臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)新技術(shù)

熒光定量PCR所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCRPCRPCR技術(shù)原理TaqmanDNADNATaqmanCT濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，即可得出待測(cè)標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。臨床應(yīng)用價(jià)；地中海貧血、血友病、性別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種在功能水平上對(duì)單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量成為當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。技術(shù)原理儀器中一系列光學(xué)系統(tǒng)（透鏡、光闌、濾片和檢測(cè)器等）收集熒光、光散射、光臨床應(yīng)用學(xué)研究，并已開(kāi)始用于細(xì)菌鑒定，病毒感染細(xì)胞的識(shí)別和艾滋病感染者T4、T8細(xì)胞的記數(shù)。FCMFCM各種血細(xì)胞和組織細(xì)胞的表型進(jìn)行測(cè)定分析。一、在血液病診斷和治療中的應(yīng)用FCMDNA各種血液病的診斷、預(yù)后判斷和治療起著舉足輕重的作用。二、在血栓與出血性疾病中的應(yīng)用FCMⅡb/Ⅲa,CD62，CD63FCM測(cè)定鈣離子濃度，可以作為活化血小板監(jiān)測(cè)的非免疫性指標(biāo)。FCM靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。酶聯(lián)免疫分析技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA)技術(shù)自2070ELISA技術(shù)原理后加入酶反應(yīng)底物，根據(jù)底物被酶催化產(chǎn)生的顏色及其吸光度(A)值的大小進(jìn)行定性或定量分析的方法。的常用方法。臨床應(yīng)用原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。1寄生蟲(chóng)感染如阿米巴、弓形蟲(chóng)、錐蟲(chóng)等。2、蛋白質(zhì)如各種免疫球蛋白，腫瘤標(biāo)志物如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列hCG,FSH,TSH,hGH,-MB，鐵蛋白等。3、非肽類(lèi)激素如T3,T4，雌二醇，皮質(zhì)醇等。4、藥物治療心臟病藥物如地高辛，抗哮喘藥物如茶堿，抗生素如慶大霉素等。免疫印跡技術(shù)免疫印跡技術(shù)免疫印跡法(Westernblotting)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)基本原理：免疫印跡與DNASouthernNC臨床應(yīng)用測(cè)蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種最常用的方法，如組織抗原的定性定量檢測(cè)、時(shí)間分辨熒光分析法時(shí)間分辨熒光分析法（Timeresolvedfluoroisnmunoassay,TRFIA）是近十年發(fā)展起來(lái)的非同位素免疫分析技術(shù)，是目前最先進(jìn)的免疫檢測(cè)技術(shù)。技術(shù)原理：使用三價(jià)稀土離子（如Eu3+Tb3Sm3+Dy3+）通過(guò)這些稀土離子與具有雙功能結(jié)構(gòu)的螯合劑以及抗原形成稀土離子-螯合劑-抗原螯合物。當(dāng)標(biāo)記抗原、待測(cè)抗原共同競(jìng)爭(zhēng)抗體，形成免疫復(fù)合物，由于免疫β-辛基氧化膦、TritonX-100等成分形成一種微囊。后者被激發(fā)光激發(fā)后，則稀100萬(wàn)倍。采用時(shí)間分辨技術(shù)測(cè)量熒光，采用了門(mén)控技術(shù)，它是使背景熒光信號(hào)降低到零以后，再測(cè)定長(zhǎng)壽命標(biāo)記物的熒光。臨床應(yīng)用TRFIA一、TRFIA法在內(nèi)分泌學(xué)中的應(yīng)用但不能產(chǎn)生抗體，不具有免疫原性，它們屬于半抗原。對(duì)這些半抗原的測(cè)定，一二、TRFIA在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用TRFIA三、TRFIA法在免疫學(xué)中的應(yīng)用某些免疫細(xì)胞（NK、LAK、T）TRFIA測(cè)。四、TRFIA法在微生物學(xué)中的應(yīng)用TRFIATRFIA(Anti-HCV)的檢測(cè)，效果明顯高于酶聯(lián)免疫法。飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)十個(gè)，甚至數(shù)百個(gè)蛋白，同時(shí)極大的提高了診斷的靈敏度和特異性。技術(shù)原理度。在Um/z。通常的假設(shè)認(rèn)為離子只能帶一個(gè)電荷，如此，得到的信號(hào)，直接對(duì)應(yīng)檢測(cè)到離子的相對(duì)原子質(zhì)量。臨床應(yīng)用：在腫瘤早期診斷中的研究進(jìn)展——液體芯片-飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)在的生物標(biāo)記物進(jìn)行鑒定?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA),是將具有高靈最新免疫測(cè)定技術(shù)。靈敏度高是化學(xué)發(fā)光免疫分析關(guān)鍵的優(yōu)越性。技術(shù)原理,形成一個(gè)激發(fā)態(tài)的中間體,當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時(shí),同時(shí)發(fā)射出光子(hM),(在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體)直接標(biāo)記在抗原(化學(xué)發(fā)光免疫分析或抗體(免疫化學(xué)發(fā)光分析)上,或酶作用于發(fā)光底物。臨床應(yīng)用：用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物腫瘤標(biāo)記物、內(nèi)分泌功能、傳染性疾病等多種檢測(cè)項(xiàng)目。生物芯片DNA組織等技術(shù)原理DNA、RNA、多肽、蛋白質(zhì)以及其他生物成分（寡核苷酸、cDNA、genomicDNA、多肽、抗體、抗原等）固著于硅片、玻璃片（珠塑料片（珠、凝膠、尼龍膜等固相遞質(zhì)上形成的生物分子點(diǎn)陣。臨床應(yīng)用DNADNA芯片雜交就可以得出DNADNA芯片雜交就可以得出病變圖譜。通過(guò)比較、分析這兩種圖譜，就可以得出病變的DNA信息。這種基因芯片代化診斷新技術(shù)。免疫濁度法免疫濁度法抗原定量檢測(cè)。技術(shù)原理應(yīng)液的濁度隨之增加，與一系列的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，即可計(jì)算出受檢物的含量。臨床應(yīng)用：1、免疫功能監(jiān)測(cè)：免疫球蛋白G、A、M，免疫球蛋白輕鏈κ、λ，補(bǔ)體C3、C4測(cè)定。2、心血管疾病監(jiān)測(cè):載脂蛋白A、B，脂蛋白(a)，C-反應(yīng)蛋白等。3、炎癥狀況監(jiān)測(cè):C-反應(yīng)蛋白，a-酸性糖蛋白，觸珠蛋白，銅藍(lán)蛋白等。4、風(fēng)濕性疾病檢測(cè)：ASO、RF、CRP5、腎臟功能檢測(cè)：尿微量白蛋白，a-微球蛋白，β-微球蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白，免疫球蛋白G等。6、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)監(jiān)測(cè)：白蛋白，前白蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白等。7、凝血及出血性疾病的檢測(cè)：抗凝血酶Ⅲ，轉(zhuǎn)鐵蛋白，觸珠蛋白等。8、血腦屏障監(jiān)測(cè)：腦脊液白蛋白，免疫球蛋白G、A、M。免疫熒光標(biāo)記技術(shù)技術(shù)原理（B200)結(jié)合是高度特異的，所以只要知道其中的一種因子，也就知道了另一種因子。技術(shù)特點(diǎn)：1、特異的抗原抗體反應(yīng)，并與形態(tài)學(xué)相結(jié)合，增加試驗(yàn)的特異性和敏感性。2、利用了物理、化學(xué)、組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、生物學(xué)等綜合性技術(shù)，使免疫熒光技術(shù)成為一種獨(dú)立完整的一門(mén)方法學(xué)。3、一種熒光抗體可以檢查多種抗原抗體復(fù)合物。4、只要知道一種抗體或抗原，就可以知道其對(duì)應(yīng)的抗原或抗體。臨床應(yīng)用：1、在細(xì)菌診斷中的應(yīng)用：主要用于鑒定細(xì)菌和對(duì)抗原結(jié)構(gòu)的研究。如對(duì)甲型鏈球菌的快速診斷和分型鑒定，腦膜炎雙球菌的快速診斷等。23、在病毒學(xué)診斷中的應(yīng)用：快速診斷中對(duì)流感病毒、乙腦、狂犬病、脊髓灰白質(zhì)炎、恙蟲(chóng)病等的快速檢出；也可用來(lái)檢查血清中的抗病毒抗體。4、在免疫病理方面的應(yīng)用：檢查球蛋白的沉積，特別是對(duì)于復(fù)合物病如：置，以了解病變侵犯部位和病變基礎(chǔ)。5、血液中B及T細(xì)胞的鑒定。6、激素和酶的局部組織定位。7、一些器官移植抗原鑒定。8、組織中免疫球蛋及補(bǔ)體組分的檢測(cè)。9、在診斷自身免疫病方面的應(yīng)用：(1)抗核抗體（ANA)：是自身免疫性疾病最常出現(xiàn)的一種抗體，特別是系統(tǒng)性紅斑狼瘡，陽(yáng)性率更高。其它如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、慢性肝炎等血中亦可出現(xiàn)較高效價(jià)的抗體。可以認(rèn)為是自身免疫性肝炎。原發(fā)性膽汁性肝硬化約有98％出現(xiàn)線粒體抗體，31％左右。線粒體抗體在膠原性疾病中可見(jiàn)（2-8％）遠(yuǎn)較自身免疫性肝炎低?？蛊交】贵w：這是對(duì)平滑肌組織的特異性抗體，沒(méi)有器官和種屬特異性。其臨床意義對(duì)于自身免疫性肝炎約82HBsAg出現(xiàn)。甲狀腺球蛋白的抗體：甲狀腺球蛋白是甲狀腺腺泡內(nèi)主要激素貯存形而形成自身抗原，從而刺激機(jī)體產(chǎn)生自身抗體?？贵w可用于診斷重癥肌無(wú)力，抗腎上腺抗體診斷阿狄森氏病。膠體金技術(shù)域，目前已成為一種最常用的快速的檢測(cè)技術(shù)。技術(shù)原理：法。臨床應(yīng)用：1、感染性疾病的抗原、抗體的檢測(cè)：可檢測(cè)的抗原有HBsAg,HBeAg，瘧原蟲(chóng)抗原、大腸埃希桿菌抗原等。