培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化

1、培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化（必修3 P68）探究第一頁，共十九頁。酵母菌出芽生殖酵母菌的新陳代謝類型：兼性厭氧型無氧呼吸C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O能量酶有氧呼吸C6H12O6 2C2H5OH2CO2能量酶第二頁，共十九頁。一、實驗目的1通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，嘗試建構種群增長的數(shù)學模型。2用數(shù)學模型解釋種群數(shù)量的變化。3學會使用血球計數(shù)板進行計數(shù)。第三頁，共十九頁。二、實驗原理1、酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、PH、溫度等因素有關，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群

2、數(shù)量的變化情況。2、利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數(shù)目，所以一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)。 第四頁，共十九頁。是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四條下凹的槽，構成三個平臺。中間的平臺較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面，刻有一個方格網(wǎng)。第五頁，共十九頁。 XB-K-25為計數(shù)板的型號和規(guī)格，表示此計數(shù)板分25個中格； 0.1mm為蓋上蓋玻片后計數(shù)室的高； 1/400mm2表示計數(shù)室面積是1mm2

3、，分400個小格，每小格面積是1/400 mm2。 血細胞計數(shù)板的使用原理方格網(wǎng)第六頁，共十九頁。方格網(wǎng)上刻有9個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室，供微生物計數(shù)用。這一大方格的長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其體積為0.1mm3。第七頁，共十九頁。每個大方格中有16個中格或25個中格計數(shù)室通常有兩種規(guī)格。 一種是大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格； 另一種是大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。第八頁，共十九頁。 25*16規(guī)格的，通常數(shù)五個中方格的總菌數(shù)（五點取樣），然后求得每個小方格的平均值，再乘上400，就得出一個大方格中的總菌數(shù)，然后再換算成10ml菌液中

4、的總菌數(shù)。16*25數(shù)四個中方格（對角線）每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)：酵母細胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)（2516）酵母細胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細胞個數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)（1625）第九頁，共十九頁。例1、檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量，已知每個計數(shù)室由2516400個小格組成，容納液體的總體積為01 mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻 個mL。（參考答案：5n105 ）第十頁，共十九頁。1鏡檢計數(shù)室。在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進

5、行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數(shù)； 血細胞計數(shù)板使用的方法步驟2加樣品。將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細胞懸液的量以不超過計數(shù)室臺面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；第十一頁，共十九頁。3計數(shù)稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部后，將計數(shù)板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。第十二頁，共十九頁。三、實驗探究過程（一）提出問題： 培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？（二

6、）作出假設：環(huán)境中的資源和空間有限的條件下，酵母菌種群的數(shù)量呈S型增長。（三）設計實驗全班同學分成甲、乙、丙等若干實驗組。分別用等量培養(yǎng)液，在相同適宜環(huán)境中培養(yǎng)等量酵母菌。每天用血球計數(shù)板，采用抽樣檢測的方法計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量并作記錄，連續(xù)7天。7天后，各組向全班匯報本小組7天的數(shù)據(jù)，算出每一天數(shù)據(jù)的全班平均值，根據(jù)平均值畫出酵母菌種群數(shù)量的增長曲線。第十三頁，共十九頁。（四）實驗過程1、材料用具： 探究所需要的菌種和無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板（1mm1mm01mm方格）、滴管、顯微鏡等。2、方法步驟和記錄：（1）取相同試管若干支，分別加入5ml肉湯培養(yǎng)液，塞上棉

7、塞。（2）用高壓鍋進行高壓蒸汽滅菌后冷卻至室溫，標記甲、乙、丙等（3）將酵母菌母液分別加入試管各5ml，搖勻后用血球計數(shù)板計數(shù)起始酵母液個數(shù)，做好記錄。（4）將各試管送進恒溫箱，25下培養(yǎng)7天。3、現(xiàn)象觀察 每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。第十四頁，共十九頁。培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化記錄表 菌數(shù) 時間第十五頁，共十九頁。（五）實驗結論1、根據(jù)表格平均值，以時間為橫坐標，酵母菌的數(shù)量為縱坐標，繪制出培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化曲線（種群增長曲線）。2、培養(yǎng)液酵母菌種群數(shù)量隨時間呈S型增長變化。第十六頁，共十九頁。四、實驗討論2

8、從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕震蕩幾次。這是為什么？ 使酵母菌在試管里分布均勻，提高計數(shù)的代表性和準確性。3本探究需要設置對照嗎？如果需要，請討論說明怎樣設計；如不需要，請說明理由。 不需要，該實驗在時間上形成前后對照。只要分組重復實驗，獲得平均數(shù)值，求得準確即可。4需要做重復實驗嗎？ 需要，提高數(shù)據(jù)的準確性。5怎樣記錄結果？記錄表怎樣設計？（見上表）每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。記錄表（見上表）6如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應當采取怎樣的措施？ 增加稀釋的倍數(shù)。7對于壓在小方格界線上的酵母菌，應當怎樣計數(shù)？

9、應計數(shù)同側相鄰兩邊上的菌體數(shù)，另兩邊不計數(shù)。第十七頁，共十九頁。 練習：某生物興趣小組開展探究實驗，課題是：“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關系”。實驗材料、用具： 菌種和無菌培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板（2mm2mm方格）、滴管、顯微鏡等。酵母菌的顯微計數(shù)方法： 血球計數(shù)板：是帶有微小方格刻度的玻璃片，用于在顯微鏡下對微生物的計數(shù)。 將含有酵母菌的培養(yǎng)滴在計數(shù)板上，計算一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察7d，并記錄每天的數(shù)量。根據(jù)以上敘述回答下列問題：第十八頁，共十九頁。（1）根據(jù)所學知識，該課題的實驗假設是：開始一段時間酵母菌呈“J”型增長，隨著時間的推移，酵母菌呈“S”型增長。（2）本實驗沒有設置對照實驗，原因是 。該實驗是否需要重復實驗？，試解釋原因。（3）在吸取培養(yǎng)液計數(shù)前，要輕輕振蕩幾次試管，原因是 。該如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應當采取的措施是。（4）請你設計表格處理實驗數(shù)據(jù)。（