濕熱滅菌講稿

1、濕熱滅菌工藝的驗證標準與方法第一頁，共三十九頁。GMP的新增內(nèi)容63條：任何滅菌工藝在投入使用前，都必須通過物理檢測手段驗證其對產(chǎn)品的適用性及滅菌效果，即每種被滅菌產(chǎn)品和物品的所有部位都達到了設定的滅菌要求，必要時還應進行生物指示劑試驗，作為滅菌監(jiān)控的補充手段。64條：應對滅菌工藝的有效性定期進行再驗證（每年至少一次）。設備有重大變更后，應進行再驗證。應保存再驗證的結果和記錄。65條：所有的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設計應確保滅菌完全。第二頁，共三十九頁。GMP的新增內(nèi)容66條：應通過驗證確認滅菌設備腔室內(nèi)待滅菌產(chǎn)品和物品的裝載方式。67條：應按供應商的要

2、求保存和使用生物指示劑，并通過陽性對照來確認其質(zhì)量。使用生物指示劑時，應采取嚴格措施，防止由其所致的微生物污染。68條：應有明確區(qū)分已滅菌產(chǎn)品和待滅菌產(chǎn)品的方法。每一車（盤或其它裝載設備）產(chǎn)品或物料均應貼簽，清晰地注明品名、批號并標明是否已經(jīng)滅菌。必要時，可用濕熱滅菌指示帶加以區(qū)分。69條：每一個滅菌批次都應有滅菌記錄。應把滅菌記錄作為該批產(chǎn)品放行的依據(jù)。第三頁，共三十九頁。新版GMP（歐盟GMP）：第一條 無菌藥品是指法定藥品標準中列有無菌檢查項目的制劑和原料藥，包括非經(jīng)腸道制劑、無菌的軟膏劑、眼膏劑、混懸劑、乳劑及滴眼劑等。第二章 原則 第四條 無菌藥品的生產(chǎn)必須滿足其質(zhì)量和預定用途的要求

3、，最大限度降低微生物、各種微粒和熱原的污染。生產(chǎn)人員的技能、所接受的培訓及其工作態(tài)度是達到上述目標的關鍵因素，無菌藥品的生產(chǎn)必須嚴格按照精心設計并經(jīng)驗證的方法及規(guī)程進行，產(chǎn)品的無菌或其他質(zhì)量特性絕不能只依賴于任何形式的最終處理或成品檢驗。 第五條 無菌藥品按生產(chǎn)工藝可分為兩類：采用最終滅菌工藝的為最終滅菌產(chǎn)品；部分或全部工序采用無菌生產(chǎn)工藝的為非最終滅菌產(chǎn)品。第四頁，共三十九頁。新版GMP（歐盟GMP）：第十二章 最終滅菌熱力滅菌熱力滅菌通常有濕熱滅菌和干熱滅菌。第七十三條 在驗證和生產(chǎn)過程中，用于監(jiān)測或記錄的溫度探頭與用于控制的溫度探頭應分別設置，設置的位置應通過驗證確定，每次滅菌均應記錄滅

4、菌過程的時間/溫度曲線。如采用自控和監(jiān)測系統(tǒng)，該系統(tǒng)應經(jīng)過驗證，以確保符合關鍵工藝的要求。該系統(tǒng)應能記錄系統(tǒng)本身以及工藝運行過程中出現(xiàn)的故障，操作人員應監(jiān)控這類故障的發(fā)生。應定期將獨立的溫度顯示器的讀數(shù)與滅菌過程中記錄獲得的圖譜對照第五頁，共三十九頁。新版GMP（歐盟GMP）：第七十四條 可使用化學或生物指示劑監(jiān)控滅菌工藝，但他們不得替代物理測試。第七十五條 滅菌時間應從能保證所有被滅菌品都達到設定的滅菌溫度后才開始計算。每種裝載方式所需升溫時間均須測定并記錄。第七十六條 應有措施防止滅菌冷卻過程中已滅菌物品遭受污染，任何與產(chǎn)品相接觸的冷卻用介質(zhì)（液體或氣體）應經(jīng)過滅菌或除菌處理，除非能證明生

5、產(chǎn)過程中可剔除任何滲漏的產(chǎn)品。第六頁，共三十九頁。新版GMP（歐盟GMP）：濕熱滅菌 第七十七條 濕熱滅菌工藝監(jiān)控的參數(shù)應包括滅菌溫度、時間和壓力。對腔室底部裝有排水口的滅菌柜而言，可能需要測定并記錄該點在滅菌全過程中的溫度數(shù)據(jù)。如滅菌工藝中包括抽真空操作，則應經(jīng)常對腔室作檢漏測試。第七十八條 被滅菌物品如不密封容器中的產(chǎn)品，則應用合適的材料將其適當包扎，所用材料及包扎方式應有利于空氣排放，蒸汽穿透并在滅菌后能防止污染。在規(guī)定的溫度和時間內(nèi)，被滅菌物品所有部位均應與滅菌介質(zhì)充分接觸。第七頁，共三十九頁。GMP的新增內(nèi)容濕熱滅菌參數(shù)應包括滅菌時間、溫度或壓力 應經(jīng)常對腔室作檢漏測試 被滅菌物品應

6、用合適的材料適當包扎 直接接觸產(chǎn)品的包裝容器、灌裝設備、膠塞及可能與產(chǎn)品接觸的工器具等的濕熱滅菌應采用純蒸汽 第八頁，共三十九頁。國際法規(guī)和標準ISO 11135ISO 17665PDA No.1 技術文件Validation of Moist Heat Sterilization Processes: Cycle Design, Development Qualification and Ongoing Control Technical Report No. 1 (2007 Revision)British Standard BS EN 285:2008 Sterilization-Ste

7、am sterilizers-Large sterilizersEN 554FDA CGMP（2004）EU CGMP（2008）滅菌技術和驗證指南日本其它第九頁，共三十九頁。目的獲得有效合理的滅菌參數(shù)證明濕熱滅菌設備對被滅菌品的適用性不同滅菌程序的可靠性和重現(xiàn)性第十頁，共三十九頁。濕熱滅菌法特點蒸汽熱穿透性強 滅菌效率高溫度相對較低滅菌時間相對短滅菌過程不產(chǎn)生任何化學物理污染滅菌設備控制參數(shù)少，運行穩(wěn)定，方便管理藥物制劑生產(chǎn)過程中最常用的方法第十一頁，共三十九頁。術語濕熱滅菌介質(zhì)：飽和蒸汽:是指飽和狀態(tài)下的蒸汽，是由氣體分子之間的熱運動現(xiàn)象造成的過熱水:指水達沸點（100）卻沒有沸騰的水,如

8、果加入其他物質(zhì)會突然暴沸D值(Decimal reduction time)：就是在一定的處理環(huán)境中和在一定的熱力致死溫度條件下某細菌數(shù)群中每殺死90%原有殘存活菌數(shù)時所需要的時間。Z值是指滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。 F值（F0值）在一定溫度下殺滅一定濃度微生物所需加熱的時間（min）。通常指在120加熱致死狀態(tài)。是加熱殺菌的致死值，可用來衡量殺菌強度。第十二頁，共三十九頁。術語蒸汽的質(zhì)量干燥值（Dryness value ）不冷凝氣體（Noncondesable Gases ）飽和蒸汽（Saturated Steam ）過

9、度殺滅程序（Overkill Approach）預真空程序（Prevacuum Process）蒸汽空氣混合氣體（Steam- Air Mixture）滅菌 過熱水程序（Superheated Water Process） 無菌保證水平（Sterility Assurance Level, SAL） 第十三頁，共三十九頁。滅菌法選擇的基本原則第十四頁，共三十九頁。滅菌法選擇的基本原則過度殺滅法。假設：N0106D1211分鐘Z10將數(shù)據(jù)代入公式，得L=1，再按計算，達到微生物殘存概率為一百萬分之一所需的物理及生物殺滅力如下：物理殺滅力FPHY為12分鐘，生物殺滅力 FBIO D121（LogN

10、0Log NF）12分鐘第十五頁，共三十九頁。滅菌法選擇的基本原則 殘存概率法假設產(chǎn)品的生物負荷測試中：N0102D1211分鐘Z10經(jīng)滅菌后，微生物殘存概率NF小于10-6利用上面的數(shù)值，可以計算出微生物殘存概率小于10-6所需的FPHY和FBIO如下：F0FPHYFBIOD121（LogN0Log NF）8分鐘第十六頁，共三十九頁。滅菌法選擇的基本原則裝載類型的界定考慮到裝載的特性及特定裝載的方式。例如，多孔/固體物品通常包括但不局限于以下物品：過濾器（薄膜式過濾器、筒式過濾器、預過濾器等）膠塞和其它聚合物密封件管道和軟管工作服、口罩清潔用具設備更換部件，如藥液灌裝液體裝載通常包括但不局限

11、于以下物品：已灌裝入最終容器（如小瓶、軟包裝、玻瓶或安瓿）的產(chǎn)品（溶液、混懸劑或乳劑）已檢驗或加工后剩下的可能含有致病菌的廢液。第十七頁，共三十九頁。微生物的種類和數(shù)量:微生物的種類、發(fā)育階段、微生物的數(shù)量等。蒸汽性質(zhì)：蒸汽有飽和蒸汽、濕飽和蒸汽和過熱蒸汽。熱壓滅菌應采用飽和蒸汽。藥品性質(zhì)和滅菌時間:一般而言，滅菌溫度愈高，時間愈長，藥品被破壞的可能性愈大。因此，在設計滅菌溫度和時間時必須考慮藥品的穩(wěn)定性。其他：介質(zhì)PH等影響濕熱滅菌的因素第十八頁，共三十九頁。濕熱滅菌工藝之一美國FDA規(guī)定的殘存概率法滅菌過程8 F012分鐘適用于熱穩(wěn)定性不很好的產(chǎn)品通過控制工藝過程的微生物污染和滅菌工藝參數(shù)

12、使產(chǎn)品無菌無菌保證值不小于6第十九頁，共三十九頁。濕熱滅菌工藝之二過度殺滅法F0不低于12熱穩(wěn)定性好的產(chǎn)品以徹底殺滅任何污染的微生物為實現(xiàn)無菌的手段無菌保證值不小于6第二十頁，共三十九頁。其它濕熱滅菌工藝F0值低于8的滅菌工藝熱穩(wěn)定性很差的產(chǎn)品以無菌生產(chǎn)工藝為基礎，滅菌是提高無菌保證水平的輔助手段不計算F0值，污染概率不大于0.1%除血液制品外，發(fā)達國家這類大容量注射劑幾乎沒有小容量注射劑也少見第二十一頁，共三十九頁。幾種常用的濕熱滅菌法液體注射劑產(chǎn)品的滅菌空氣蒸汽混合物（SAM）過熱水噴淋法重力置換法（不推薦）第二十二頁，共三十九頁。下排式蒸汽滅菌柜（重力置換法）下排式蒸汽滅菌柜工作原理圖1

13、、蒸汽進入2、高溫度蒸汽比重小，在上部3、蒸汽不斷進入4、冷凝水及低溫度空氣在底部被擠走Gravity Displacement Autoclave在相同的溫度和壓力，空氣是事實上比蒸汽密度的平均值的1.5倍。第二十三頁，共三十九頁。過熱水噴淋滅菌柜-外形熱交換器由不銹鋼制造、衛(wèi)生級、雙功能（加熱及冷卻），有效，安全。湍流、速度、液體循環(huán)交換（蒸汽和冷卻水）自動實現(xiàn)熱交換器內(nèi)部的清潔?？刂乒裥l(wèi)生離心泵：保持水的高速循環(huán)，這對實現(xiàn)溫度的均一性至關重要。CA除菌過濾器第二十四頁，共三十九頁。過熱水噴淋/溫度-壓力曲線Temperature/Pressure Chart 溫度/壓力表Hot Wate

14、r Shower Process 熱水淋浴的過程Temperature (C)Pressure (bar)Time (min)02040601208010000.51.01.52.02.5140120100 80 60 40 20 0排氣Fo第二十五頁，共三十九頁。熱水噴霧消毒器本圖為旋轉(zhuǎn)式噴淋滅菌柜水噴淋-高效熱交換，程序短可用于乳劑、氨基酸等配外部雙管板熱交換器過程：進PW蒸汽加熱循環(huán)水 在過壓保護條件下 水噴淋產(chǎn)品 達到滅菌溫度-保溫冷卻平衡壓力-出料轉(zhuǎn)速：1-5轉(zhuǎn)/分產(chǎn)品溫差可控 0.5被滅菌品純化水門密封條噴淋管固定架傳動裝置用脂肪乳劑等轉(zhuǎn)籠熱水噴霧消毒器第二十六頁，共三十九頁。過熱

15、水旋轉(zhuǎn)噴淋滅菌程序Initialization 程 序 開 始Filling PW 進PW到設定液位Heating 逐步加熱加壓縮空氣Sterilizing 滅菌壓縮空氣Draining 排放氣/水Safety exhaust check 0.1 bar 安全壓力檢查Safety cooling Check -0.07MPa進蒸汽： 運行3次121保溫至設定的時間排氣抽真空干燥約15分鐘至設定的滅菌溫度進過濾氣體平衡壓力程序結束第三十一頁，共三十九頁。脈動真空蒸汽滅菌程序溫度脈動真空：抽真空-進蒸汽-抽真空-進蒸汽 預真空升溫保溫干燥降溫排氣結束123真空蒸汽脈動滅菌器100121第三十二頁，

16、共三十九頁。滅菌工藝的驗證及其驗證文件DQ在選用蒸汽滅菌器時，首先應根據(jù)產(chǎn)品的工藝來考慮蒸汽滅菌器的選型，主要是裝量的大小、滅菌溫度與時間的可控制性、滅菌程序的可選擇性、滅菌時腔室內(nèi)溫度的一致性、升溫與降溫速率的穩(wěn)定性、控制及記錄系統(tǒng)的可靠性等。首先對所選滅菌器進行確認（IQ/OQ）例如：空氣過濾器的泄漏測試容積、真空度、壓力以及泄漏率測試如有夾層，必須消除運行風險蒸汽質(zhì)量測試傳感器的測試驗證設備的校準其他第三十三頁，共三十九頁。滅菌工藝的驗證及其驗證文件PQ空載熱分布試驗滿載熱分布試驗熱穿透和生物挑戰(zhàn)試驗升溫、降溫速度對生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品的影響；噴淋冷卻速度對被滅菌產(chǎn)品的影響；冷卻用水是否能有效

17、地控制微生物溫度測量系統(tǒng)（包含滅菌器的溫度傳感器和驗證用多點溫度測試儀）是否提供每一個測點的打印數(shù)據(jù)；溫度測量系統(tǒng)是否都進行校準；溫度測量系統(tǒng)的校準是否符合相關法規(guī)和標準的規(guī)定第三十四頁，共三十九頁。滅菌工藝的驗證及其驗證文件PQ生物指示劑的使用對過度殺滅的風險分析及管理；滅菌后的干燥程序?qū)缇Ч挠绊懷芯慨a(chǎn)品耐受性變更導致的滅菌工藝變化總體評價并指導最佳滅菌效果的裝載量驗證及其相關項目的培訓等第三十五頁，共三十九頁。滅菌工藝的驗證及其驗證文件滅菌工藝的驗證溫度的變化以及變化量裝載空氣移除速度生物指示劑的選擇及位置確認程序控制的確定（包括冷點）其他第三十六頁，共三十九頁。滅菌工藝的驗證及其驗證文件驗證文件除常規(guī)程序、步驟及文件外，還應注意：有必要繪制滅菌器的相關管線及控制點示意圖滅菌器制造商及信息滅菌器的OQ文件首次滅菌的完整信息及文件產(chǎn)品的安全耐受性報告蒸汽、水、壓縮空氣系統(tǒng)的質(zhì)量測試報告完整的操作記錄任何變更、任何故障的處理報告