紫外可見分光光度計(jì)原理使用及維護(hù)

關(guān)于紫外可見分光光度計(jì)原理使用及維護(hù)黔西煤化工分析化驗(yàn)中心第1頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心一、吸收光光度法概述吸收光度法紫外可見分光光度法200—780nm紅外光譜法2.5—1000um紫外可見分光光度法200—400nm可見分光光度法400—780nm1、吸收光度法概念：基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立的分析方法稱為吸收光度法。第2頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心2、吸收光譜的分類第3頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心3、吸收光度法的理論基礎(chǔ)和適用范圍1）吸收光度法的理論基礎(chǔ)：朗伯比爾定律：A=kbc，朗伯定律是說明光的吸光度與吸收層厚度成正比；比爾定律說明光的吸光度與溶液濃度成正比。2）朗伯比爾定律適用范圍：朗伯定律對于各種有色溶液都適用，比爾定律只有在一定濃度范圍內(nèi)使用，吸光度A和濃度才成直線關(guān)系，它只適用于濃度小于0.01mol/L的稀溶液。第4頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心二、分光光度計(jì)的特點(diǎn)及結(jié)構(gòu)1、特點(diǎn)：a、與其它光譜分析方法相比，其儀器設(shè)備和操作都比較簡單，費(fèi)用少，分析速度快；b、靈敏度高；c、選擇性好，有最大吸收波長。d、精密度和準(zhǔn)確度較高;e、用途廣泛。第5頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心2、結(jié)構(gòu)1）光源（氘燈、鎢燈）→2）單色器（光柵）→3）吸收池→4）檢測器→

↑樣品5）信號(hào)顯示系統(tǒng)

第6頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心第7頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心三、分光光度法測定時(shí)需要考慮的因素1、反應(yīng)條件的選擇1)顯色劑的用量；2)溶液酸度；3)溶液溫度；4)顯色時(shí)間；5)溶劑，比如有機(jī)溶劑常能降低有色化合物的分離度，從而提高顯色反應(yīng)的靈敏度。第8頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心2、顯色反應(yīng)時(shí)應(yīng)注意共存離子的干擾消除辦法：1)、控制溶液酸度；2)、加入掩蔽劑；3)、選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤海?)、選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL；5)、利用氧化還原反應(yīng)；6)、采用適當(dāng)?shù)姆蛛x方法；7)、利用導(dǎo)數(shù)光譜法、雙波長等新技術(shù)。第9頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心3、參比溶液的選擇用參比溶液調(diào)節(jié)分光光度計(jì)的吸光度為0，然后測定試樣溶液或者標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，參比溶液的作用除了消除吸收池壁對入射光的放射和散射等影響外，合理選用時(shí)還可以消除其他干擾，使測得的吸光度正確反映被測物的濃度，提高測定的準(zhǔn)確性。第10頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心4、測定條件的選擇1）吸收波長；一般選擇最大吸收波長處。2）吸光度范圍，一般來說，吸光度在0.2～0.8時(shí)，濃度測量的誤差最小，這就是適宜的吸光度范圍，解決辦法：a調(diào)節(jié)溶液濃度如減少或者增加取樣量，改變稀釋倍數(shù)；b使用厚度不同的吸收池比如提高或者減少吸收池的厚度，需要重新作校正曲線；3）狹縫寬度的選擇，狹縫寬度直接影響測定的靈敏度和工作曲線的線性范圍，狹縫寬度太大，靈敏度下降，工作曲線線性范圍變窄，反之，相反。第11頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心四、紫外可見分光光度計(jì)主要部件介紹光源：紫外可見分光光度計(jì)的輻射源有兩類：熱輻射光源和氣體放電光源。熱輻射光源如鎢燈和鹵鎢燈，可用于可見光區(qū)；氣體放電光源如如氫燈和氘燈，主要用于紫外光區(qū)。第12頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心主要部件光源絕大多數(shù)紫外分光光度計(jì)主要使用鎢燈和氘燈作為輻射光源，鎢燈的波長范圍在350～2500nm，主要用于可見光區(qū)的光源；氘燈的波長范圍在180～460nm之間，主要用于紫外光區(qū)的光源。如果測定波長在180～400nm之間，應(yīng)選擇氘燈作為輻射光源，如果波長在400nm以上應(yīng)選擇鎢燈作為輻射光源，關(guān)閉不用的光源。第13頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心主要部件

吸收池吸收池材質(zhì)：吸收池又稱比色皿或比色杯，按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池。

切記：玻璃比色皿不能用于紫外區(qū)！

區(qū)分方法:可用儀器實(shí)測紫外區(qū)200nm波長處的吸光度值。第14頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心主要部件

吸收池

因比色皿的使用不當(dāng)易導(dǎo)致數(shù)據(jù)重復(fù)性差。

原因：角度、位置變化、表面潔凈度、污染程度

注意：粘接的比色皿不適合裝濃硫酸、不適合用高于25瓦的超聲波機(jī)清洗。第15頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心主要部件

吸收池吸收池的污染和清洗：1）比色皿沾污會(huì)直接嚴(yán)重影響分析測試的結(jié)果！這個(gè)非常重要，在日常的分析工作中，往往不大重視比色皿的沾污問題。2）、污染清洗方法：a、如果肉眼觀察有污點(diǎn)，就應(yīng)清除掉；可用高級擦鏡紙、軟的黃鼠狼毛筆等柔軟的物質(zhì)擦洗；b、也可用洗液清洗；常用洗液：鹽酸-水-甲醇（1:3：4體積比）或者鉻酸洗液，徹底清洗吸收池或者其他玻璃器皿。了解內(nèi)容：鉻酸洗液的配制方法：20g的K2Cr2O7，溶于40mL水中,將濃H2SO4360mL徐徐加入K2Cr2O7溶液中。第16頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心主要部件

吸收池c、嚴(yán)重的污染需要用超聲波清洗。清洗注意事項(xiàng)：1）、不能用金屬棒或硬的木棒(如牙簽等)重擦比色皿，否則，也會(huì)損壞比色皿的通光面，特別強(qiáng)調(diào)：比色皿的通光面不能損壞！2）、不能用帶易掉毛的工具(如劣質(zhì)紙、劣質(zhì)棉花等)擦拭比色皿的受光面，不要用洗潔精之類的清潔劑。以免影響測量。第17頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心主要部件

檢測器檢測器的作用是檢測光信號(hào)，并將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)?，F(xiàn)今使用的分光光度計(jì)大多采用光電管或光電倍增管作為檢測器。第18頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心儀器展示1、高檔-紫外可見分光光度計(jì)19系列TU-1901/1900紫外可見分光光度計(jì)第19頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心儀器展示2、中檔-紫外可見分光光度計(jì)18系列

島津UV-1800雙光束第20頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心儀器展示3、普及型-紫外可見分光光度計(jì)T6系列

T6紫外可見分光光度計(jì)第21頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心五、紫外分光光度計(jì)測樣不穩(wěn)定和不準(zhǔn)確的原因1）市電不穩(wěn)如：大功率用電器的啟停(空調(diào)、烘箱、大型電機(jī)、電爐等)2）比色皿的原因如：紫外區(qū)錯(cuò)用玻璃比色皿；臟污；比色皿質(zhì)量差；3）操作原因如：參數(shù)設(shè)置不當(dāng)；樣池架設(shè)置不當(dāng)；比色皿放置傾斜、晃動(dòng)；取放比色皿時(shí)方向不豎直，用力過大使樣池架挪位等。第22頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心4）樣品自身的問題

如：空白值過大、樣品濃度過高，超出動(dòng)態(tài)線性范圍；試劑等被污染或純度不高；有氣泡；樣品顯色在變化，未穩(wěn)定；有懸浮或沉淀物；見光分解；揮發(fā)、溶劑使用不當(dāng)?shù)取?）環(huán)境影響如：溫度、濕度、粉塵、電場、磁場、振動(dòng)等影響6）儀器自身或PC機(jī)的原因 如：光源及光學(xué)器件、電路、機(jī)械、計(jì)算機(jī)病毒等

第23頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心六、紫外分光光度計(jì)常見的非儀器問題常見非儀器問題及判斷：1）自檢時(shí)提示樣品池電機(jī)項(xiàng)失敗，或有異常響聲；

原因：樣品室內(nèi)放置有干燥劑或雜物，造成機(jī)械卡住。2）自檢時(shí)提示光源電機(jī)項(xiàng)失?。?/p>

原因：樣池架類型設(shè)置錯(cuò)誤(樣品池類型與使用樣池?cái)?shù)的區(qū)別)、自檢時(shí)樣品池架內(nèi)放有比色皿或其它物件擋了光、光源未點(diǎn)亮或老化、損壞等。3）自檢時(shí)提示鎢燈能量低或提示氘燈能量低；

原因：同上一條原因4）自檢時(shí)提示氘燈能量高

原因：附件類型設(shè)置錯(cuò)誤(非積分球附件錯(cuò)設(shè)置成積分球)第24頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心七、鎢燈和氘燈的更換1、儀器需要更換鎢燈一般有這幾種情況如:鎢燈不亮、玻璃表面變黃或變黑、燈體漏氣變白等。2、儀器需要更換氘燈一般有這幾種情況如:氘燈不亮、氘燈能量低等。3、更換鎢燈和氘燈時(shí)注意事項(xiàng)：在更換氘燈及鎢燈時(shí)注意保護(hù)光源反射鏡鏡面，禁止觸摸鏡面以及擦拭鏡面。第25頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心八、日常維護(hù)1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降；造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正。特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室，儀器室最好應(yīng)具備四季恒濕，配置恒溫設(shè)備，儀器不用時(shí)，樣品室內(nèi)要及時(shí)放上干燥劑，干燥劑失效后要及時(shí)更換。第26頁，共28頁，2022年，5月20日，16點(diǎn)36分，星期五黔西煤化工分析化驗(yàn)中心2、儀器