培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化

1、培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化（必修3 P68）探究第一頁，共十九頁。酵母菌出芽生殖酵母菌的新陳代謝類型：兼性厭氧型無氧呼吸C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O能量酶有氧呼吸C6H12O6 2C2H5OH2CO2能量酶第二頁，共十九頁。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，嘗試建構(gòu)種群增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型。2用數(shù)學(xué)模型解釋種群數(shù)量的變化。3學(xué)會(huì)使用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)。第三頁，共十九頁。二、實(shí)驗(yàn)原理1、酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長(zhǎng)情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、PH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時(shí)間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群

2、數(shù)量的變化情況。2、利用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接測(cè)定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于血球計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)。 第四頁，共十九頁。是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面，刻有一個(gè)方格網(wǎng)。第五頁，共十九頁。 XB-K-25為計(jì)數(shù)板的型號(hào)和規(guī)格，表示此計(jì)數(shù)板分25個(gè)中格； 0.1mm為蓋上蓋玻片后計(jì)數(shù)室的高； 1/400mm2表示計(jì)數(shù)室面積是1mm2

3、，分400個(gè)小格，每小格面積是1/400 mm2。 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的使用原理方格網(wǎng)第六頁，共十九頁。方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。這一大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.1mm3。第七頁，共十九頁。每個(gè)大方格中有16個(gè)中格或25個(gè)中格計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格。 一種是大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格； 另一種是大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。第八頁，共十九頁。 25*16規(guī)格的，通常數(shù)五個(gè)中方格的總菌數(shù)（五點(diǎn)取樣），然后求得每個(gè)小方格的平均值，再乘上400，就得出一個(gè)大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成10ml菌液中

4、的總菌數(shù)。16*25數(shù)四個(gè)中方格（對(duì)角線）每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)：酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)（2516）酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)（1625）第九頁，共十九頁。例1、檢測(cè)員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量，已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為01 mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻 個(gè)mL。（參考答案：5n105 ）第十頁，共十九頁。1鏡檢計(jì)數(shù)室。在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)

5、行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)； 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用的方法步驟2加樣品。將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；第十一頁，共十九頁。3計(jì)數(shù)稍待片刻（約5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。第十二頁，共十九頁。三、實(shí)驗(yàn)探究過程（一）提出問題： 培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的？（二

6、）作出假設(shè)：環(huán)境中的資源和空間有限的條件下，酵母菌種群的數(shù)量呈S型增長(zhǎng)。（三）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)全班同學(xué)分成甲、乙、丙等若干實(shí)驗(yàn)組。分別用等量培養(yǎng)液，在相同適宜環(huán)境中培養(yǎng)等量酵母菌。每天用血球計(jì)數(shù)板，采用抽樣檢測(cè)的方法計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量并作記錄，連續(xù)7天。7天后，各組向全班匯報(bào)本小組7天的數(shù)據(jù)，算出每一天數(shù)據(jù)的全班平均值，根據(jù)平均值畫出酵母菌種群數(shù)量的增長(zhǎng)曲線。第十三頁，共十九頁。（四）實(shí)驗(yàn)過程1、材料用具： 探究所需要的菌種和無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板（1mm1mm01mm方格）、滴管、顯微鏡等。2、方法步驟和記錄：（1）取相同試管若干支，分別加入5ml肉湯培養(yǎng)液，塞上棉

7、塞。（2）用高壓鍋進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫，標(biāo)記甲、乙、丙等（3）將酵母菌母液分別加入試管各5ml，搖勻后用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)起始酵母液個(gè)數(shù)，做好記錄。（4）將各試管送進(jìn)恒溫箱，25下培養(yǎng)7天。3、現(xiàn)象觀察 每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。第十四頁，共十九頁。培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化記錄表 菌數(shù) 時(shí)間第十五頁，共十九頁。（五）實(shí)驗(yàn)結(jié)論1、根據(jù)表格平均值，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，酵母菌的數(shù)量為縱坐標(biāo)，繪制出培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化曲線（種群增長(zhǎng)曲線）。2、培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時(shí)間呈S型增長(zhǎng)變化。第十六頁，共十九頁。四、實(shí)驗(yàn)討論2

8、從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，建議你將試管輕輕震蕩幾次。這是為什么？ 使酵母菌在試管里分布均勻，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性。3本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要，請(qǐng)討論說明怎樣設(shè)計(jì)；如不需要，請(qǐng)說明理由。 不需要，該實(shí)驗(yàn)在時(shí)間上形成前后對(duì)照。只要分組重復(fù)實(shí)驗(yàn)，獲得平均數(shù)值，求得準(zhǔn)確即可。4需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？ 需要，提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。5怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？（見上表）每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。記錄表（見上表）6如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施？ 增加稀釋的倍數(shù)。7對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？

9、應(yīng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，另兩邊不計(jì)數(shù)。第十七頁，共十九頁。 練習(xí)：某生物興趣小組開展探究實(shí)驗(yàn)，課題是：“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間的變化關(guān)系”。實(shí)驗(yàn)材料、用具： 菌種和無菌培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板（2mm2mm方格）、滴管、顯微鏡等。酵母菌的顯微計(jì)數(shù)方法： 血球計(jì)數(shù)板：是帶有微小方格刻度的玻璃片，用于在顯微鏡下對(duì)微生物的計(jì)數(shù)。 將含有酵母菌的培養(yǎng)滴在計(jì)數(shù)板上，計(jì)算一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察7d，并記錄每天的數(shù)量。根據(jù)以上敘述回答下列問題：第十八頁，共十九頁。（1）根據(jù)所學(xué)知識(shí)，該課題的實(shí)驗(yàn)假設(shè)是：開始一段時(shí)間酵母菌呈“J”型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，酵母菌呈“S”型增長(zhǎng)。（2）本實(shí)驗(yàn)沒有設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，原因是 。該實(shí)驗(yàn)是否需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)？，試解釋原因。（3）在吸取培養(yǎng)液計(jì)數(shù)前，要輕輕振蕩幾次試管，原因是 。該如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取的措施是。（4）請(qǐng)你設(shè)計(jì)表格處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。（