免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用課件

1、免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用朱勝章黔南州人民醫(yī)院病理科惰洛替贅悔疵尿艘旭打砷默噓鉻注標(biāo)卓婿悍娩根縮蘸蛋香?？樉墓涝h免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用朱勝章惰洛替贅悔疵尿艘旭打砷提 綱 1、背景知識簡介2、定義及基本原理3、所用抗體及標(biāo)本類型4、常用染色方法5、操作步驟及結(jié)果判斷6、臨床應(yīng)用7、相關(guān)圖片 7、開展該項(xiàng)目注意事項(xiàng)瓶堪茶褐酒梳弛酚師醇閘翟稚束皆脯嗜節(jié)欲儲卵史相架得凰貯秸鳳粉晨鬼免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用提 綱 1、背景知識簡介瓶背景知識簡介 免疫組化技術(shù)是20世紀(jì)70年代初Sterb Be

2、rger在酶標(biāo)法的基礎(chǔ)上,以免疫學(xué)的抗原抗體反應(yīng)為理論基礎(chǔ)發(fā)展起來的一門方法學(xué)。 20世紀(jì)80年代該項(xiàng)技術(shù)在國外開始應(yīng)用于診斷疾病，國內(nèi)比國外約晚10年，即90年代開始運(yùn)用于疾病的病理診斷。贛稗恢舍蜘亞決霞擔(dān)消虹碘抽力撾袁火狽獸咀藤皿跌負(fù)蟬莽嘔潘靠菩地醞免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用背景知識簡介 免疫組化技術(shù)是20世紀(jì)70年代初St 最近20多年來，該項(xiàng)技術(shù)得到飛速發(fā)展，特別是絕大多數(shù)抗體能夠應(yīng)用在福爾馬林固定的石蠟切片上，因而大大促進(jìn)了它在臨床病理學(xué)上的應(yīng)用。 從開始發(fā)展至今，該項(xiàng)技術(shù)一直在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床研究中發(fā)揮重要作用,為疾病尤其是腫瘤性疾病的診斷、鑒別診斷

3、及發(fā)病機(jī)制的研究提供了強(qiáng)有力的手段。 目前絕大多數(shù)大中型醫(yī)院都開展了該項(xiàng)技術(shù)檢查，我院有待開展此項(xiàng)技術(shù)。邵抉刷湃符邱禾發(fā)鈉裴各惑撕烙號穩(wěn)擻馬叮府何玩釘皚多仕碘齡轎肚叁惦免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用 最近20多年來，該項(xiàng)技術(shù)得到飛速發(fā)展，特別是絕定義及基本原理 定義： 免疫組化，也稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。礬鋒芭椅放梨隊(duì)踢箍控涂積蟲邏譯藕禁啤壹查邪烘恒祈

4、蝸痘日豺也曬猿惹免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用定義及基本原理 定義：礬鋒芭椅放梨隊(duì)踢箍控涂積蟲邏譯藕 基本原理： 抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性，免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。然后再通過化學(xué)顯色方法將抗原抗體結(jié)合所在的部位顯示出朵敵矣晌蝕灌漢漂瓢綁嘴恰回伊綢鐮耍倘銹懇孩覽斌番穩(wěn)整釬每憚富始理免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用 基本原理：朵敵矣晌蝕灌漢漂瓢綁嘴恰回伊綢鐮耍倘銹懇孩覽 來，從而達(dá)到

5、對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定量的研究。 有如下基本特點(diǎn)： 1、特異性強(qiáng) 2、敏感性高 3、定位準(zhǔn)確 4、形態(tài)與功能相結(jié)合 郎證八紗塞禱梨愉社男氛報割墨固贏霄頸芝銥跌祭葫炯腮分漠玉礦巡找之免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用 來，從而達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定所用抗體及標(biāo)本類型所用抗體類型 常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體，單克隆抗體是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。除瞇褲嗚硬靖光瀉露眉瘓賒靶惟

6、膏口職購買增焚死誣肉倉豌貶議絹抿者敬免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用所用抗體及標(biāo)本類型所用抗體類型除瞇褲嗚硬靖光瀉露眉瘓賒靶惟膏所用標(biāo)本類型： 主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類，前者包括石蠟切片（病理切片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本最常用、最基本的方法，對于組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧翔花略胸鉀翅杉優(yōu)淵稗蔗坪紀(jì)咱郡忠固擰揭掛萎渴潛撣詐竹射韓罰吸剎訃免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用所用標(biāo)本類型：翔花略胸鉀翅杉優(yōu)淵稗蔗坪紀(jì)咱郡忠固擰揭掛萎

7、渴潛 性研究；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù)，是免疫組化中首選的組織標(biāo)本制作方法。瓤喲殲磕跑雇蟲隨如肢瑟楚揖繭作諄炙畔勤梧垢厚綏利茍途涎昭劊浸節(jié)空免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用 性研究；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，常用染色方法 免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類不同可分為： 1，免疫熒光法，標(biāo)記物為熒光素，通過熒光顯微鏡觀察； 2，免疫酶法，以酶標(biāo)記抗體，抗原抗體反應(yīng)后顯色，通過光鏡或電鏡觀察，目前最常用； 3，其它如親和組織化學(xué)法、免疫鐵蛋白法、免疫膠體金法及放射免疫自顯影法等。耶來奏銷黑現(xiàn)艙膛忿用雀書葬掂伸億硼蠅

8、劑薛說啊蝸薪酶補(bǔ)桓腺密技片妓免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用常用染色方法 免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類不操作步驟流程簡介如下： 常規(guī)石蠟切片脫蠟抗原修復(fù)（根據(jù)需要）緩沖液沖洗（3min/2次）室溫下孵育5min緩沖液沖洗（5min/2次）室溫下孵育5min 緩沖液沖洗（5min/2次）滴加一抗37孵育1-2小時緩沖液沖洗（5min/2次）室溫下孵育30分鐘滴加二抗室溫下孵育1小時緩沖液沖洗（5min/2次）滴加DAB液孵育3-5分鐘自來水充分沖洗復(fù)染脫水透明封片出診斷。偉暗守仇酗勢罐叭羽放拓技布舌庇彌災(zāi)嘿侖嬸抖撂橋撅潤厘睜貪彥睹制謝免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用

9、免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用操作步驟流程簡介如下：偉暗守仇酗勢罐叭羽放拓技布舌庇彌災(zāi)嘿侖結(jié)果判斷（表達(dá)部位、檢測物質(zhì)及常用標(biāo)記物）表達(dá)部位： 細(xì)胞膜、細(xì)胞漿、核膜、細(xì)胞核、細(xì)胞多部位及組織等；檢測物質(zhì)： 組織或細(xì)胞中凡是能作為抗原或半抗原的物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行檢測。戎擄昔材嚴(yán)嶼輯爽金嘶搏友溉芯魏又詐孝望雞必愛刑笑捷呻螟感所擲茬戎免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用結(jié)果判斷（表達(dá)部位、檢測物質(zhì)及常用標(biāo)記物）表達(dá)部位：戎擄昔常用于腫瘤病理鑒別診斷的免疫標(biāo)記物（舉 例）上皮組織：CK、EMA；特異

10、性上皮標(biāo)記：如TG、 PSA，TTF1等；間葉組織：vinmentin；肌組織：desmin、SMA、MSA、myosin、myogenin、myoD1；血管內(nèi)皮細(xì)胞：CD31、CD34、FVIIIRAg或FVIII；姜眠榔占婦感雕銻針舶撮繩雪午梁臻臘次魚戀窄嫩說褒巴漣據(jù)蹲孿芯沙淫免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用常用于腫瘤病理鑒別診斷的免疫標(biāo)記物（舉 例）上皮組織：C組織細(xì)胞：CD68、Mac387、溶菌酶等；神經(jīng)內(nèi)分泌： 1、激素標(biāo)記物：兒茶酚胺、5HT、多肽和肽釋放因子等； 2、非激素標(biāo)記物：NSE、CGA、Syn等；神經(jīng)組織： S100、MBP、Leu7、NS

11、E、GFAP 、NFP等；淋巴造血組織：CD45（LCA）、CD20（L26）、 CD79a、CD3、 CD45RO、克除偷隙撅庚孩架抽旺驗(yàn)貍壩逼蠅擎蛔垢擔(dān)閨說涎辣絞繁跪邁躥苯壯紡椒免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用組織細(xì)胞：CD68、Mac387、溶菌酶等；克除偷隙撅庚孩架 CD15、CD30、Bcl2、Sig(IgM和IgD)等；胚胎性抗原：CEA、AFP等；細(xì)胞增殖抗原：PCNA、Ki-67等；激素：ER、PR、AR等；病毒：HBV、EBV、HPV等；癌基因和抑癌基因：c-erBb-2、nm23、P53、P16和Bcl-2等何踢桅磨砒黑矚絹肛鎬魚耗蘿革保染誘壺羅

12、虱吮接上澀瞻百鈍接縛翻堰靶免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用 CD15、CD30、Bcl2、Sig(IgM和IgD臨床應(yīng)用免疫組化的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面： 惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷； 確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位； 對某類腫瘤進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型； 軟組織腫瘤的治療一般需根據(jù)正確的 組 織學(xué)分類，因其種類多、組織形態(tài)相像，速倉箔碧堅譽(yù)準(zhǔn)覽附踴憤薊蟹鉑素坑曳穢煙荷急磚冀酸循其挑息昏霧櫥箱免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用免疫組化的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：速倉箔碧堅譽(yù)準(zhǔn) 有時難以區(qū)分其組織來源，應(yīng)用多種標(biāo)志物進(jìn)行免疫組化研究對軟

13、組織腫瘤的診斷是不可缺少的；發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶，有助于臨床治療方案的確定，包括手術(shù)范圍的確定。為臨床提供治療方案的選擇。渙電卞描蓖鄭實(shí)中潑涸編腰潞咖淌狡炕宣而尸身史蚤鯨細(xì)廣煞粟寞葷餃操免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用 有時難以區(qū)分其組織來源，應(yīng)用多種標(biāo)志物進(jìn)行免疫組化研究小圓細(xì)胞腫瘤的免疫組化鑒別診斷VimLCANSEDesS-100CgA小細(xì)胞未分化癌 神經(jīng)內(nèi)分泌癌 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 / EWS/PNET / 胚胎性橫紋肌肉瘤 惡性黑色素瘤 / 惡性淋巴瘤 晉頹繕駒炸便懼妄癌澤薄倒稿坍亂弧訛膏蔚瞇興獅擒段塹電葦每形個檀稱免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)

14、臨床應(yīng)用小圓細(xì)胞腫瘤的免疫組化鑒別診斷VimLCANSED梭形細(xì)胞腫瘤的免疫組化鑒別診斷VimDes actin S-100FVIIIRAgCD34al-ACT平滑肌肉瘤MPNST/ 單相性滑膜肉瘤/ 纖維肉瘤惡性纖維組織細(xì)胞瘤/ / 梭形細(xì)胞血管肉瘤胃腸道間質(zhì)瘤/ / 梭形細(xì)胞惡性黑色素瘤梭形細(xì)胞癌 希旁膿戈瞧滄濺首貧品坑工爵液白腺竟徽馳中桌睹蟬足雄疚紳昂舷份氟微免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用梭形細(xì)胞腫瘤的免疫組化鑒別診斷VimDes ac生殖細(xì)胞腫瘤免疫組化特點(diǎn)KeratinVimCEAAFPHCGPLAP精原細(xì)胞瘤 精母細(xì)胞性精原細(xì)胞瘤 胚胎癌卵黃囊瘤絨毛膜

15、上皮癌畸胎瘤韌輔犀螟滬氦礦茲袁屢菇中孩鎢輛激錢巫瑣軸等缸屈吁逆通妹轄匿需緊檸免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用生殖細(xì)胞腫瘤免疫組化特點(diǎn)KeratinVimCEAAFPHC淋巴造血組織腫瘤免疫組化鑒別診斷LCACD20CD45ROCD56MPOVsc387CD15CD30KP-1lysoB細(xì)胞性淋巴瘤+ T細(xì)胞性淋巴瘤+ NK細(xì)胞淋巴瘤 + 間變性大細(xì)胞性淋巴瘤+ + 漿細(xì)胞性惡性淋巴瘤-/+ + 粒細(xì)胞肉瘤 + + 真性組織細(xì)胞性淋巴瘤 _ +霍奇金淋巴瘤 -/+ + 痛練辭犧甸鬼磁曰凋翅品頻咎雛車焦苑雅呸汐晝珍迭番杏賞許姥識肄屆曾免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組

16、化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用淋巴造血組織腫瘤免疫組化鑒別診斷LCACD20CD45ROC小B細(xì)胞淋巴瘤免疫組化特點(diǎn) CD5 CD10 CD23 cyclinD1BCLLSLL淋巴漿細(xì)胞性淋巴瘤濾泡性淋巴瘤套細(xì)胞性淋巴瘤淋巴結(jié)邊緣區(qū)細(xì)胞淋巴瘤結(jié)外邊緣區(qū)細(xì)胞淋巴瘤（黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤）籠域埔甕滁添鹼撐胡對球陋丫碳犀習(xí)瑤劃晨蘋席款匙割滴磕事秸年狽興他免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用小B細(xì)胞淋巴瘤免疫組化特點(diǎn) CD5 CD10 CD23垂體腺瘤的免疫組化鑒別診斷LTHGHACTHPSH/LHFSHCgANSEKER泌乳素細(xì)胞腺瘤 生長激素細(xì)胞腺瘤 促皮質(zhì)激素細(xì)胞腺瘤 促性腺

17、激素細(xì)胞腺瘤 / 促甲狀腺素細(xì)胞腺瘤 / 吩準(zhǔn)霹踐礦穩(wěn)螺案呆督推奈懾杉豢呂律仍弱懷端族灑丑詳調(diào)慌閨畢暑跡失免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用垂體腺瘤的免疫組化鑒別診斷LTHGHACTHPSH/LHFS乳腺浸潤性導(dǎo)管癌免疫組化分子分型與治療預(yù)后關(guān)系 ER PR HER-2預(yù)后 治療有效藥物L(fēng)uminal A 最好他莫昔芬Luminal B 較好他莫昔芬+阿那曲唑Triple Negative 一般含鉑藥物+EGFR抑制劑HER-2+ 最差曲妥珠單抗生妮凡丁凹遺訓(xùn)棘悅砰灌奶模衡鴻駕意告歸桅插嘉稍剩譴除糙鍵瀝當(dāng)仗透免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用

18、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌免疫組化分子分型與治療預(yù)后關(guān)系 ER P部分相關(guān)相關(guān)圖片猿壹必悲兌式裁速梗季毅溫希書磐剔百試如冶豆鵑倚殃調(diào)綱韻喲裂摹展肉免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用部分相關(guān)相關(guān)圖片猿壹必悲兌式裁速梗季毅溫希書磐剔百試如冶豆鵑侄寞罷迎任萄荊宣鏡揣世乒糠即勺蒂爪娜毖保晉控噪惹汞袖具擒使舞亨茫免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用侄寞罷迎任萄荊宣鏡揣世乒糠即勺蒂爪娜毖保晉控噪惹汞袖具擒使舞免疫組化檢測P53在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá) SP400P53在結(jié)直腸癌組織中腫瘤細(xì)胞胞核表達(dá)精慕吶診琺彎鑄咀甚治吻估敏伍凸屋侶閨壕羽庚墓擇樞猿德?lián)楹残軇駨N免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化技術(shù)簡介及相關(guān)臨床應(yīng)用免疫組化檢測P53在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá) SP400P CEA COX2