檢驗方法驗證與確認

關(guān)于檢驗方法驗證與確認第1頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五

藥品質(zhì)量標準分析方法驗證和確認一、法規(guī)要求二、分析方法驗證原則及類型三、分析方法驗證內(nèi)容四、分析方法驗證常見問題第2頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五一、法規(guī)要求《中國藥典》（2010年版）凡例檢驗方法和限度二十三、本版藥典正文收載的所有品種，均應(yīng)按規(guī)定的方法進行檢驗。如采用其他方法，應(yīng)將該方法與規(guī)定的方法進行比較試驗，根據(jù)試驗結(jié)果掌握使用，但在仲裁時仍以本版藥典規(guī)定的方法為準。第3頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五一、法規(guī)要求《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）第一百四十二條當影響產(chǎn)品質(zhì)量的主要因素，如原輔料、與藥品直接接觸的包裝材料、生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)環(huán)境（或廠房）、生產(chǎn)工藝、檢驗方法等發(fā)生變更時，應(yīng)當進行確認或驗證。必要時，還應(yīng)當經(jīng)藥品監(jiān)督管理部門批準。

第4頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五一、法規(guī)要求《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）第二百二十三條物料和不同生產(chǎn)階段產(chǎn)品的檢驗應(yīng)當至少符合以下要求：

（二）符合下列情形之一的，應(yīng)當對檢驗方法進行驗證：

1.采用新的檢驗方法；

2.檢驗方法需變更的；

3.采用《中華人民共和國藥典》及其他法定標準未收載的檢驗方法；

4.法規(guī)規(guī)定的其他需要驗證的檢驗方法。

（三）對不需要進行驗證的檢驗方法，企業(yè)應(yīng)當對檢驗方法進行確認，以確保檢驗數(shù)據(jù)準確、可靠；

第5頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五一、法規(guī)要求

分析方法驗證或確認指導(dǎo)原則機構(gòu)或組織文件名稱美國藥典（USP）<1225>Validationofcompendprocedures方法驗證<1226>Verificationofcompendialprocedures方法確認人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會（ICH）Q2（R1）ValidationofAnalyticalProcedures分析方法驗證《中國藥典》（2010年版）一部附錄“中藥質(zhì)量標準分析方法驗證指導(dǎo)原則”二部附錄“藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導(dǎo)原則”第6頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五1、分析方法驗證的定義：根據(jù)檢測項目的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗證內(nèi)容，并通過設(shè)計合理的試驗來驗證所采用的分析方法能否符合檢測項目的要求。二、分析方法驗證原則及類型第7頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五二、分析方法驗證原則及類型2、分析方法驗證的目的：（1）證明采用的分析方法是科學(xué)、合理；（2）證明分析方法能有效控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量第8頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五3、分析方法驗證原則用于檢驗的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當對檢驗方法進行驗證：新建的檢驗方法，包括新建的產(chǎn)品檢驗方法和設(shè)備清潔驗證殘留物檢驗方法等；采用《中華人民共和國藥典》及其他法定標準未收載的檢驗方法；二、分析方法驗證原則及類型第9頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五二、分析方法驗證原則及類型3、分析方法驗證原則用于檢驗的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當對檢驗方法進行驗證：將法定方法用于測定新藥，或?qū)⒛骋黄贩N的法定測定方法用于另一品種；將法定方法用于測定新藥，或?qū)⒛骋黄贩N的法定測定方法用于另一品種；第10頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五二、分析方法驗證原則及類型3、分析方法驗證原則用于檢驗的分析方法符合下列情形之一但不限于以下情況的，應(yīng)當對檢驗方法進行驗證：檢驗用設(shè)備主要部分改變、藥物生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、檢驗方法需變更的；原分析方法進行修改時；法規(guī)規(guī)定的其他需要驗證的檢驗方法。第11頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五二、分析方法驗證原則及類型4、分析方法驗證類型鑒別試驗雜質(zhì)定量或限量檢查原料藥或制劑中有效成分含量測定制劑中其他成分（如防腐劑、殘留物、添加劑等）的測定藥品溶出度、釋放度等檢查中溶出量測定第12頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五三、分析方法驗證內(nèi)容第13頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五1、準確度定義：指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度。驗證方法（原料）：測定已知含量的對照品或供試品；測定結(jié)果與其他方法比較。第14頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五1、準確度驗證方法（制劑）：直接回收法；加樣回收法；測定結(jié)果與其他方法比較。第15頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五1、準確度驗證方法（雜質(zhì)定量測定）：直接回收法；測定結(jié)果與其他方法比較。第16頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五表1樣品中待測定成分含量和回收率限度待測定成分含量回收率限度100%98-101%10%95-102%1%92-105%0.1%90-108%0.01%85-110%10μg/g(ppm)80-115%1μg/g75-120%10μg/kg(ppb)70-125%第17頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五2、精密度-重復(fù)性定義：指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。驗證方法：配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進行測試。第18頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度（相當于100%濃度水平）的供試品，用至少測定6次的結(jié)果進行評價；或設(shè)計3個不同濃度，每個濃度分別制備3份供試品溶液進行測定，用9個測定結(jié)果進行評價。2、精密度-重復(fù)性第19頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五2、精密度-中間精密度驗證方法：配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由二個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試。第20頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五3、精密度-重現(xiàn)性驗證方法：配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由不同實驗室、不同人員進行測試。第21頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五表2樣品中待測定成分含量和精密度RSD可接受范圍待測定成分含量重復(fù)性（RSD）重現(xiàn)性（RSD）100%1%2%10%1.5%3%1%2%4%0.1%3%6%0.01%4%8%10μg/g(ppm)6%11%1μg/g8%16%10μg/kg(ppb)15%32%第22頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五3、專屬性定義：指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測定出被測物的特性。驗證方法（鑒別反應(yīng)）：要求陰性樣品均呈負反應(yīng)。第23頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五3、專屬性驗證方法（含量測定及有關(guān)物質(zhì)）：要求輔料不干擾，雜質(zhì)分離度符合要求；陰性對照：薄層色譜、高效液相色譜、氣相色譜；影響因素試驗：雜質(zhì)檢查考察分離度。第24頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五3、專屬性可接受標準（含量測定）：空白對照應(yīng)無干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0，以二極管陣列檢測器進行純度分析時，主峰的純度因子應(yīng)大于980。第25頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五3、專屬性可接受標準（有關(guān)物質(zhì)）：空白對照應(yīng)無干擾，該雜質(zhì)峰與其他峰應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。第26頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五4、線性定義：指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接程正比關(guān)系的程度。驗證方法：在80%至120%的濃度范圍內(nèi)配制6份濃度不同的供試液，分別測定其主峰的面積，計算含量，進行線性回歸分析。第27頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五4、線性可接受標準（含量測定）：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸的截距應(yīng)在100%響應(yīng)值的2%以內(nèi)，響應(yīng)因子的RSD應(yīng)不大于2.0%.第28頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五4、線性可接受標準（有關(guān)物質(zhì)）：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.990，Y軸的截距應(yīng)在100%響應(yīng)值的25%以內(nèi)，響應(yīng)因子的RSD應(yīng)不大于10%.第29頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五5、范圍定義：范圍系指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準確度、精密度結(jié)果和要求確定。第30頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五5、范圍可接受標準：原料藥和制劑含量測定，范圍一般為測試濃度的80%~120%；制劑含量均勻度檢査，范圍一般為測試濃度的70%~130%,特殊劑型，如氣霧劑和噴霧劑，范圍可適當放寬。第31頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五5、范圍可接受標準：溶出度或釋放度中的溶出量測定，范圍一般為限度的±20%，如規(guī)定了限度范圍，則應(yīng)為下限的-20%至上限的+20%；第32頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五5、范圍可接受標準：雜質(zhì)測定，范圍應(yīng)根據(jù)初步實際測定數(shù)據(jù)，擬訂為規(guī)定限度的±20%。第33頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五6、檢測限定義：指試樣中被測物能被檢測出的最低量。驗證方法（直觀法）：用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。第34頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五6、檢測限驗證方法（信噪比法）：把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量?？山邮軜藴剩弘s質(zhì)峰與噪音峰信號的強度比應(yīng)不得小于3。第35頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五7、定量限定義：指試樣中被測物能被定量測定的最低量。驗證方法：把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地定量的最低濃度或量?？山邮軜藴剩弘s質(zhì)峰與噪音峰信號的強度比應(yīng)不得小于10。第36頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五8、耐用性定義：指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。驗證方法：分別考察流動相比例變化±5%、流動相pH變化±

0.2、柱溫變化±5℃、檢測波長變化±5nm、流速相對值變化±20%以及采用三根不同批號的色譜柱進行測定時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測定二次。第37頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五8、耐用性液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值、不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱、柱溫、流速等。氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相、不同類型的擔體、柱溫、進樣口和檢測器溫度等。經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否通過設(shè)計的系統(tǒng)適用性試驗，以確保方法有效。第38頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五8、耐用性可接受標準：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達到基線分離，各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的RSD應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對值在±

0.1%以內(nèi)。第39頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五9、系統(tǒng)適應(yīng)性驗證方法（含量測定）：配制6份相同濃度的供試品溶液進行分析。驗證方法（有關(guān)物質(zhì)）：配制6份相同濃度的雜質(zhì)溶液進行分析。第40頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五9、系統(tǒng)適應(yīng)性可接受標準（含量測定）：該雜質(zhì)峰面積的相對標準差（RSD）應(yīng)不大于2.0%，保留時間的RSD應(yīng)不大于1.0%，雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標準的規(guī)定。可接受標準（有關(guān)物質(zhì)）：該雜質(zhì)峰面積的相對標準差（RSD）應(yīng)不大于2.0%，保留時間的RSD應(yīng)不大于1.0%，雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于2.0，理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標準的規(guī)定。第41頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五10、溶液穩(wěn)定性驗證方法：按照分析方法分別配制對照品溶液與供試品溶液，平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量，然后將上述溶液分別貯存在室溫與冰箱冷藏室（4℃）中，在1、2、3、5和7天時分別平行測定兩次主成分與雜質(zhì)的含量?？山邮軜藴剩褐鞒煞值暮孔兓慕^對值應(yīng)不大于2.0%，雜質(zhì)含量的絕對值在±

0.1%以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報告限度的雜質(zhì)。第42頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五11、溶出量測定方法驗證如溶出量測定所用的溶劑（溶出介質(zhì)）與含量測定的溶劑不一致；溶出量測定濃度與含量測定濃度不一致；溶出度測定制劑為膠囊劑或需去除糖衣、薄膜衣后測定含量的片劑。第43頁，共50頁，2022年，5月20日，1點53分，星期五11、溶出量測定方法驗證主要包括以下內(nèi)容：（1）溶出介質(zhì)及介質(zhì)體積的選擇；（2）溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）及其轉(zhuǎn)速的選擇；（3）溶出量測定方法的驗證，（4）溶出度均一性試驗（批內(nèi)）、重現(xiàn)性試驗（批間）等。第44頁，共50頁，2022年，5月