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文檔簡(jiǎn)介
檢測(cè)生物組織中糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、脂肪第一頁(yè),共21頁(yè)。檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)
1.實(shí)驗(yàn)原理第二頁(yè),共21頁(yè)。
斐林試劑蘇丹Ⅲ橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹Ⅳ
雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)試劑實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象還原性糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉
碘液
藍(lán)色生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)原理第三頁(yè),共21頁(yè)。第四頁(yè),共21頁(yè)。選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對(duì)顯色的干擾),蘋(píng)果、梨最好
。
實(shí)驗(yàn)流程(步驟)1.可溶性還原糖
制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過(guò)濾:(用單層紗布)取液:(2mL)顯色反應(yīng)
2mL組織樣液剛配制的斐林試劑2mL現(xiàn)象:
呈現(xiàn)藍(lán)色變成磚紅色(用前混勻)50~65.C水浴加熱2min葡萄糖,果糖,麥芽糖;蔗糖為非還原性糖第五頁(yè),共21頁(yè)。還原糖的檢測(cè)和觀察:第六頁(yè),共21頁(yè)。還原糖的檢測(cè)結(jié)果第七頁(yè),共21頁(yè)。第八頁(yè),共21頁(yè)。2.脂肪的鑒定
取材:花生種子(浸泡3-4h),去皮,將子葉削成薄片
制片:①選取最薄的薄片移至載玻片中央②在薄片上滴加蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)
染液2-3滴,染色2-3min③滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的蘇丹Ⅲ
)④吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時(shí)裝片顯微觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現(xiàn)象:有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第九頁(yè),共21頁(yè)。脂肪的檢測(cè)結(jié)果第十頁(yè),共21頁(yè)。第十一頁(yè),共21頁(yè)。3.蛋白質(zhì)的鑒定選材與制備組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)[黃豆浸泡→去皮→切片→研磨→過(guò)濾→濾液]
顯色反應(yīng)2mL組織樣液雙縮脲試劑A2mL現(xiàn)象:無(wú)色雙縮脲試劑B3-4滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供Cu2+)第十二頁(yè),共21頁(yè)。蛋白質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果第十三頁(yè),共21頁(yè)。第十四頁(yè),共21頁(yè)。4.淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿檢測(cè):2mL組織樣液碘液2滴現(xiàn)象:
搖勻后變成藍(lán)色第十五頁(yè),共21頁(yè)。問(wèn)題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時(shí),為什么要留出一部分樣液?作對(duì)照2、使用雙縮脲試劑時(shí)為什么B液只能加3~4滴而不能過(guò)量?
過(guò)量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?
時(shí)間太長(zhǎng),Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無(wú)法參與反應(yīng)。深化第十六頁(yè),共21頁(yè)。4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液在堿性環(huán)境下的Cu2+NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,搖勻。(不能過(guò)量)水浴加熱不需要第十七頁(yè),共21頁(yè)。知識(shí)結(jié)構(gòu)第十八頁(yè),共21頁(yè)。1、青蘋(píng)果汁遇碘液顯藍(lán)色,熟蘋(píng)果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀,下列結(jié)論中最合理的是()A.青蘋(píng)果汁中有淀粉,不含還原糖
B.熟蘋(píng)果汁中含還原糖,沒(méi)有淀粉
C.蘋(píng)果轉(zhuǎn)熟時(shí),大量淀粉水解成還原糖
D.蘋(píng)果轉(zhuǎn)熟時(shí)單糖聚合成淀粉
C例題
第十九頁(yè),共21頁(yè)。2、安徽阜陽(yáng)劣質(zhì)奶粉事件震驚全國(guó),引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,肯定不需要用到的化學(xué)試劑是()A.斐林試劑
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