比色法原理課件

吸光光度法

原理1ppt課件一吸光光度法的基本原理特點(diǎn)靈敏度高：測(cè)定下限可達(dá)10－5～10－6mol/L,10-4%～10-5%準(zhǔn)確度能夠滿足微量組分的測(cè)定要求：相對(duì)誤差2～5％（1～2％）操作簡(jiǎn)便快速應(yīng)用廣泛

吸光光度法是基于被測(cè)物質(zhì)的分子對(duì)光具有選擇性吸收的特性而建立起來(lái)的分析方法。2ppt課件1.光的基本性質(zhì)

電磁波的波粒二象性磁場(chǎng)向量電場(chǎng)向量傳播方向YZX與物質(zhì)作用3ppt課件波粒二象性結(jié)論:一定波長(zhǎng)的光具有一定的能量，波長(zhǎng)越長(zhǎng)(頻率越低)，光量子的能量越低。單色光：具有相同能量(相同波長(zhǎng))的光?；旌瞎猓壕哂胁煌芰?不同波長(zhǎng))的光復(fù)合在一起。真空中:4ppt課件光學(xué)光譜區(qū)遠(yuǎn)紫外近紫外可見近紅外中紅外

遠(yuǎn)紅外（真空紫外）10nm~200nm200nm

~380nm380nm

~780nm780nm~2.5m2.5m

~50m50m

~300m5ppt課件2.溶液中溶質(zhì)分子對(duì)光的吸收與吸收光譜/nm顏色互補(bǔ)光400-450紫黃綠450-480藍(lán)黃480-490綠藍(lán)橙490-500藍(lán)綠紅500-560綠紅紫560-580黃綠紫580-610黃藍(lán)610-650橙綠藍(lán)650-760紅藍(lán)綠不同顏色的可見光波長(zhǎng)及其互補(bǔ)光6ppt課件300400500600700/nm350525545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光譜3507ppt課件3.光吸收基本定律:Lambert-Beer定律A=lg(I0/It)=kbcItI0bdxII-dIs朗伯定律(1760)A=lg(I0/It)=k1b比爾定律(1852)A=lg(I0/It)=k2c吸光度介質(zhì)厚度(cm)在自動(dòng)分析儀中體現(xiàn)為比色杯厚度8ppt課件吸光度A、透射比T與濃度c的關(guān)系A(chǔ)TcA=kbc9ppt課件吸光度與光程的關(guān)系A(chǔ)=bc

光源檢測(cè)器0.00吸光度檢測(cè)器b樣品光源0.22吸光度光源檢測(cè)器0.44吸光度b樣品b樣品10ppt課件吸光度與濃度的關(guān)系

A=bc

吸光度0.00光源檢測(cè)器

吸光度0.22光源檢測(cè)器b

吸光度0.42光源檢測(cè)器b11ppt課件

01234mg/mlA。。。。*0.80.60.40.20溶液濃度的測(cè)定A＝bc工作曲線法(校準(zhǔn)曲線)朗伯-比爾定律的分析應(yīng)用12ppt課件二光度分析的方法和儀器

(一)光度分析的幾種方法方便、靈敏，準(zhǔn)確度差。常用于限界分析。觀察方向1.目視比色法c4c3c2c1c1c2c3c413ppt課件2.光電比色法通過(guò)濾光片得一窄范圍的光(幾十nm)光電比色計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖靈敏度和準(zhǔn)確度較差14ppt課件3.吸光光度法和分光光度計(jì)光源單色器吸收池檢測(cè)系統(tǒng)穩(wěn)壓電源分光光度法的基本部件通過(guò)棱鏡或光柵得到一束近似的單色光.波長(zhǎng)可調(diào),故選擇性好,準(zhǔn)確度高.15ppt課件分光光度計(jì)的主要部件光源：發(fā)出所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，有足夠 的光強(qiáng)度,穩(wěn)定。 可見光區(qū)：鎢燈，碘鎢燈(320～2500nm)

紫外區(qū)：氫燈，氘燈(180～375nm)單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的 裝置。

棱鏡:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm

光柵:波長(zhǎng)范圍寬,色散均勻,分辨性能好,使用方便16ppt課件吸收池：(比色皿)用于盛待測(cè)及參比溶液。 可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池 紫外區(qū)：石英池檢測(cè)器：利用光電效應(yīng)，將光能轉(zhuǎn)換成電流訊號(hào)。 光電池，光電管，光電倍增管指示器： 低檔儀器：刻度顯示（p307，圖8.12)

中高檔儀器：數(shù)字顯示，自動(dòng)掃描記錄17ppt課件(二)分光光度計(jì)的類型18ppt課件多通道儀器（MultichannelInstruments）

光電二極管陣列(通常具有316個(gè)硅二極管)photodiodearrays(PDAs)

同時(shí)測(cè)量200～820nm范圍內(nèi)的整個(gè)光譜