湖南版高中生物總復(fù)習(xí)專題24 基因工程與蛋白質(zhì)工程（試題練）教學(xué)講練

高中生物總復(fù)習(xí)PAGEPAGE30成功的大門為你而開。專題24基因工程與蛋白質(zhì)工程【考情探究】課標(biāo)解讀考情分析備考指導(dǎo)考點考向1基因工程的工具與操作基因工程的原理及技術(shù)考查內(nèi)容:高考對本專題的知識考查涉及基因工程的基本工具和基本操作程序、基因工程的應(yīng)用以及蛋白質(zhì)工程等知識,其中對基因工程基本操作程序的考查頻率較高,多集中在基因表達(dá)載體的構(gòu)建、相關(guān)的篩選和鑒定方法等知識命題規(guī)律:本專題試題通常會融合植物細(xì)胞工程、動物細(xì)胞工程及胚胎工程進行綜合考查,也有以基因工程為背景的單獨考查。試題多以優(yōu)良植物品種培育、特殊蛋白質(zhì)制品的生產(chǎn)為背景,綜合考查基因工程的應(yīng)用。結(jié)合高考對其的能力要求可推知基因工程仍將是高考對本專題考查的重點,蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程,蛋白質(zhì)工程與基因工程的對比考查也是高考的新考向1.理解并熟記基因工程基本工具、基本操作程序、蛋白質(zhì)工程等基本知識,要能夠總結(jié)解題方法,并歸類、活用、延伸2.通過必要的題型訓(xùn)練,鞏固基礎(chǔ)知識,掌握解答本專題的試題的方法2基因工程的應(yīng)用與蛋白質(zhì)工程基因工程的應(yīng)用蛋白質(zhì)工程3生物技術(shù)的安全性與倫理問題轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性問題和生物武器生物技術(shù)的倫理問題4DNA的粗提取與鑒定DNA的粗提取與鑒定【真題探秘】基礎(chǔ)篇【基礎(chǔ)集訓(xùn)】考點一基因工程的工具與操作考向基因工程的原理與技術(shù)大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因,其編碼的產(chǎn)物β-半乳糖苷酶在X-Gal和IPTG同時存在時,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落呈現(xiàn)白色。如圖為利用該質(zhì)粒進行的轉(zhuǎn)基因過程,請據(jù)圖回答下列相關(guān)問題:(1)圖中切割目的基因時用到種限制酶,而切割質(zhì)粒時用到的限制酶是。

(2)在基因工程的“四步曲”中,是基因工程的核心步驟,步驟沒有堿基互補配對現(xiàn)象。

(3)圖中的受體細(xì)胞是,其作為受體細(xì)胞的優(yōu)點是(至少答出兩點)。

(4)在培養(yǎng)基中加入X-Gal和IPTG的目的是;結(jié)合題干信息,菌落①②③的顏色分別是、、。

答案(1)2EcoRⅠ(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(3)大腸桿菌繁殖快,遺傳物質(zhì)相對較少,易培養(yǎng)等(4)篩選藍(lán)色藍(lán)色白色考點二基因工程的應(yīng)用與蛋白質(zhì)工程考向1基因工程的應(yīng)用1.依據(jù)復(fù)制與宿主菌相關(guān)程度不同,細(xì)菌中的質(zhì)粒分松散型質(zhì)粒和嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒。當(dāng)宿主菌蛋白質(zhì)合成停止時,嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒DNA復(fù)制隨之停止,松散型質(zhì)粒DNA復(fù)制仍可進行。(1)通常選用松散型質(zhì)粒作為基因工程載體,原因是。

(2)轉(zhuǎn)化是指。

(3)動物基因工程通常用作受體細(xì)胞,當(dāng)胚胎發(fā)育到階段時,通過技術(shù)移植母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育,暫不移植的胚胎可使用方法保存。

(4)同一基因在不同生物中表達(dá)產(chǎn)生相同蛋白質(zhì)的原因是。

答案(1)目的基因容易復(fù)制(不容易受干擾)(2)目的基因進入受體細(xì)胞并維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程(3)受精卵囊胚或桑椹胚胚胎移植冷凍(4)生物界共用一套遺傳密碼考向2蛋白質(zhì)工程2.已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P),該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運蛋白,由305個氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸,240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸,改變后的蛋白質(zhì)(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉栴}:(1)從上述資料可知,若要改變蛋白質(zhì)的功能,可以考慮對蛋白質(zhì)的進行改造。

(2)以P基因序列為基礎(chǔ),獲得P1基因的途徑有修飾

基因或合成基因。所獲得的基因表達(dá)時是遵循中心法則的,中心法則的全部內(nèi)容包括

的復(fù)制;以及遺傳信息在不同分子之間的流動,即:。

(3)蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程,其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā),通過和,進而確定相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列,據(jù)此獲得基因,再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì),之后還需要對蛋白質(zhì)的生物進行鑒定。

答案(1)氨基酸序列(或結(jié)構(gòu))(2)PP1DNA和RNA(或遺傳物質(zhì))DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白質(zhì)(或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯)(3)設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測氨基酸序列功能考點三生物技術(shù)的安全性與倫理問題考向1轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性問題和生物武器1.請根據(jù)所學(xué)知識回答下列問題:(1)轉(zhuǎn)基因食品是用含有的生物及其產(chǎn)物制成的食品。生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因食品首先要培育轉(zhuǎn)基因生物。若培育轉(zhuǎn)基因動物最好以作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞。對植物體細(xì)胞和生殖細(xì)胞進行組織培養(yǎng)均能直接產(chǎn)生試管苗,但動物的體細(xì)胞不能直接培養(yǎng)成動物新個體的原因是;克隆羊多利培育成功說明具有全能性。在培育轉(zhuǎn)人胰島素基因酵母菌的過程中,常采用逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因,所選擇的的供體細(xì)胞為(供選答案:胰島A細(xì)胞、胰島B細(xì)胞、受精卵、干細(xì)胞)。

(2)生物武器是一種大規(guī)模的殺傷性武器,它與常規(guī)武器相比有許多特點:①,②污染面廣,③難以防治。中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中,重申在任何情況下不發(fā)展、、不儲存生物武器。

答案(1)外源基因受精卵動物細(xì)胞的全能性受到限制動物的細(xì)胞核胰島B細(xì)胞(2)傳染性強不生產(chǎn)考向2生物技術(shù)的倫理問題2.試管嬰兒是通俗名詞,在專業(yè)文獻中稱為體外受精及胚胎移植。試管嬰兒是指精子和卵子的結(jié)合是在試管內(nèi)進行的,并使受精卵在符合條件的環(huán)境內(nèi)生長、分裂和發(fā)育形成胚胎(如圖所示),然后將胚胎移植到子宮腔內(nèi),使之能在子宮腔內(nèi)發(fā)育,最后出生。它的成功和發(fā)展,不僅給不孕不育夫婦帶來了希望,而且對研究人類的生殖生理和胚胎發(fā)生學(xué)以及優(yōu)生學(xué)等方面的課題有不可估量的積極作用。(1)圖示時期是胚胎發(fā)育的期,若要從圖中所示的胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞,應(yīng)從分離培養(yǎng)。

(2)“試管嬰兒”是指精子和卵子在試管內(nèi)進行結(jié)合,受精前精子需要事先經(jīng)過處理,卵子要培養(yǎng)到(時期)。除此之外還用到(填兩種)技術(shù)。

(3)“試管嬰兒”技術(shù)誕生后,繼而出現(xiàn)了“設(shè)計試管嬰兒”技術(shù),二者區(qū)別是①用途不同:;②后者胚胎在移植前需進行。

(4)現(xiàn)在大多數(shù)人反對設(shè)計嬰兒性別,其原因是。

答案(1)囊胚內(nèi)細(xì)胞團(2)獲能減數(shù)第二次分裂中期(或MⅡ中期)早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植(3)前者主要用于治療不孕夫婦的不孕癥,后者可以用于治療需要骨髓移植或造血干細(xì)胞移植的疾病遺傳學(xué)診斷(4)破壞了人類正常的性別比例,違反了倫理道德考點四DNA的粗提取與鑒定考向DNA的粗提取與鑒定DNA提取過程中可以選用雞血或者菜花作為實驗材料。請回答下列關(guān)于DNA粗提取和鑒定的問題:(1)使用雞血提取DNA時,需在雞血中加入檸檬酸鈉,目的是;在雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水,目的是。

(2)使用菜花提取DNA時,需要研磨,研磨時可加入一定的洗滌劑和食鹽,其作用分別是和。

(3)DNA在濃度為mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低。使用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA(填“析出”或“溶解”)。

(4)使用二苯胺鑒定DNA時,需要在條件下進行,DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)色。

答案(1)防止血液凝固使雞血細(xì)胞破裂(2)瓦解細(xì)胞膜溶解DNA(3)0.14析出(4)沸水浴藍(lán)應(yīng)用篇【應(yīng)用集訓(xùn)】應(yīng)用口蹄疫病毒VP1基因在胡蘿卜中的表達(dá)及轉(zhuǎn)基因大米的培育我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低,科研人員通過基因工程等技術(shù),培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻,改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)。如圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻流程示意圖,請回答下列問題:(1)鐵結(jié)合蛋白基因可來自菜豆,且基因的脫氧核苷酸序列已知,可以用法獲得此目的基因或用技術(shù)擴增此目的基因。

(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時,通常要用分別切割。將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時,可以用處理農(nóng)桿菌,使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入。

(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時,通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng),可以獲得;培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是。檢測培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到,需要檢測轉(zhuǎn)基因水稻。

(4)為研究外源基因的遺傳方式,將T0植株上收獲的種子種植成T1株系,檢測各單株的潮霉素抗性。在檢測的多數(shù)T1株系內(nèi),抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為3∶1,此結(jié)果說明外源基因的遺傳符合定律。有少數(shù)T1株系的植株表現(xiàn)為對潮霉素敏感,但其體內(nèi)能檢測到鐵結(jié)合蛋白基因,造成這一結(jié)果最可能的原因是。

答案(1)化學(xué)合成(或從基因文庫中獲取)PCR(2)(同種)限制性核酸內(nèi)切酶含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒CaCl2溶液(3)含有重組質(zhì)粒(或含有潮霉素抗性基因)的愈傷組織生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同(成熟)種子中鐵含量(4)(基因)分離潮霉素抗性基因沒有表達(dá)(或“潮霉素抗性基因丟失”)【五年高考】1.(2019課標(biāo)全國Ⅰ,38,15分)基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因?；卮鹣铝袉栴}。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。

(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。

(3)目前在PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是。

答案(1)基因組文庫cDNA文庫(2)解旋酶加熱至90~95℃氫鍵(3)Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活2.(2019江蘇單科,33節(jié)選,6分)圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請回答下列問題:圖(1)EcoRⅤ酶切位點為…GAT↓ATC……CTA↑TAG…(2)用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個堿基為的脫氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。

(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進行篩選,得到A、B、C三類菌落,其生長情況如下表(“+”代表生長,“-”代表不生長)。根據(jù)表中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是(填表中字母)類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是、。

平板類型菌落類型ABC無抗生素+++氨芐青霉素++-四環(huán)素+--氨芐青霉素+四環(huán)素+--答案(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA連接(3)BA類菌落含有P0C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒3.(2019江蘇單科,29,8分)利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中,然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬,可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程,請回答下列問題:(1)對1號豬使用處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在時期的卵母細(xì)胞用于核移植。

(2)采集2號豬的組織塊,用處理獲得分散的成纖維細(xì)胞,放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的作用是。

(3)為獲得更多基因編輯豬,可在胚胎移植前對胚胎進行。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自號豬。

(4)為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號豬并正常表達(dá),可采用的方法有(填序號)。

①DNA測序 ②染色體倍性分析③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析 ④抗原—抗體雜交答案(8分)(1)促性腺激素減數(shù)第二次分裂中期(2)胰蛋白酶(膠原蛋白酶)維持培養(yǎng)液的pH(3)分割2(4)①④4.(2019天津理綜,9,12分)B基因存在于水稻基因組中,其僅在體細(xì)胞(2n)和精子中正常表達(dá),但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對卵細(xì)胞的影響,設(shè)計了如下實驗。據(jù)圖回答:(1)B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄,推測其可能的原因是卵細(xì)胞中(單選)。

A.含B基因的染色體缺失B.DNA聚合酶失活C.B基因發(fā)生基因突變D.B基因的啟動子無法啟動轉(zhuǎn)錄(2)從水稻體細(xì)胞或中提取總RNA,構(gòu)建文庫,進而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因(表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光)連接成融合基因(表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能),然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。

(3)在過程①、②轉(zhuǎn)化篩選時,過程中T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上,過程在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。

(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中,以下鑒定篩選方式正確的是(多選)。

A.將隨機斷裂的B基因片段制備成探針進行DNA分子雜交B.以Luc基因為模板設(shè)計探針進行DNA分子雜交C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交D.檢測加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光(5)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個染色體組,判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而一般情況下水稻卵細(xì)胞在未受精時不進行發(fā)育,由此表明。

答案(共12分)(1)D(2)精子cDNA(3)②①(4)BCD(5)B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚5.(2018課標(biāo)全國Ⅰ,38,15分)回答下列問題:(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)?？梢宰鳛檩d體外,還證明了

(答出兩點即可)。

體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+參與的方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞;而體外重組的噬菌體DNA通常需與組裝成完整噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞。在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中,可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是。

(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時,表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解,在實驗中應(yīng)選用的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加的抑制劑。

答案(1)體外重組的質(zhì)?？梢赃M入受體細(xì)胞;真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)(2)轉(zhuǎn)化外殼蛋白(或答噬菌體蛋白)細(xì)菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶6.(2018課標(biāo)全國Ⅱ,38,15分)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5'末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點的示意圖如下,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。啟動子L1基因GFP基因終止子E1E2E3E4回答下列問題:(1)據(jù)圖推斷,該團隊在將甲插入質(zhì)粒P0時,使用了兩種限制酶,這兩種酶是。使用這兩種酶進行酶切是為了保證,也是為了保證。

(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后,若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了和過程。

(3)為了獲得含有甲的牛,該團隊需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的移入牛的中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。

(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進行鑒定,在鑒定時應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。

答案(1)E1和E4甲的完整甲與載體正確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞(4)核DNA7.(2018海南單科,31,15分)甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)。為了改善黃瓜的品質(zhì),科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細(xì)胞,得到了轉(zhuǎn)基因植株。回答下列問題:(1)用農(nóng)桿菌感染時,應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜(填“受傷的”或“完好的”)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng),選用這種葉片的理由是。

(2)若在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白,則表明該重組質(zhì)粒中已轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中且能夠表達(dá);用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交,發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個體數(shù)與不含甜蛋白個體數(shù)之比為1∶1,則說明甜蛋白基因已經(jīng)整合到(填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組”)中。

(3)假設(shè)某種轉(zhuǎn)基因作物因為受到病毒感染而減產(chǎn),若要以該轉(zhuǎn)基因作物為材料獲得脫毒苗,應(yīng)選用作為外植體進行組織培養(yǎng)。

(4)通常,基因工程操作主要有4個步驟,即目的基因獲取、重組表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。因此,基因工程的含義可概括為

。

答案(15分)(1)受傷的葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類物質(zhì),可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞(2)甜蛋白基因核基因組(3)莖尖(4)按照人們的愿望進行設(shè)計,并通過體外重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物新的遺傳特性,創(chuàng)造出符合人們需要的新生物類型8.(2018江蘇單科,32,8分)為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶,研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656個堿基對),利用基因工程大量制備α-淀粉酶,實驗流程見圖。請回答下列問題:(1)利用PCR技術(shù)擴增α-淀粉酶基因前,需先獲得細(xì)菌的。

(2)為了便于擴增的DNA片段與表達(dá)載體連接,需在引物的端加上限制性酶切位點,且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點,主要目的是。

(3)進行擴增時,反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設(shè)定,下列選項中的設(shè)定與引物有關(guān),的設(shè)定與擴增片段的長度有關(guān)。(填序號)

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時間⑤退火時間⑥延伸時間(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列:5'-AUGCCAUCAACAAAUACUAACACUU……-3'圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含個密碼子,如虛線框后的序列未知,預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有種。

(5)獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性,結(jié)果如下:緩沖液50mmol/LNa2HPO4-KH2PO450mmol/LTris-HCl50mmol/LGly-NaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相對活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根據(jù)上述實驗結(jié)果,初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為。

答案(8分)(1)基因組DNA(2)5'使DNA片段能定向插入表達(dá)載體,減少自連(3)②⑥(4)813(5)pH為8.5,緩沖液為50mmol/LTirs-HCl9.(2018天津理綜,10,14分)甲型流感病毒為RNA病毒,易引起流感大規(guī)模流行。我國科學(xué)家在2017年發(fā)明了一種制備該病毒活疫苗的新方法,主要環(huán)節(jié)如下。(1)改造病毒的部分基因,使其失去在正常宿主細(xì)胞內(nèi)的增殖能力。以病毒RNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄成對應(yīng)DNA后,利用技術(shù)擴增,并將其中某些基因(不包括表面抗原基因)內(nèi)個別編碼氨基酸的序列替換成編碼終止密碼子的序列。與改造前的基因相比,改造后的基因表達(dá)時不能合成完整長度的,因此不能產(chǎn)生子代病毒。將該改造基因、表面抗原等其他基因分別構(gòu)建重組質(zhì)粒,并保存。

(2)構(gòu)建適合改造病毒增殖的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。設(shè)計合成一種特殊tRNA的基因,其產(chǎn)物的反密碼子能與(1)中的終止密碼子配對結(jié)合,并可攜帶一個非天然氨基酸(Uaa)。將該基因與連接后導(dǎo)入宿主細(xì)胞。提取宿主細(xì)胞的進行分子雜交鑒定,篩選獲得成功表達(dá)上述tRNA的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。

(3)利用轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞制備疫苗。將(1)中的重組質(zhì)粒導(dǎo)入(2)中的轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞,并在補加的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),則該宿主細(xì)胞能利用上述特殊tRNA,翻譯出改造病毒基因的完整蛋白,產(chǎn)生大量子代病毒,用于制備疫苗。

特殊tRNA基因轉(zhuǎn)錄時,識別其啟動子的酶是(單選)。

A.病毒的DNA聚合酶B.宿主的DNA聚合酶C.病毒的RNA聚合酶D.宿主的RNA聚合酶(4)上述子代病毒不能在正常宿主細(xì)胞中增殖,沒有致病性,因此不經(jīng)滅活或減毒即可制成疫苗。與不具侵染性的流感病毒滅活疫苗相比,該病毒活疫苗的優(yōu)勢之一是可引起免疫,增強免疫保護效果。

答案(共14分)(1)PCR多肽(或蛋白質(zhì))(2)載體總RNA(3)非天然氨基酸(Uaa)D(4)細(xì)胞10.(2017課標(biāo)全國Ⅰ,38,15分)真核生物基因中通常有內(nèi)含子,而原核生物基因中沒有,原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機制。已知在人體中基因A(有內(nèi)含子)可以表達(dá)出某種特定蛋白(簡稱蛋白A)?；卮鹣铝袉栴}:(1)某同學(xué)從人的基因組文庫中獲得了基因A,以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白A,其原因是。

(2)若用家蠶作為表達(dá)基因A的受體,在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中,不選用作為載體,其原因是。

(3)若要高效地獲得蛋白A,可選用大腸桿菌作為受體。因為與家蠶相比,大腸桿菌具有(答出兩點即可)等優(yōu)點。

(4)若要檢測基因A是否翻譯出蛋白A,可用的檢測物質(zhì)是(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”)。

(5)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻,也可以說是基因工程的先導(dǎo),如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示,那么,這一啟示是。

答案(1)基因A有內(nèi)含子,在大腸桿菌中,其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列不能被切除,無法表達(dá)出蛋白A(2)噬菌體噬菌體的宿主是細(xì)菌,而不是家蠶(3)繁殖快、容易培養(yǎng)(4)蛋白A的抗體(5)DNA可以從一種生物個體轉(zhuǎn)移到另一種生物個體11.(2017課標(biāo)全國Ⅲ,38,15分)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}:(1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是。

(2)某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中,在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為,加入了作為合成DNA的原料。

(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用,某同學(xué)做了如下實驗:將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對照,培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細(xì)胞濃度,結(jié)果如圖2。①由圖2可知:當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時,添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加,此時若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是。

②僅根據(jù)圖1、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。

答案(1)編碼乙的DNA序列起始端無ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA無起始密碼子(2)模板dNTP(3)①進行細(xì)胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液的pH②C12.(2017課標(biāo)全國Ⅱ,38,15分)幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}:(1)在進行基因工程操作時,若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料,原因是。提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是。

(2)以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是。

(3)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是(答出兩點即可)。

(4)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。

(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是。

答案(1)嫩葉組織細(xì)胞易破碎防止RNA降解(2)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補配對的原則可以合成cDNA(3)目的基因無復(fù)制原點;目的基因無表達(dá)所需啟動子(4)磷酸二酯鍵(5)目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常13.(2016課標(biāo)全國Ⅰ,40,15分)某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問題:(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有(答出兩點即可),而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。

(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是;并且和的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因是。在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落,還需使用含有的固體培養(yǎng)基。

(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來自。

答案(1)能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因(2)二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或答含有重組質(zhì)粒)二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長四環(huán)素(3)受體細(xì)胞14.(2016課標(biāo)全國Ⅲ,40,15分)圖(a)中的三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性內(nèi)切酶的識別序列與切割位點,圖(b)為某種表達(dá)載體的示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的)。圖(a)圖(b)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:(1)經(jīng)BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被酶切后的產(chǎn)物連接,理由是。

(2)若某人利用圖(b)所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子,如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有,不能表達(dá)的原因是。

圖(c)(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有和,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。

答案(1)Sau3AⅠ兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端(每空2分,共4分)(2)甲和丙(2分)甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄(3分,其他合理答案可酌情給分)(3)E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶T4DNA連接酶(每空2分,共6分,其他合理答案可酌情給分)教師專用題組1.(2017天津理綜,9Ⅰ,12分)玉米自交系(遺傳穩(wěn)定的育種材料)B具有高產(chǎn)、抗病等優(yōu)良性狀,但難以直接培育成轉(zhuǎn)基因植株,為使其獲得抗除草劑性狀,需依次進行步驟Ⅰ、Ⅱ試驗。Ⅰ.獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米自交系A(chǔ),技術(shù)路線如下圖。(1)為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化,構(gòu)建表達(dá)載體需用2種限制酶,選擇的原則是(單選)。

①Ti質(zhì)粒內(nèi),每種限制酶只有一個切割位點②G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中,每種限制酶只有一個切割位點③酶切后,G基因形成的兩個黏性末端序列不相同④酶切后,Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列相同A.①③ B.①④ C.②③ D.②④(2)下表是4種玉米自交系幼胚組織培養(yǎng)不同階段的結(jié)果。據(jù)表可知,細(xì)胞脫分化時使用的激素是,自交系的幼胚最適合培養(yǎng)成愈傷組織作為轉(zhuǎn)化受體。

自交系結(jié)果激素2,4-D(2.0mg/L)6-BA(0.5mg/L)IBA(2.0mg/L)愈傷組織形成率(%)芽的分化率(%)根的誘導(dǎo)率(%)甲991390乙858087丙888312丁168583農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時,T-DNA攜帶插入其內(nèi)的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織,需使用含的選擇培養(yǎng)基。

(4)轉(zhuǎn)化過程中,愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌,導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá),其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。用K分別處理以下愈傷組織,出現(xiàn)藍(lán)色的是(多選)。

A.無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織B.無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織C.農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織D.農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織(5)組織培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株(核DNA中僅插入一個G基因)進行自交,在子代含G基因的植株中,純合子占。繼續(xù)篩選,最終選育出抗除草劑純合自交系A(chǔ)。

答案(共12分)(1)A(2)2,4-D乙(3)除草劑(4)BD(5)12.(2017江蘇單科,33,8分)金屬硫蛋白(MT)是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白,某研究小組計劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴增獲得目的基因,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌,用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴增過程示意圖如下,請回答下列問題:(1)從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA,通過獲得用于PCR擴增。

(2)設(shè)計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物(引物1和引物2),為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當(dāng)?shù)奈稽c。設(shè)計引物時需要避免引物之間形成,而造成引物自連。

(3)圖中步驟1代表,步驟2代表退火,步驟3代表延伸,這三個步驟組成一輪循環(huán)。

(4)PCR擴增時,退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會破壞的堿基配對。退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān),長度相同但的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。

(5)如果PCR反應(yīng)得不到任何擴增產(chǎn)物,則可以采取的改進措施有(填序號:①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計引物)。

答案(8分)(1)逆轉(zhuǎn)錄cDNA(2)限制性核酸內(nèi)切酶堿基互補配對(3)變性(4)引物與模板GC含量高(5)②③3.(2014課標(biāo)Ⅱ,40,15分)植物甲具有極強的耐旱性,其耐旱性與某個基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因,并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性?；卮鹣铝袉栴}:(1)理論上,基因組文庫含有生物的基因;而cDNA文庫中含有生物的基因。

(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因,可首先建立該植物的基因組文庫,再從中出所需的耐旱基因。

(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌,并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物的體細(xì)胞中,經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá),應(yīng)檢測此再生植株中該基因的,如果檢測結(jié)果呈陽性,再在田間試驗中檢測植株的是否得到提高。

(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交,子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1時,則可推測該耐旱基因整合到了(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。

答案(15分)(1)全部(2分)部分(2分,其他合理答案也給分)(2)篩選(2分,其他合理答案也給分)(3)乙(2分)表達(dá)產(chǎn)物(2分,其他合理答案也給分)耐旱性(2分)(4)同源染色體的一條上(3分)4.(2013課標(biāo)Ⅰ,40,15分)閱讀如下資料:資料甲:科學(xué)家將牛生長激素基因?qū)胄∈笫芫阎?得到了體型巨大的“超級小鼠”;科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。資料乙:T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性?？茖W(xué)家對編碼T4溶菌酶的基因進行了改造,使其表達(dá)的T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵,提高了T4溶菌酶的耐熱性。資料丙:兔甲和兔乙是同一物種的兩個雌性個體,科學(xué)家將兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移植到兔乙體內(nèi),成功產(chǎn)出兔甲的后代,證實了同一物種的胚胎可在不同個體的體內(nèi)發(fā)育。回答下列問題:(1)資料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用法。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是和。在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時,常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是。

(2)資料乙中的技術(shù)屬于工程的范疇。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對進行改造,或制造一種的技術(shù)。在該實例中,引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的序列發(fā)生了改變。

(3)資料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到種的、生理狀態(tài)相同的另一個雌性動物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育成新個體的技術(shù)。在資料丙的實例中,兔甲稱為體,兔乙稱為體。

答案(1)顯微注射限制性內(nèi)切酶DNA連接酶農(nóng)桿菌可感染植物,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中(2)蛋白質(zhì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)新蛋白質(zhì)氨基酸(3)同供受5.(2012課標(biāo),40,15分)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有和。

(2)質(zhì)粒運載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:AATTC……GG……CTTAA為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點是。

(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即DNA連接酶和DNA連接酶。

(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是,產(chǎn)物是。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用技術(shù)。

(5)基因工程中除質(zhì)粒外,和也可作為運載體。

(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是。

答案(1)黏性末端平末端(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同(其他合理答案也可)(3)大腸桿菌T4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌體動植物病毒(其他合理答案也可)(6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱(其他合理答案也可)【三年模擬】時間:40分鐘分值:65分非選擇題(共65分)(2019湖南雅禮中學(xué)高考模擬,12)人類疾病的轉(zhuǎn)基因生物模型常用于致病機理的研究及治療藥物的篩選。利用正常大鼠(2N)制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示(注:基因B為高血壓相關(guān)基因)。(15分)在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中,涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有(寫出兩項即可)。

(2)體外擴增目的基因B可利用技術(shù),該技術(shù)的基本原理是。

(3)如果要建立高血壓轉(zhuǎn)基因動物模型,就要檢測高血壓相關(guān)基因是否已成功表達(dá),在分子水平上檢測到相應(yīng),在個體水平上大鼠出現(xiàn)癥狀,證明相關(guān)基因已成功表達(dá)。

(4)基因B在導(dǎo)入受精卵之前要構(gòu)建,這個步驟是基因工程的核心,其除含目的基因,還必須含有。轉(zhuǎn)基因大鼠的胚胎在代孕母體內(nèi)能夠存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是。

答案(1)基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、核移植和胚胎移植(2)PCRDNA雙鏈復(fù)制(3)蛋白質(zhì)高血壓(4)基因表達(dá)載體啟動子、終止子、標(biāo)記基因代孕母體對供體胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)2.(2019湖南湖北八市十二校第二次調(diào)研聯(lián)考,12)Bt基因即蘇云金芽孢桿菌基因,其表達(dá)產(chǎn)物是一種毒性很強的蛋白質(zhì)晶體,能使一些鱗翅目害蟲癱瘓致死。如圖為培養(yǎng)轉(zhuǎn)Bt基因試管苗的基本操作過程。(15分)(1)Bt基因可從構(gòu)建的Bt基因組文庫中獲取,也可以從其cDNA文庫中獲取,后者獲取的基因與前者的區(qū)別是(填“含有”或“不含有”)啟動子。若目的基因滿足條件時,也可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。