍(lán) + 亞硝基氰化鈉 暗藍(lán)色顆粒 定位于胞漿內(nèi) 結(jié)果 粒系： 強(qiáng)陽性 單核系：弱陽性 淋巴系：陰性 臨床意義鑒別急粒和急淋時最有價值（一） 過氧化物酶染色 POX 原理

8、 （二） 中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色 （NAP） （鈣鈷法） 原理 -甘油磷酸鈉 NAP 甘油+磷酸鈉 NaHPO4 + Ca（NO3）2+（NH4） SCO （棕黑色沉著于胞漿中） 結(jié)果 NAP主要存在于成熟中性粒細(xì)胞， 除巨噬細(xì)胞可呈陽性反應(yīng)外，其 他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。（二） 中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色 （NAP） （鈣鈷1、胞漿中出現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽性。2、反應(yīng)強(qiáng)度分為五級： - + + + + 淡紅 淡灰 灰黑 淺棕黑 深棕黑色3、百分率：計數(shù)100個成熟中性粒細(xì)胞，算其陽 性率。4、積分法：計數(shù)100個成熟粒細(xì)胞，按反應(yīng)強(qiáng) 度作出分級，將其百分率乘以級數(shù) ，然后相加。1、胞漿中出

9、現(xiàn)灰色到棕黑色沉淀者為陽性。2、反應(yīng)強(qiáng)度分為五級參考值 正常：百分率10-40%， 積分40-80分 臨床意義 1、 區(qū)別CML和類白血病反應(yīng) 積分為0 積分200分 2、 AA時 PNH 3、 化膿性感染 病毒性感染時參考值 正常：百分率1第四節(jié) 常見血液病的血液學(xué)特點(diǎn) 一、 貧血 貧血 按骨髓分類報告可分為： 增生性貧血 增生不良性貧血 1、 增生性貧血： 主要見于缺鐵性貧血、溶血性貧血、 巨幼細(xì)胞性貧血、失血性貧血第四節(jié) 常見血液病的血液學(xué)特點(diǎn) 一、 貧血血象 （1）、Hb， RBC （2）、RBC形態(tài)有改變； （3）、網(wǎng)織紅細(xì)胞增多。 骨髓象 （1）、增生明顯活躍； （2）、粒紅比例減

10、低； （3）、紅系明顯增生30%，以中晚幼紅細(xì)胞 為主，巨幼紅可見巨大幼稚紅細(xì)胞；血象 （1）、Hb， RBC2、增生不良性貧血（再障） 可分為急性再障和慢性再障兩種 （1）急性再障 血象 全血細(xì)胞減少； 骨髓象 A、增生減低或重度減低 B、粒紅兩系均 C、巨粒細(xì)胞明顯減少 D、非造血細(xì)胞2、增生不良性貧血（再障） 可分為急性再障和慢性再（2）慢性再障 血象 全血細(xì)胞 發(fā)生的先后及程度 有不同 骨髓象 病灶性造血，結(jié)果差異大，需 多部位穿刺和活檢。（2）慢性再障 血象 二、白血病 白血病是造血系統(tǒng)的一種惡性腫瘤，其特點(diǎn)為：（1） 白血病細(xì)胞呈現(xiàn)異常增大伴分化成熟障礙；（2） 骨髓及外周血中出現(xiàn)

11、血細(xì)胞質(zhì)或量的異常；（3） 臨床常有貧血、發(fā)熱、出血和肝、脾、 淋巴結(jié)腫大等。 二、白血病 白血病是造血系統(tǒng)的一種惡性腫瘤， （一）分類 1、 臨床分類：急性白血病 慢性白血病 特殊類型白血病 2、FAB分類： 急性白血病的形態(tài)學(xué)分類方案： （1） 急性淋巴細(xì)胞白血?。↙1；L2；L3） （2） 急性非淋巴細(xì)胞白血病(M1M7) 骨髓增生異常綜合征（MDS） （一）分類 1、 臨床分類：急性白血病 （二）白血病分型 MICM分型法 MMorphology 形態(tài)學(xué) IImmunology 免疫學(xué) CCytogenetics 細(xì)胞遺傳學(xué)（以細(xì)胞染 色體為基礎(chǔ)） MMolecularbiology

12、分子生物學(xué) 對進(jìn)一步識別白血病的本質(zhì)，研究白血病發(fā)病機(jī)制和生物學(xué)特性有重要意義，同時對指導(dǎo)臨床治療和判斷預(yù)后有實(shí)用價值。（二）白血病分型 MICM分型法（三）急性白血病的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)： 1、急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL） 血象 （1）Hb、RBC：中度，重度減少 血片： 可見幼紅細(xì)胞 （2）WBC： 部分或正?；?血片分類： 原+幼為主 （3）血小板 或（三）急性白血病的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)： 1、急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋ骨髓 （1）增生極度活躍或明顯活躍 （2）淋巴細(xì)胞過度增生，以原+幼為主， 可達(dá)90以上；根據(jù)形態(tài)學(xué)可分為 三個亞型 （ L1，L2，L3） （3）粒紅系受抑制，巨核細(xì)胞 或 無。骨髓 （1

13、）增生極度活躍或明顯活躍 免疫學(xué)分型 CD19、HLA-DR B-ALL CD7、LEU9 T-ALL 細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué) ALL染色體異常，異?？蓪?dǎo)致基因受 累。 免疫學(xué)分型 CD19、HLA-DR B-2、急性非淋巴細(xì)胞白血?。ˋNLL） 急性粒細(xì)胞性白血?。∕1， M2） 急性單核細(xì)胞性白血病 （M5） 血象 （1）Hb、 RBC 或 （2）WBC（2050）109 /L 間， 亦可正?；驕p低，但M5。 分類以原始細(xì)胞為主，急粒約 50%可見Auer小體。 （3）血小板2、急性非淋巴細(xì)胞白血?。ˋNLL） 急性粒細(xì)胞性白血?。∕骨髓象 （1） 增生極度活躍或明顯活躍； （2） 粒系或

14、單核系極度增生， 急粒以原始粒細(xì)胞為主，可 0.30， 多見Auer小體； 急單以原單和幼單為主，可見Auer小體。 （3） 紅系明顯受抑制 急單時，粒、紅兩系均明顯受抑。 （4） 巨核細(xì)胞 或無骨髓象 （1） 增生極度活躍或明顯活躍； 急粒急單根據(jù)分化程度又可分為： 未分化型 M1， M5a 部分分化型 M2 ， M5b 急粒急單根據(jù)分化程度又可分為： 未分化型 M1， M免疫學(xué)分型 CD34 、CD33 、CD13 、CD11 、CD15 等抗粒系單克隆抗體，其中CD33和CD13 在髓系全過程均存在。 根據(jù)免疫學(xué)亦可區(qū)別M1、M2 ； CD33陽性患者療效好，緩解率高。免疫學(xué)分型 CD3

15、4 、CD33 、CD13 細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué) 染色體異常 基因重組及融合基因形成 易位導(dǎo)致基因重排及融合基因形 成。細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué) 染色體異常二、慢性白血病 慢性粒、 淋、 單核細(xì)胞白血病 特點(diǎn)： 血象 （1）Hb，RBC （2）NBC。 慢粒50109 /L； 慢淋（15- 100）109 /L 分類中以中幼以下為主。 （3）血小板或正常。二、慢性白血病 慢性粒、 淋、 單核細(xì)胞白血病骨髓象 （1）增生極度活躍或明顯活躍，粒紅比 例 （2）某一系細(xì)胞極度增生，但以中幼以 下為主。 （3）紅系受抑制； （4）巨核正常或 ，晚期 慢粒會在晚期發(fā)生急變骨髓象 （1）增生極度活躍或明顯

16、活躍，粒紅比 三、骨髓增生異常綜合癥 是一組以難治性貧血或伴有外周血細(xì)胞減少而骨髓增生為特征的造血干細(xì)胞克隆性疾病，又有人稱之為白血病前期、難治性貧血等。 三、骨髓增生異常綜合癥 是一組以難治性貧血或伴有外（四）原發(fā)性血小板減少性紫癜（TIP） 一種自身免疫性疾病，特點(diǎn)為患者體內(nèi)產(chǎn)生抗血小板抗體，致使血小板壽命縮短，破壞過多。特點(diǎn)： （1）血小板計數(shù) （2）骨髓中巨核細(xì)胞數(shù)量 有成熟障礙。 （四）原發(fā)性血小板減少性紫癜（TIP） 一種自身免疫（五）、多發(fā)性骨髓瘤（MM）特點(diǎn)：（1）紅細(xì)胞冥錢狀排列，ESR明顯增快；（2）骨髓中漿細(xì)胞異常增生，可見骨髓 瘤細(xì)胞，可90%。（五）、多發(fā)性骨髓瘤（MM）特點(diǎn)：經(jīng)