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文檔簡介
1、香蕉DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)Crude extraction of banana DNA教材來源人民教育出版社普通高中生物教科書生物學(xué)選修一生物技術(shù)實(shí)踐專題五 課題一 DNA的粗提取與鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)DNA的粗提取方法2、學(xué)習(xí)DNA的化學(xué)鑒定方法1.在什么濃度下DNA的溶解度最???DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何變化的?2. 如何通過控制NaCl溶液的濃度使DNA在鹽溶液中溶解或析出?二、實(shí)驗(yàn)原理如何破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)使DNA釋放出來?如何分離DNA和蛋白質(zhì)?如何鑒定DNA?5、甲基綠為堿性染料,它易與聚合程度高的DNA結(jié)合呈現(xiàn)綠色。2、清潔劑中含有的SDS(十二烷基磺酸鈉)具有使蛋白質(zhì)變性,
2、與DNA分離的作用,3、DNA可以溶解在一定濃度的NaCl溶液中,4、DNA在酒精中不溶解,所以加酒精后DNA可以析出,1、研磨能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),釋放其中含有的DNA。魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺孔動物的紅細(xì)胞、 彌猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的大腸桿菌。教材中列舉了很多種材料,請你從中選出2-3種?;卮穑伎紴槭裁催x用香蕉作為原材料。原則:凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是,選定的材料DNA含量相對較高,成功的可能性更大。思考題:為什么不用哺乳動物的紅細(xì)胞呢?教材中選擇雞血細(xì)胞液作為實(shí)驗(yàn)材料,為什么我們卻是用的香蕉呢?二者共同優(yōu)點(diǎn):均為真核生物,DNA都在染
3、色體上。DNA含量高,細(xì)胞容易被碾碎,細(xì)胞核內(nèi)的DNA容易釋放出來。答:哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核。三、材料器具器具:研缽、紗布、漏斗、燒杯、玻璃棒、量筒(10ml一支)、滴管、試管(20ml兩支)材料:香蕉、洗潔精、95%酒精、蒸餾水、0.015mol/L的NaCl溶液、2mol/L的NaCl溶液、甲基綠試劑四、方法步驟1、制備材料切取一段2厘米長的香蕉,切碎,置于研缽內(nèi)加入2毫升洗潔精,充分研磨加入10毫升2mol/L的氯化鈉溶液,繼續(xù)研磨2、過濾將研缽內(nèi)的香蕉糊用漏斗和紗布過濾到燒杯中3.提取DNA往上述液中加入到約兩倍體積的95%的酒精,輕輕搖動或用玻璃棒輕輕攪拌,很快就會看到白色纖維狀粘稠物質(zhì)從濾液中析出米,這就是DNA粗提取物。4、鑒定方法二:取兩支試管,分編為1號、2號,各加入0.015mol/LNaC l溶液2ml,將所得的白色絮狀物質(zhì)取出一部分放入1號試管,攪拌使其溶解,然后向兩支試管中分加入兩滴甲基綠試劑,1號試管呈現(xiàn)綠色,則說明白色絮狀物是DNA。方法一:用玻璃棒卷起白色絮狀物,并在白色絮狀物中直接滴加甲基綠染液,用蒸餾水洗去浮色,絮狀物呈現(xiàn)綠色,說明該白色絮狀沉淀為DNA。注意事項(xiàng)加人洗滌劑后,動作要輕緩,柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,
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