2022年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題-關(guān)于一般藥理、急性毒性和長(zhǎng)期毒性研

關(guān)于一般(yībān)藥理、急性毒性和長(zhǎng)期毒性研究非臨床(línchuánɡ)研究評(píng)價(jià)之王慶利國(guó)家(guójiā)藥品審評(píng)中心第一頁(yè)，共八十頁(yè)。幾個(gè)概念一般藥理學(xué)研究(yánjiū)急性毒性研究長(zhǎng)期毒性研究?jī)?nèi)容提要(nèirónɡtíyào)第二頁(yè)，共八十頁(yè)。主要藥效學(xué)PrimaryPharmacodynamics期望的與治療目的相關(guān)的效應(yīng)和作用機(jī)制次要藥效學(xué)SecondaryPharmacodynamics非期望的、與治療目的不相關(guān)的效應(yīng)和作用機(jī)制安全藥理學(xué)SafetyPharmacology治療范圍(fànwéi)內(nèi)或以上，潛在的對(duì)生理功能的不良影響一般藥理學(xué)GeneralPharmacology主要藥效學(xué)作用以外進(jìn)行的廣泛的藥理學(xué)研究包括次要藥效學(xué)和安全藥理學(xué)幾個(gè)(jǐɡè)概念第三頁(yè)，共八十頁(yè)。一般(yībān)毒理GeneralToxicology安全藥理學(xué)單次給藥毒性重復(fù)給藥毒性等特殊毒理SpecialToxicology“三致”致癌致畸致突變遺傳毒性（致突變）生殖毒性（致畸）致癌性幾個(gè)(jǐɡè)概念第四頁(yè)，共八十頁(yè)。臨床(línchuánɡ)前研究PreclinicalStudyPreclinicalEfficacyStudyPreclinicalSafetyStudy非臨床研究NonclinicalStudyNonclinicalEfficacyStudyNonclinicalSafetyStudy前臨床研究（×）幾個(gè)(jǐɡè)概念第五頁(yè)，共八十頁(yè)。一般藥理學(xué)指對(duì)主要藥效學(xué)作用以外進(jìn)行(jìnxíng)的廣泛的藥理學(xué)研究，包括安全藥理學(xué)和次要藥效學(xué)研究。安全藥理學(xué)主要是研究藥物在治療范圍內(nèi)或治療范圍以上的劑量時(shí)，潛在的不期望出現(xiàn)的對(duì)生理功能的不良影響，即觀察藥物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。根據(jù)需要可能進(jìn)行追加和/或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究。一般(yībān)藥理學(xué)第六頁(yè)，共八十頁(yè)。安全藥理學(xué)概念最早出現(xiàn)于1997年ICHM3指導(dǎo)原則和S6指導(dǎo)原則，重點(diǎn)發(fā)現(xiàn)新藥的不良反應(yīng)，為新藥進(jìn)入臨床或上市(shàngshì)提供參考而一般藥理學(xué)出現(xiàn)較早，如1991日本厚生勞動(dòng)省制定一般藥理學(xué)研究指南，側(cè)重于發(fā)現(xiàn)新藥對(duì)器官功能不能預(yù)測(cè)的作用和其他藥理學(xué)作用一般(yībān)藥理學(xué)第七頁(yè)，共八十頁(yè)。2001年的ICH制訂安全藥理學(xué)指導(dǎo)原則，即S7ASafetyPharmacologyStudiesforHumanPharmaceuticals，重視了對(duì)藥物的安全性評(píng)價(jià)與臨床的相關(guān)意義(yìyì)當(dāng)前，在新藥研究領(lǐng)域，一般藥理學(xué)的概念逐漸淡出，被安全藥理學(xué)替代。當(dāng)前的內(nèi)容實(shí)質(zhì)基本一致一般(yībān)藥理學(xué)第八頁(yè)，共八十頁(yè)。我國(guó)在制定指導(dǎo)原則時(shí)考慮了上述歷史和現(xiàn)狀與《注冊(cè)管理辦法》等法規(guī)(fǎguī)保持一致，并符合傳統(tǒng)習(xí)慣與國(guó)際接軌中外結(jié)合：一般藥理學(xué)（SafetyPharmacology)屬于安全性研究范疇，需要遵循GLP規(guī)范一般(yībān)藥理學(xué)第九頁(yè)，共八十頁(yè)。一般(yībān)藥理學(xué)試驗(yàn)SafetyPharmacology

Study王慶利胡曉敏藥審中心藥理毒理學(xué)部第十頁(yè)，共八十頁(yè)。研究目的通過(guò)一般藥理學(xué)的研究，確定藥物非期望藥效(yàoxiào)的性質(zhì)，它可能關(guān)系到人的安全性；評(píng)價(jià)藥物在毒理學(xué)或/和臨床研究中所觀察到的不良藥物作用和/或病理生理作用；研究所觀察到的和/或推測(cè)的不良藥物作用機(jī)制。一般(yībān)藥理學(xué)第十一頁(yè)，共八十頁(yè)。意義與藥效、毒理作用的關(guān)系-藥物(yàowù)臨床前研究是一個(gè)系統(tǒng)工程，為長(zhǎng)毒試驗(yàn)設(shè)計(jì)指標(biāo)提供參考一般藥理學(xué)屬于廣泛的藥理作用和安全性試驗(yàn)的范圍，與藥效、毒理研究密切相關(guān)有助于了解新藥藥理作用的機(jī)制有利于新的藥理作用的發(fā)現(xiàn)一般(yībān)藥理學(xué)第十二頁(yè)，共八十頁(yè)。試驗(yàn)材料在體試驗(yàn)常用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬等動(dòng)物選擇(xuǎnzé)應(yīng)與試驗(yàn)方法相匹配體外試驗(yàn)離體器官及組織、細(xì)胞、受體等一般(yībān)藥理學(xué)第十三頁(yè)，共八十頁(yè)。試驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)(shíyàn)動(dòng)物排除了貓建議用清醒動(dòng)物麻醉狀態(tài)下，心率、血壓、體溫等逐漸降低麻醉藥物影響心血管系統(tǒng)，如戊巴比妥鈉，深度麻醉可見(jiàn)QT間期延長(zhǎng)計(jì)算QTC舉例：XX脂質(zhì)體，顯著延長(zhǎng)麻醉犬QT間期一般(yībān)藥理學(xué)第十四頁(yè)，共八十頁(yè)。受試物口服制劑：一般用原料外用藥物和注射劑：一般用制劑受試物盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究的一致(yīzhì)受試物與臨床樣品相關(guān)性：工藝、處方等一般(yībān)藥理學(xué)第十五頁(yè)，共八十頁(yè)。樣本量分組及每組動(dòng)物數(shù)的設(shè)定(shèdìnɡ)，應(yīng)以能科學(xué)合理地解釋所獲得的試驗(yàn)結(jié)果，恰當(dāng)?shù)胤从秤猩飳W(xué)意義的作用，并符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求為原則小動(dòng)物每組一般不少于10只，大動(dòng)物每組一般不少于6只一般(yībān)藥理學(xué)第十六頁(yè)，共八十頁(yè)。劑量在體試驗(yàn)觀察不良反應(yīng)的劑量—反應(yīng)關(guān)系，時(shí)效關(guān)系劑量包括或超過(guò)主要藥效學(xué)的有效劑量或治療范圍如果研究中缺乏不良反應(yīng)的結(jié)果，試驗(yàn)的最高劑量為相似給藥途徑(tújìng)和給藥時(shí)間的其它毒理試驗(yàn)中產(chǎn)生中等強(qiáng)度不良反應(yīng)的劑量體外試驗(yàn)確定受試物的濃度—效應(yīng)關(guān)系一般(yībān)藥理學(xué)第十七頁(yè)，共八十頁(yè)。對(duì)照溶媒和/或輔料吐溫（犬）、乳糖等陽(yáng)性(yángxìng)對(duì)照藥化藥

1.3類(lèi)：光學(xué)異構(gòu)體，消旋體及另外對(duì)映體

2類(lèi)：改變給藥途徑，原途徑

4類(lèi)：改變酸根、堿基的藥物，原化合物一般(yībān)藥理學(xué)第十八頁(yè)，共八十頁(yè)。給藥途徑(tújìng)與臨床擬用途徑一致。如果有多個(gè)臨床擬用給藥途徑時(shí)，分別采用相應(yīng)的給藥途徑評(píng)價(jià)其作用更合適對(duì)于在動(dòng)物試驗(yàn)中難以實(shí)施的特殊的臨床給藥途徑，可根據(jù)受試物的特點(diǎn)選擇噴霧劑、吸入劑、舌下用藥一般(yībān)藥理學(xué)第十九頁(yè)，共八十頁(yè)。給藥次數(shù)一般采用單次給藥根據(jù)具體情況合理設(shè)計(jì)與藥效、毒理相關(guān)主要(zhǔyào)藥效學(xué)：多次給藥起效毒理：重復(fù)給藥反應(yīng)一般(yībān)藥理學(xué)第二十頁(yè)，共八十頁(yè)。觀察時(shí)間制劑特點(diǎn)(tèdiǎn)：緩釋制劑藥效學(xué)特點(diǎn)藥代動(dòng)力學(xué)特性擬臨床研究方案一般(yībān)藥理學(xué)第二十一頁(yè)，共八十頁(yè)。主要研究?jī)?nèi)容核心組合試驗(yàn)—對(duì)重要生命功能系統(tǒng)的影響精神(jīngshén)神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)追加和/補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、腎臟系統(tǒng)、植物神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸系統(tǒng)其它研究潛在的依賴(lài)性、免疫功能、內(nèi)分泌功能一般(yībān)藥理學(xué)第二十二頁(yè)，共八十頁(yè)。核心組合試驗(yàn)心血管、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)重視藥品潛在的心室復(fù)極化延遲作用（QT間期延長(zhǎng)(yáncháng))的評(píng)價(jià):抗精神病、抗組胺類(lèi)、抗心率失常類(lèi)、消化系統(tǒng)藥物、氟喹諾酮類(lèi)藥物

ICH：評(píng)價(jià)人用藥品潛在致心室復(fù)極化延遲作用（QT間期延長(zhǎng)）的安全藥理學(xué)研究（S7B）一般(yībān)藥理學(xué)第二十三頁(yè)，共八十頁(yè)。追加安全性藥理學(xué)研究根據(jù)(gēnjù)藥物的藥理性質(zhì)和化學(xué)類(lèi)型，估計(jì)可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)，可能需要進(jìn)一步追加安全藥理學(xué)研究項(xiàng)目如果對(duì)已有的動(dòng)物和臨床試驗(yàn)產(chǎn)生懷疑，可能影響到人體安全，應(yīng)進(jìn)一步追加安全性藥理學(xué)研究對(duì)心血管、中樞神經(jīng)、呼吸系統(tǒng)的深入研究一般(yībān)藥理學(xué)第二十四頁(yè)，共八十頁(yè)。追加安全性藥理學(xué)研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)行為、學(xué)習(xí)記憶、神經(jīng)生化(shēnɡhuà)、視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)和/或電生理等心血管系統(tǒng)心輸出量、心肌收縮、血管阻力等呼吸系統(tǒng)氣道阻力、肺動(dòng)脈壓力、血?dú)夥治龅纫话?yībān)藥理學(xué)第二十五頁(yè)，共八十頁(yè)。補(bǔ)充的安全性藥理學(xué)研究泌尿、腎臟系統(tǒng)(xìtǒng)自主神經(jīng)系統(tǒng)胃腸系統(tǒng)一般(yībān)藥理學(xué)第二十六頁(yè)，共八十頁(yè)。試驗(yàn)方法根據(jù)藥物的特點(diǎn)和臨床使用的目的，合理地進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)選用國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的方法，包括科學(xué)而有效(yǒuxiào)的新技術(shù)和新方法某些安全藥理學(xué)研究可根據(jù)藥效模型、藥代動(dòng)力學(xué)的特征、試驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)等來(lái)選擇實(shí)驗(yàn)方法一般(yībān)藥理學(xué)第二十七頁(yè)，共八十頁(yè)。新藥臨床前：完成對(duì)主要器官（精神神經(jīng)、心血管、呼吸系統(tǒng)，核心(héxīn)組合試驗(yàn)）功能影響的研究臨床期間、上市之前：補(bǔ)充安全性藥理學(xué)研究貫穿在新藥研究全過(guò)程中一般(yībān)藥理學(xué)第二十八頁(yè)，共八十頁(yè)。執(zhí)行GLP規(guī)范藥品注冊(cè)管理辦法第十六條藥物的安全性評(píng)價(jià)研究必須執(zhí)行《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》（GLP）為什么？規(guī)范，統(tǒng)一，真實(shí)、完全、可靠屬于安全性評(píng)價(jià)的范疇，原則上須執(zhí)行GLP核心組合實(shí)驗(yàn)應(yīng)執(zhí)行GLP追加(zhuījiā)的或/和補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究應(yīng)盡可能的遵循GLPQT間期試驗(yàn)一般(yībān)藥理學(xué)第二十九頁(yè)，共八十頁(yè)。2005年發(fā)布：《中藥、天然藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物一般藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》計(jì)劃修訂、合并、補(bǔ)充(bǔchōng)：《藥物安全藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》一般(yībān)藥理學(xué)第三十頁(yè)，共八十頁(yè)。概念急性毒性試驗(yàn)研究動(dòng)物一次或24小時(shí)內(nèi)多次給予(jǐyǔ)受試物后，觀察一定時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)Acutetoxicitytest急性毒性試驗(yàn)Singledosetoxicitytest

單次給藥毒性試驗(yàn)單劑量毒性試驗(yàn)（×）急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十一頁(yè)，共八十頁(yè)。急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)SingleDoseToxicityTest王慶利藥品審評(píng)中心藥理毒理學(xué)部第三十二頁(yè)，共八十頁(yè)。急性毒性試驗(yàn)意義的歷史演變OECD1987多個(gè)劑量組、適當(dāng)?shù)膭┝块g距，產(chǎn)生一系毒性和死亡率，得到劑量-效應(yīng)關(guān)系和精確的LD50標(biāo)化藥物強(qiáng)度計(jì)算藥物的治療指數(shù)是后續(xù)重復(fù)給藥毒理試驗(yàn)劑量選擇的參考獲得一些(yīxiē)生物利用度的信息試驗(yàn)結(jié)果可用來(lái)推測(cè)人類(lèi)的致死劑量以及中毒后的癥狀，為臨床毒副反應(yīng)監(jiān)測(cè)提供參考急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十三頁(yè)，共八十頁(yè)。隨著科學(xué)的進(jìn)步，越來(lái)越多的新藥研發(fā)機(jī)構(gòu)和管理當(dāng)局(dāngjú)意識(shí)到了經(jīng)典的急性毒性試驗(yàn)存在的局限性提供的信息不足以支持長(zhǎng)毒試驗(yàn)的劑量選擇從生物學(xué)的角度看，LD50沒(méi)有恒定的數(shù)值通常所用的劑量與臨床人用劑量差別很大人和動(dòng)物對(duì)藥物的敏感性差別很大不必要的動(dòng)物和資源的浪費(fèi)急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十四頁(yè)，共八十頁(yè)。對(duì)于新藥開(kāi)發(fā)來(lái)說(shuō)，急性毒性試驗(yàn)通常沒(méi)有必要求出精確(jīngquè)的LD50值，所要關(guān)注的是動(dòng)物出現(xiàn)的毒性及與劑量間的量效關(guān)系，在嚙齒類(lèi)動(dòng)物中不再需要給以致死水平的劑量但特殊的情況下，從科學(xué)的角度需要測(cè)定LD50值，如細(xì)胞毒類(lèi)抗癌藥物，通常用LD50的1/10來(lái)估計(jì)I期臨床試驗(yàn)的安全起始劑量急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十五頁(yè)，共八十頁(yè)。1991第一屆ICH會(huì)議經(jīng)典的LD50測(cè)定已不再是正式要求了建議進(jìn)行逐漸(zhújiàn)增加劑量的耐受性研究以監(jiān)測(cè)不同劑量下的毒性反應(yīng)

建議采用兩種哺乳動(dòng)物可以用兩種嚙齒類(lèi)動(dòng)物或一種嚙齒類(lèi)動(dòng)物加一種非嚙齒類(lèi)動(dòng)物的嚴(yán)格設(shè)計(jì)的、單次給藥的、逐漸增加劑量的耐受性研究，取代嚙齒類(lèi)動(dòng)物或非嚙齒類(lèi)動(dòng)物L(fēng)D50測(cè)定的要求急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十六頁(yè)，共八十頁(yè)?；谏鲜隹茖W(xué)認(rèn)識(shí)和國(guó)內(nèi)的研發(fā)實(shí)際，2005年起草發(fā)布了當(dāng)前的技術(shù)指導(dǎo)原則(yuánzé)《化藥藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十七頁(yè)，共八十頁(yè)。觀察時(shí)間及指標(biāo)急性毒性觀察為全程觀察時(shí)間為14天。以便能觀察到毒性指征出現(xiàn)的時(shí)間及其恢復(fù)時(shí)間，死亡時(shí)間等指標(biāo)包括一般指標(biāo)、死亡、體重(tǐzhòng)變化等急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十八頁(yè)，共八十頁(yè)。觀察時(shí)間及指標(biāo)記錄所有死亡、臨床癥狀，臨床癥狀開(kāi)始的時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆對(duì)于所有的動(dòng)物均應(yīng)進(jìn)行大體解剖任何器官出現(xiàn)體積、顏色(yánsè)、紋理改變時(shí)，均應(yīng)記錄并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第三十九頁(yè)，共八十頁(yè)。數(shù)據(jù)分析及評(píng)價(jià)判斷每種反應(yīng)的量效關(guān)系及隨時(shí)間的變化判斷各種反應(yīng)可能涉及的器官、組織或系統(tǒng)等，根據(jù)病理結(jié)果，初步判斷毒性靶器官判斷動(dòng)物對(duì)受試物的耐受性、最大無(wú)反應(yīng)劑量、最小毒性反應(yīng)劑量、近似致死劑量等，初步判斷藥物安全范圍對(duì)于需要測(cè)定(cèdìng)LD50值的藥物，采用合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法求算LD50值急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十頁(yè)，共八十頁(yè)。動(dòng)物種屬“一般應(yīng)選(yīnɡxuǎn)用一種嚙齒類(lèi)動(dòng)物加一種非嚙齒類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)。若未采用非嚙齒類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，應(yīng)闡明其合理性”急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十一頁(yè)，共八十頁(yè)。動(dòng)物種屬?lài)X類(lèi)與非嚙齒類(lèi)對(duì)藥物的敏感性明顯不同研究證實(shí)非嚙齒類(lèi)與人體的相關(guān)性一般更好從代謝的角度考慮，非嚙齒類(lèi)可能為更敏感動(dòng)物，且從反映藥品安全性特點(diǎn)(tèdiǎn)角度考慮非嚙齒類(lèi)可能更敏感國(guó)外在急性毒性試驗(yàn)前往往已完成了非嚙齒類(lèi)動(dòng)物數(shù)日（3-5日）重復(fù)給藥的劑量探索試驗(yàn)。即已反映了非嚙齒類(lèi)的急性毒性。而從我國(guó)實(shí)際情況來(lái)看，還有些差距急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十二頁(yè)，共八十頁(yè)。試驗(yàn)(shìyàn)方法近似致死劑量法最大給藥量法固定劑量法（Fixed-doseprocedure）上下法（階梯法，序貫法，Upanddownmethod）累積劑量設(shè)計(jì)法（金字塔法，Pyramidingdosagedesign）半數(shù)致死量法急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十三頁(yè)，共八十頁(yè)。進(jìn)展LD50值的不確定性試驗(yàn)結(jié)果數(shù)學(xué)處理后計(jì)算產(chǎn)生的一個(gè)數(shù)值不同試驗(yàn)對(duì)于同一藥物所得出的結(jié)果差別較大，可達(dá)2.44~8.38倍從依達(dá)拉奉和阿德福韋酯的研究結(jié)果可以得出類(lèi)似(lèisì)結(jié)論急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十四頁(yè)，共八十頁(yè)。昆明種小鼠中依達(dá)拉奉與阿德福韋酯不同(bùtónɡ)給藥途徑的LD50值急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)給藥途徑范圍（mg/kg）倍數(shù)依達(dá)拉奉靜脈注射（n=68）321-7302.27腹腔注射（n=26）492-10742.18經(jīng)口給藥（n=24）894-25502.85阿德福韋酯腹腔注射（n=25）195-12786.55經(jīng)口給藥（n=25）704–50007.10數(shù)據(jù)來(lái)源于2000–2002年申報(bào)資料，有些僅進(jìn)行了其中1種或2種給藥途徑的SDT。從當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)GLP與研發(fā)狀況分析，上述試驗(yàn)基本是在非GLP條件下完成(wánchéng)的，其中一些試驗(yàn)可能是在同一試驗(yàn)單位進(jìn)行。n為試驗(yàn)次數(shù)。第四十五頁(yè)，共八十頁(yè)。急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十六頁(yè)，共八十頁(yè)。LD50值的不確定性導(dǎo)致這種不確定的原因可能包括但不僅限于生物學(xué)不確定性的存在動(dòng)物品質(zhì)差異試驗(yàn)條件差異受試物制備的差異，如濃度、溶劑(róngjì)等給藥體積和給藥速度差異，特別是注射途徑時(shí)，給藥速度是影響毒性表現(xiàn)重要因素急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十七頁(yè)，共八十頁(yè)。LD50值的不確定性意義如果以LD50值為參考進(jìn)行后續(xù)非臨床或臨床劑量設(shè)計(jì)的精確計(jì)算，可能存在風(fēng)險(xiǎn)上述結(jié)果提示在同一動(dòng)物種屬中多次試驗(yàn)獲得相同LD50值的幾率(jīlǜ)很小，文獻(xiàn)比較的意義很小試圖通過(guò)測(cè)定LD50來(lái)確定不同來(lái)源、不同批次、不同生產(chǎn)工藝、不同雜質(zhì)含量的同一化合物的毒性，科學(xué)性值得商榷急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十八頁(yè)，共八十頁(yè)。總結(jié)兩種給藥途徑兩種動(dòng)物（嚙齒+非嚙齒）以適當(dāng)?shù)拈g隔(jiàngé)至少觀察14天全程觀察大體剖檢及組織病理學(xué)檢查選擇合適的試驗(yàn)方法及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第四十九頁(yè)，共八十頁(yè)。2005年發(fā)布《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化藥藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》計(jì)劃修訂、合并(hébìng)、補(bǔ)充：《藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》急性毒性試驗(yàn)(shìyàn)第五十頁(yè)，共八十頁(yè)。概念通過(guò)動(dòng)物重復(fù)(chóngfù)給藥試驗(yàn)表征受試物的毒性作用ChronicToxicityStudy時(shí)間概念，相對(duì)性RepeatedDoseToxicityStudy給藥次數(shù)重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)重復(fù)劑量毒性試驗(yàn)（×）長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第五十一頁(yè)，共八十頁(yè)。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)RepeatedDoseToxicityStudy王慶利張若明藥品審評(píng)中心(zhōngxīn)藥理毒理學(xué)部第五十二頁(yè)，共八十頁(yè)。是物非臨床安全性評(píng)價(jià)的核心內(nèi)容與急性毒性、生殖毒性以及致癌性等毒理學(xué)研究有著密切的聯(lián)系，是藥物從藥學(xué)研究進(jìn)入臨床試驗(yàn)的重要環(huán)節(jié)通過(guò)重復(fù)(chóngfù)給藥動(dòng)物試驗(yàn)表征受試物的毒性作用預(yù)測(cè)其可能對(duì)人體產(chǎn)生的不良反應(yīng)，降低臨床試驗(yàn)受試者和藥品上市后使用人群的用藥風(fēng)險(xiǎn)長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第五十三頁(yè)，共八十頁(yè)。預(yù)測(cè)受試物可能引起的臨床不良反應(yīng)性質(zhì)、程度、劑量(jìliàng)－反應(yīng)和時(shí)間－反應(yīng)、可逆性判斷受試物反復(fù)給藥的毒性靶器官或靶組織推測(cè)臨床試驗(yàn)的起始劑量和重復(fù)用藥的安全劑量范圍提示臨床試驗(yàn)中需重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的指標(biāo)還可以為臨床試驗(yàn)中的解毒或解救措施提供參考最終為臨床試驗(yàn)和臨床用藥服務(wù)長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第五十四頁(yè)，共八十頁(yè)。受試物制備工藝穩(wěn)定、符合臨床試驗(yàn)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定受試物應(yīng)注明名稱(chēng)、來(lái)源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件及配制方法等，并附有研制單位的自檢(zìjiǎn)報(bào)告。所用輔料、溶媒等應(yīng)注明批號(hào)、規(guī)格和生產(chǎn)廠家，并符合試驗(yàn)要求。在藥物開(kāi)發(fā)的過(guò)程中，若受試物的制備工藝發(fā)生可能影響其安全性的變化，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的安全性研究長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第五十五頁(yè)，共八十頁(yè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般(yībān)情況下，創(chuàng)新藥的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)采用兩種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一種嚙齒類(lèi)＋一種非嚙齒類(lèi)長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第五十六頁(yè)，共八十頁(yè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)受試物的生物轉(zhuǎn)化與人體(réntǐ)相近-相關(guān)性對(duì)受試物敏感已有大量歷史對(duì)照數(shù)據(jù)長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第五十七頁(yè)，共八十頁(yè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)內(nèi)現(xiàn)狀，大多數(shù)試驗(yàn)(shìyàn)開(kāi)始時(shí)，無(wú)法判斷不同種系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人體對(duì)受試物的生物轉(zhuǎn)化的一致性通常采用大鼠和Beagle犬或猴某些特殊結(jié)構(gòu)的受試物應(yīng)選用特殊種屬或品系的動(dòng)物進(jìn)行長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)必要時(shí)可選用疾病模型動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)在長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)前可采用體外試驗(yàn)體系對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種屬或品系進(jìn)行篩選長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第五十八頁(yè)，共八十頁(yè)。長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第五十九頁(yè)，共八十頁(yè)。試驗(yàn)動(dòng)物健康、未孕，動(dòng)物體重差異應(yīng)在平均體重的20％之內(nèi)應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定的等級(jí)要求來(lái)源、品系、遺傳背景清楚，并具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證應(yīng)根據(jù)研究期限的長(zhǎng)短和受試物臨床應(yīng)用的患者群確定(quèdìng)動(dòng)物的年齡成年、幼年一般大鼠為6～9周齡，Beagle犬為6～12月齡長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第六十頁(yè)，共八十頁(yè)。試驗(yàn)動(dòng)物一般情況(qíngkuàng)下，雌雄各半每組動(dòng)物數(shù)量應(yīng)能夠滿(mǎn)足試驗(yàn)結(jié)果的分析和評(píng)價(jià)的需要一般大鼠為雌、雄各10～30只Beagle犬或猴為雌、雄各3～6只長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第六十一頁(yè)，共八十頁(yè)。給藥方案(fāngàn)給藥劑量高、中、低三個(gè)劑量給藥組高劑量原則上應(yīng)使動(dòng)物產(chǎn)生明顯的毒性反應(yīng)，甚至出現(xiàn)個(gè)別動(dòng)物死亡低劑量原則上應(yīng)高于動(dòng)物藥效的等效劑量，并不使動(dòng)物出現(xiàn)毒性反應(yīng)為考察毒性反應(yīng)劑量-反應(yīng)關(guān)系，應(yīng)在高劑量和低劑量之間設(shè)立中劑量一個(gè)溶媒（或輔料）對(duì)照組必要時(shí)空白對(duì)照組或陽(yáng)性對(duì)照組長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第六十二頁(yè)，共八十頁(yè)。給藥方案給藥途徑原則上應(yīng)與臨床用藥途徑一致，否則應(yīng)說(shuō)明原因。給藥頻率原則上動(dòng)物應(yīng)每天給藥給藥期限長(zhǎng)（3個(gè)月或以上）的，每周至少藥6天特殊類(lèi)型的受試物由于其毒性特點(diǎn)和臨床給藥方案等原因，應(yīng)根據(jù)(gēnjù)具體藥物的特點(diǎn)設(shè)計(jì)給藥頻率長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第六十三頁(yè)，共八十頁(yè)。給藥方案給藥期限根據(jù)與擬定(nǐdìng)臨床研究方案、臨床適應(yīng)證和用藥人群等確定給藥結(jié)束后應(yīng)有一定時(shí)間的恢復(fù)期長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第六十四頁(yè)，共八十頁(yè)。給藥方案給藥期限較短的毒性研究獲得的信息可為較長(zhǎng)的毒性研究設(shè)計(jì)提供給藥劑量、給藥頻率等方面的參考臨床試驗(yàn)中獲得的信息有助于給藥期限較長(zhǎng)的動(dòng)物毒性研究方案的設(shè)計(jì)，降低藥物開(kāi)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)支持不同的臨床研究或上市申請(qǐng)的不同給藥期限的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的內(nèi)容應(yīng)完整、規(guī)范(guīfàn)，對(duì)結(jié)果的分析評(píng)價(jià)應(yīng)科學(xué)、合理長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第六十五頁(yè)，共八十頁(yè)。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)(shìyàn)的給藥期限（不含恢復(fù)期）長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)臨床療程嚙齒類(lèi)動(dòng)物

非嚙齒類(lèi)動(dòng)物可以支持的臨床試驗(yàn)階段單次用藥2周2周臨床及生產(chǎn)≤2周1個(gè)月1個(gè)月臨床及生產(chǎn)2周~1個(gè)月1個(gè)月1個(gè)月II期3個(gè)月3個(gè)月III期（及生產(chǎn)）≤3個(gè)月3個(gè)月3個(gè)月II期6個(gè)月6個(gè)月III期（及生產(chǎn)）≤6個(gè)月6個(gè)月6個(gè)月II期6個(gè)月9個(gè)月III期（及生產(chǎn)）＞6個(gè)月6個(gè)月9個(gè)月II期6個(gè)月9個(gè)月III期（及生產(chǎn)）第六十六頁(yè)，共八十頁(yè)。檢測(cè)指標(biāo)除必需的檢測(cè)指標(biāo)外，應(yīng)根據(jù)受試物的特點(diǎn)(tèdiǎn)，有針對(duì)性地增加相應(yīng)的檢測(cè)血液學(xué)指標(biāo)10項(xiàng)血液學(xué)生化學(xué)指標(biāo)16項(xiàng)尿液分析6項(xiàng)組織病理學(xué)檢查：嚙齒類(lèi)動(dòng)物30項(xiàng)非嚙齒類(lèi)動(dòng)物33項(xiàng)長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第六十七頁(yè)，共八十頁(yè)。毒物代謝動(dòng)力學(xué)（簡(jiǎn)稱(chēng)毒代動(dòng)力學(xué)）系指結(jié)合毒性試驗(yàn)進(jìn)行(jìnxíng)的考察藥物系統(tǒng)暴露的代謝動(dòng)力學(xué)研究描述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的系統(tǒng)暴露與暴露劑量、暴露時(shí)間和毒理學(xué)結(jié)果之間的關(guān)系小動(dòng)物試驗(yàn)設(shè)立衛(wèi)星組專(zhuān)門(mén)進(jìn)行毒代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)毒理學(xué)試驗(yàn)應(yīng)進(jìn)行毒代動(dòng)力學(xué)檢測(cè)長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第六十八頁(yè)，共八十頁(yè)。結(jié)果分析評(píng)價(jià)動(dòng)物是否發(fā)生毒性反應(yīng)描述毒性反應(yīng)的性質(zhì)和程度毒性起始時(shí)間、程度、持續(xù)時(shí)間以及可逆性等靶器官確定安全范圍NOAEL探討可能(kěnéng)的毒性作用機(jī)制長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第六十九頁(yè)，共八十頁(yè)。結(jié)果分析評(píng)價(jià)均值數(shù)據(jù)和單個(gè)數(shù)據(jù)嚙齒類(lèi)動(dòng)物組均值的意義通常(tōngcháng)大于單個(gè)動(dòng)物數(shù)據(jù)的意義實(shí)驗(yàn)室歷史背景數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可以為結(jié)果的分析提供參考非嚙齒類(lèi)動(dòng)物單個(gè)動(dòng)物的試驗(yàn)數(shù)據(jù)往往具有重要的毒理學(xué)意義須與給藥前數(shù)據(jù)、對(duì)照組數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)室歷史背景數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較長(zhǎng)期(chángqī)毒性試驗(yàn)第七十頁(yè)，共八十頁(yè)。結(jié)果(jiēguǒ)分析評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義與生物學(xué)意義正確利用統(tǒng)計(jì)學(xué)假設(shè)檢驗(yàn)有助于確定試驗(yàn)結(jié)果的生物學(xué)意義，但具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義并不一定代表具有生物學(xué)意義在判斷生物學(xué)意義時(shí)應(yīng)考慮到參數(shù)變化的劑量-反應(yīng)關(guān)系、其他相關(guān)參數(shù)的改變、與歷史背景數(shù)據(jù)的比較重視組織病理學(xué)檢查結(jié)果長(zhǎng)期毒性(dúxìnɡ)試驗(yàn)第七十一頁(yè)，共八十頁(yè)。毒性反應(yīng)的臨床意義動(dòng)物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)的結(jié)果一般不會(huì)完全