《大腸桿菌的培養(yǎng)和分離》教案

1、PAGE4實驗1大腸桿菌的培養(yǎng)和分離【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)增，利用液體培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作。2進(jìn)行大腸桿菌的分離，用固體平面培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌的化纖培養(yǎng)。3說明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。【教學(xué)重點】大腸桿菌的劃線分離；大腸桿菌的無菌操作和滅菌技術(shù)；大腸桿菌的特點及實驗室應(yīng)注意的安全事項?！窘虒W(xué)難點】大腸桿菌的劃線分離；大腸桿菌實驗的無菌操作技術(shù)及實驗室安全事項的解讀。【實驗教材分析】本節(jié)內(nèi)容選自浙科版生物選修1第1部分實驗1大腸桿菌的分離和培養(yǎng)。本次課程主要包括了本次實驗的目的、大腸桿菌的特點、無菌操作和滅菌的方法、儀器設(shè)備和實驗材料、實驗步驟等內(nèi)容。在前一節(jié)介紹了實驗室規(guī)則

2、和生物技術(shù)概況的基礎(chǔ)上，進(jìn)行具體的實驗操作。并且經(jīng)過生物必修三冊書本的學(xué)習(xí)，學(xué)生已經(jīng)掌握了一定的細(xì)菌的相關(guān)知識，并對一些特殊細(xì)菌的篩選和鑒別有了一定的了解。故本次實驗教學(xué)既是對學(xué)生前面學(xué)的理論知識的深化，同時也為學(xué)生將要學(xué)到的分離以尿素為氮源的微生物等內(nèi)容奠定了比較重要的基礎(chǔ)。因此，本節(jié)課起著承前啟后的重要作用?！緦W(xué)情分析】本節(jié)課的教授對象是選了選修1這門課的高二學(xué)生，在實驗前，學(xué)生已經(jīng)學(xué)習(xí)過了革蘭氏陽性菌與陰性菌的相關(guān)知識，本次實驗主要是學(xué)生在掌握細(xì)菌的相關(guān)知識后學(xué)習(xí)大腸桿菌的分離與鑒定，很好地實現(xiàn)了將所學(xué)知識與實踐相聯(lián)系，易引起學(xué)生的興趣，學(xué)生的積極性較高，從而有利于實驗教學(xué)的展開。但學(xué)生

3、對于實驗原理、實驗方法和實驗技術(shù)等方面還不熟悉，需要教師對此進(jìn)行詳細(xì)的講解，在講解過程中注意運(yùn)用適宜的教學(xué)方法，引導(dǎo)學(xué)生將所學(xué)知識運(yùn)用到具體的實驗實踐中。同時，教師需嚴(yán)格要求學(xué)生在操作上符合實驗室規(guī)范，將實驗操作過程中的注意事項對學(xué)生進(jìn)行逐一說明，保證實驗的有序性與安全性?！緦嶒灲虒W(xué)過程】（一）創(chuàng)設(shè)情境，導(dǎo)入新知【教師活動】教師展示飲用水凈化、消毒滅菌、檢測、出品的簡略過程，拋出在檢測這一過程中主要是以某一微生物作為指標(biāo)來進(jìn)行檢測，從而引出本次實驗的材料大腸桿菌（展示圖片）。飲用水這一素材與我們的實際生活相聯(lián)系，有利于吸引學(xué)生的興趣。【學(xué)生活動】觀看L2大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)我們首先選擇LB液體培

4、養(yǎng)基，進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)：首先，挑取1環(huán)大腸桿菌菌種，接種到裝有的三角燒瓶內(nèi)，包扎后置于37搖床內(nèi)振蕩培養(yǎng)12h。大腸桿菌的劃線分離倒平板：培養(yǎng)基加熱熔化，待冷至55-60時倒平板，每培養(yǎng)皿約15ml，水平放置，凝固成平板。注意：a無菌操作，在酒精燈火焰旁。b培養(yǎng)基加熱熔化，待冷至55-60時倒平板，溫度過高，會燙傷手或拿不穩(wěn)倒出而造成污染，溫度太低容易重新凝固。劃線分離：主要采用三區(qū)劃線法，形成的菌落由多到少，最后形成單菌落；也可采用稀釋涂布平板法，以獲得單菌落。注意：1）接種環(huán)要在酒精燈外焰進(jìn)行灼燒滅菌。2）劃線時要讓平板充分冷卻，以防培養(yǎng)基破裂。3）劃線時，動作要輕，以防割裂培養(yǎng)基。

5、斜面接種和菌種保存在酒精燈火焰旁，挑取大腸桿菌單菌落，接種于斜面培養(yǎng)基上，保存下來。注意：在酒精燈旁操作，先對試管口，進(jìn)行操作。【學(xué)生活動】有些同學(xué)通過預(yù)習(xí)和課外知識積累，回答：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。認(rèn)真聽老師的講解，同時做好相關(guān)筆記。思考步驟中為什么這么做，明白操作的原理。（四）課外延伸，小結(jié)新知【教師活動】在上完實驗課呢，同學(xué)們有沒有什么問題解決學(xué)生還沒有明白的問題，同時提出以下問題，讓同學(xué)們思考。1、在接種操作結(jié)束后是否需要灼燒接種環(huán)2、操作過程中如何避免被雜菌污染3、如何判斷培養(yǎng)物是否有雜菌污染4、實驗結(jié)束后，接種過微生物的器皿應(yīng)該如何處理【學(xué)生活動】思考實驗中自己的困惑，并提出來?！緦嶒灲Y(jié)果