全國口岸及邊境線醫(yī)學媒介生物監(jiān)測工作方案

精選優(yōu)質(zhì)文檔-----傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-----傾情為你奉上專心---專注---專業(yè)專心---專注---專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-----傾情為你奉上專心---專注---專業(yè)全國口岸及相鄰邊境線醫(yī)學媒介生物本底調(diào)查和監(jiān)測專項工作方案1目的通過在全國國家對外開放口岸（口岸核心能力達標口岸）及其相鄰邊境線全面、規(guī)范地開展一輪醫(yī)學媒介生物本底調(diào)查和監(jiān)測專項工作，系統(tǒng)、完整、準確地掌握全國口岸和邊境線具有重要傳病意義的醫(yī)學媒介生物的本底情況（包括種屬構成、種群分布、季節(jié)消長情況及其自然感染病原體情況），為識別輸入性醫(yī)學媒介生物、掌握口岸區(qū)域醫(yī)學媒介生物密度變化情況、防控蟲媒傳染病在口岸地區(qū)的暴發(fā)流行提供堅實的科學依據(jù)；并為今后建立醫(yī)學媒介生物地理分布和信息預警系統(tǒng)奠定基礎。同時，通過對此輪本底調(diào)查數(shù)據(jù)進行風險研判，確定口岸醫(yī)學媒介生物監(jiān)測的重點區(qū)域和重點對象，提高口岸衛(wèi)生檢疫工作的針對性和有效性。2原則2.1監(jiān)測原則監(jiān)測是指應用科學的方法，長期、連續(xù)、系統(tǒng)地收集醫(yī)學媒介生物，從而獲取種類、數(shù)量、分布和季節(jié)變化等資料，監(jiān)測應遵循“五定”原則，即“定人員、定時間、定地點（鼠類定生境）、定方法、定器械”。定人員：在監(jiān)測周期內(nèi)，監(jiān)測人員保持不變，沒有特殊情況，不得增減更換。定時間：包括周期、頻次和布放收集工具的時間三個方面，一旦確定不得更改。如遇特殊天氣可順延。定地點：根據(jù)口岸范圍大小和地貌特點，選擇具有代表性生態(tài)環(huán)境的三至五個監(jiān)測點。在一個監(jiān)測周期內(nèi)，鼠類不得隨意更改生境，其它醫(yī)學媒介生物不得隨意更改監(jiān)測地點。定方法：在監(jiān)測周期內(nèi)，統(tǒng)一采用本方案制定的方法。如果邊境地區(qū)因野外條件不適用制定方法的，可因地制宜選用敏感的方法，但應在原始記錄中注明所用方法，方法一旦確定，不得隨意變更。定器械：在監(jiān)測周期內(nèi)，應選用規(guī)范統(tǒng)一的監(jiān)測器械以保證數(shù)據(jù)的統(tǒng)一性和穩(wěn)定性。2.2本底調(diào)查原則本底調(diào)查應采取多種監(jiān)測方法，調(diào)查范圍盡可能覆蓋整個口岸區(qū)域，力爭捕獲到口岸區(qū)域內(nèi)的所有醫(yī)學媒介生物種，以便完整的掌握本口岸的醫(yī)學媒介生物本底情況。2.3樣本鑒定、檢測和送樣原則2.3.1此次本底調(diào)查所獲醫(yī)學媒介生物樣品，捕獲的醫(yī)學媒介生物分類鑒定到種后，每個種保存2-10個標本；其余樣品根據(jù)種類不同分類，并按規(guī)定方法保存以備病原體檢測。2.3.2本口岸有條件進行分類鑒定和病原體檢測（單種蚊蟲30只以上開展病原體檢測）的，應在本口岸及時完成；本口岸無法進行分類鑒定和病原體檢測的，制作標本留存后按規(guī)范保存并送樣至直屬局檢測。2.3.3新種和新記錄種等疑難標本的鑒定、新發(fā)傳染病病原體的確證和陽性樣品的復核按就近原則送中國檢科院或廣東局P3實驗室進行鑒定、檢測，需進一步鑒定和復核檢測的標本和樣品送軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所進行鑒定、檢測。3任務3.1對象和內(nèi)容以鼠類及體表寄生蟲（蚤、蜱、螨等）、蚊類和游離蜱類（僅限黑龍江、吉林、內(nèi)蒙古、新疆、西藏、云南和廣西與周邊國家有邊境土地接壤的陸路口岸）為主，掌握它們在口岸區(qū)域的種屬構成、種群分布、季節(jié)消長情況及其攜帶病原體情況。3.2范圍全國正式對外開放口岸（包括口岸周邊400米環(huán)境）、陸路口岸周邊邊境線。3.3時間3.3.1監(jiān)測時間調(diào)查周期為1個監(jiān)測年度，鼠類及體表寄生蟲調(diào)查時間為2014年5月-2015年4月；蚊蟲調(diào)查時間為2014年5月-10月，蜱類調(diào)查時間為2014年5月-9月。監(jiān)測頻次：鼠類每月1次（中旬），蚊蟲和蜱類每月調(diào)查2次（分上、下旬進行），每次的監(jiān)測時間為連續(xù)3天（誘卵器法除外）。本底調(diào)查頻次：鼠類、蚊蟲和蜱類每月至少開展1次。3.3.2病原體檢測時間病原體檢測每三個月為一個期限，即2014年7月、2014年10月、2015年1月和2015年4月底前應分別完成此前三個月中捕獲的醫(yī)學媒介生物樣品的病原體檢測工作。3.4本底調(diào)查和監(jiān)測方法3.4.1鼠類：鼠類及體表寄生蟲采用夾夜法、籠捕法或粘鼠板法進行本底調(diào)查和監(jiān)測。本底調(diào)查可更換誘餌，覆蓋口岸所有地區(qū)；監(jiān)測不得隨意更換誘餌。3.4.2蚊類：3.4.2.1各口岸成蚊監(jiān)測采用CO2誘蚊燈法（誘集時間為日落前后1小時）；云南、廣東、廣西、浙江、江蘇、深圳、珠海、廈門、福建和海南局所轄各口岸還應采用誘卵器法監(jiān)測白紋伊蚊和埃及伊蚊。3.4.2.2蚊類本底調(diào)查除采用CO2誘蚊燈和誘卵器法外，還可選用帳誘法、幼蟲吸管法和幼蟲勺捕法等方法，調(diào)查時間盡可能覆蓋全天。3.4.3游離蜱監(jiān)測采用人工小時布旗法。如有條件游離蜱還可采用宿主動物巢穴采集法和洞干蜱采集法開展本底調(diào)查。相關調(diào)查方法詳見《口岸醫(yī)學媒介生物監(jiān)測方法》（附件1），監(jiān)測記錄表格請參考《口岸醫(yī)學媒介生物調(diào)查記錄表》（附件2，記錄表填寫編號由直屬局統(tǒng)一編制）3.5醫(yī)學媒介生物樣品的處理捕獲的醫(yī)學媒介生物樣品的處理方法，詳見《口岸醫(yī)學媒介生物標本前處理、保存和送樣規(guī)范》（附件3）3.6醫(yī)學媒介生物攜帶病原體檢測本次專項調(diào)查開展以下醫(yī)學媒介生物攜帶病原體檢測項目：1．鼠類：鼠疫菌、漢坦病毒、伯氏疏螺旋體。2．蚊類：甲病毒屬、黃病毒屬、瘧原蟲。3．蜱類：森林腦炎病毒、伯氏疏螺旋體。實驗室檢測方法詳見《口岸醫(yī)學媒介生物攜帶病原檢測方法》（附件4）。為節(jié)約有限的檢測資源，病原體檢測項目應因地制宜有所側重，具體選擇范圍請參考《全國口岸重要病媒生物攜帶病原體檢測范圍》（附件5）4報告4.1監(jiān)測數(shù)據(jù)上報。各口岸每次監(jiān)測后應在72小時內(nèi)采用“醫(yī)學媒介生物信息報告系統(tǒng)”將監(jiān)測情況、監(jiān)測結果及照片（醫(yī)學媒介生物監(jiān)測現(xiàn)場照片、捕獲的醫(yī)學媒介生物照片和標本照片各1張。）等數(shù)據(jù)上報總局衛(wèi)生司。4.2年度總結報告。各直屬局應當對所屬口岸2014年5月-10月的監(jiān)測資料進行匯總、分析、評估，形成總結報告上報總局?？偨Y報告的內(nèi)容包括：口岸基本情況、口岸醫(yī)學媒介生物種屬情況、媒介攜帶病原體檢測情況以及對發(fā)現(xiàn)媒介新種、檢出攜帶病原體陽性、種屬構成發(fā)生明顯改變等情況進行傳染病傳播風險評估、應對措施建議等。4.3信息專報。對于在監(jiān)測捕獲并經(jīng)鑒定為外來物種的，或者媒介攜帶病原體檢測發(fā)現(xiàn)當?shù)匚匆妶蟮赖牟≡⑸飼r，各直屬局應當按照《國境口岸傳染病疫情信息報告及發(fā)布管理規(guī)定》的要求，在24小時內(nèi)上報總局；檢測結果為特別關注傳染病病原體陽性的，應在2小時內(nèi)上報總局。5研判5.1風險研判根據(jù)醫(yī)學媒介生物的監(jiān)測結果，結合口岸所在地及接壤國家或地區(qū)的傳染病疫情，確定重點監(jiān)測的媒介種類、重點監(jiān)測口岸或區(qū)域，由總局組織全國口岸醫(yī)學媒介生物應急監(jiān)控技術協(xié)作組專家論證。5.2研判結果的應用5.2.1重點對象風險控制措施制定口岸重點監(jiān)測醫(yī)學媒介生物及其攜帶病原體的名錄，實施動態(tài)管理，將重點對象的密度控制在不足為害的水平；遇有重點監(jiān)測醫(yī)學媒介生物密度異常增高，應及時開展動態(tài)監(jiān)測，通過擴大監(jiān)測區(qū)域、增加監(jiān)測頻次等方式查找醫(yī)學媒介生物密度增高原因，并采取相應的控制措施。周邊國家或地區(qū)有蟲媒傳染病疫情流行時，應及時發(fā)布相關蟲媒傳染病疫情警示通告，立即開展與蟲媒傳染病相關的醫(yī)學媒介生物的監(jiān)測；并重點查驗來自疫區(qū)出入境交通工具及其貨物攜帶的媒介生物。5.2.2重點口岸或區(qū)域風險控制措施重點口岸或區(qū)域結合醫(yī)學媒介生物生態(tài)習性及口岸地理、環(huán)境等特點，制定相關口岸或區(qū)域醫(yī)學媒介生物控制方案，采取控制措施，并根據(jù)實際需要開展雙（多）邊合作監(jiān)測重點項目。6保障6.1能力保障對口岸一線衛(wèi)生檢疫人員開展醫(yī)學媒介生物監(jiān)測（包括標本制作與鑒定）及攜帶病原體檢測技術骨干培訓，確保本次醫(yī)學媒介生物本底監(jiān)測工作隊伍能力、方法器具保障到位，監(jiān)測工作質(zhì)量和數(shù)據(jù)準確、有效。6.2質(zhì)量控制6.2.1口岸檢驗檢疫機構應當采用本方案規(guī)定的監(jiān)測方法，以確保全國口岸本底監(jiān)測數(shù)據(jù)的可比性。對各口岸在本底監(jiān)測中發(fā)現(xiàn)的新種、新記錄種、稀有種等醫(yī)學媒介生物，應留存足夠數(shù)量的標本，以備總局委派權威專家對留存標本進行復核。6.2.2各實驗室檢測結論為陽性的樣本，送中國檢科院衛(wèi)檢所媒介實驗室或廣東局P3實驗室進行復檢；需進一步復核的樣本送軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所進行檢測。承擔媒介攜帶病原體復檢任務的實驗室，應當妥善保存病原體檢測陽性樣本。6.3核查措施6.3.1督導檢查。為確保質(zhì)量，提高醫(yī)學媒介生物監(jiān)測結果的準確性和真實性，總局將隨機抽取一定比例的口岸，派檢查組對監(jiān)測、檢測質(zhì)量控制進行檢查，檢查內(nèi)容包括監(jiān)測工具、采集記錄、醫(yī)學媒介生物標本、鑒定記錄、實驗室檢測人員能力等內(nèi)容，對于存在弄虛作假、謊報結果等惡性行為，將在全系統(tǒng)予以通報。6.3.2績效考核數(shù)據(jù)上報應遵循真實、準確、完整和及時原則，要建立嚴格的結果審核復核制度并認真執(zhí)行，對出現(xiàn)弄虛作假、瞞報、漏報、遲報、誤報等行為，將扣除直屬局績效考核評分。7附件附件1口岸病媒生物監(jiān)測方法附件2口岸醫(yī)學媒介生物調(diào)查記錄表附件3口岸醫(yī)學媒介生物標本前處理、保存和送樣規(guī)范附件4口岸醫(yī)學媒介生物攜帶病原檢測方法附件5全國口岸重要病媒生物攜帶病原體檢測范圍附件1口岸醫(yī)學媒介生物監(jiān)測方法1.鼠類及體表寄生蟲監(jiān)測方法1.1鼠類監(jiān)測方法1.1.1籠捕法參見《國境口岸鼠類監(jiān)測規(guī)程》（SN/T1240-2003）5.2（c）1.1.2鼠夾法和粘鼠板法參見《病媒生物監(jiān)測方法鼠類》（GB/T23798-2009）3.1和3.21.2鼠類體表寄生蟲監(jiān)測方法1.2.1蚤類監(jiān)測方法參見《國境口岸蚤類監(jiān)測規(guī)程》（SN/T1292-2003）附錄C1.2.2蜱類監(jiān)測方法參見《國境口岸蜱類監(jiān)測規(guī)程》（SN/T1293-2003）附錄A1.2.3螨類監(jiān)測方法參見《國境口岸螨類監(jiān)測規(guī)程》（SN/T1339-2003）附錄A2.蚊類監(jiān)測方法蚊類監(jiān)測方法參見《病媒生物監(jiān)測方法蚊類》（GB/T23797-2009）2.1、2.2、2.6、2.82.10、2.11和2.133..蜱類監(jiān)測方法此處指游離蜱，鼠帶蜱類調(diào)查與鼠調(diào)查一起進行。調(diào)查時一般每月分上、下旬定期調(diào)查。3.1游離蜱布旗法和宿主動物巢穴采集法參見《國境口岸蜱類監(jiān)測規(guī)程》（SN/T1293-2003）附錄A3.2洞干蜱采集法：在調(diào)查區(qū)內(nèi)找鼠洞洞口，用探蚤棒伸入洞內(nèi)，取出探蚤棒采集粘附的蜱類，帶回實驗室檢查、鑒定、計數(shù)統(tǒng)計。蜱密度=（捕獲蜱數(shù)/檢查洞穴數(shù)）單位：只/洞附件2口岸醫(yī)學媒介生物調(diào)查記錄表表1.口岸鼠類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表（現(xiàn)場采樣人員填寫）表2.鼠類鑒定檢測記錄表（鑒定檢測人員填寫）表3.口岸成蚊監(jiān)測現(xiàn)場記錄表（現(xiàn)場采樣人員填寫）表4.口岸蚊蟲卵監(jiān)測記錄表（現(xiàn)場采樣人員填寫）表5.口岸蚊幼蟲監(jiān)測現(xiàn)場記錄表（現(xiàn)場采樣人員填寫）表6.口岸蜱類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表（現(xiàn)場采樣人員填寫）表7.新記錄物種表（直屬局衛(wèi)生處填寫）表1口岸鼠類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時間：年月日—年月日編號生境類型監(jiān)測用器械數(shù)有效器械數(shù)捕獲總數(shù)（只）鼠密度合計天氣：風速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：監(jiān)測人：填報日期：年月日表2.鼠類鑒定檢測記錄表采集時間：采集地點：編號生境種類性別年齡體重g體長cm耳高cm右后足長cm體表寄生蟲數(shù)量病原體檢測如檢測結果為陽性，應注明檢測方法成幼蜱蚤螨鼠疫菌漢坦病毒伯氏疏螺旋體陰性陽性陰性陽性陰性陽性監(jiān)測單位：解剖制作者：表3口岸成蚊監(jiān)測現(xiàn)場記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時間：年月日—年月日編號監(jiān)測地點生境類型采集開始時間采集結束時間監(jiān)測用器械數(shù)捕獲數(shù)量（只）密度計算單位蚊密度備注合計天氣：風速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：監(jiān)測人：填報日期：年月日表4口岸蚊蟲卵監(jiān)測記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時間：年月日—年月日編號蚊蟲種類：誘卵環(huán)境備注誘卵器數(shù)卵陽性誘卵器數(shù)誘卵指數(shù)合計天氣：風速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：監(jiān)測人：填報日期：年月日表5口岸蚊幼蟲監(jiān)測現(xiàn)場記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時間：年月日—年月日編號監(jiān)測地點水體類型采集時間（時、分）監(jiān)測用器械數(shù)捕獲數(shù)量（只）密度計算單位蚊幼蟲密度（單位）備注合計天氣：風速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：監(jiān)測人：填報日期：年月日表6口岸蜱類監(jiān)測現(xiàn)場記錄表監(jiān)測方法：監(jiān)測時間：年月日—年月日編號監(jiān)測地點生境類型監(jiān)測人員姓名采集開始時間采集結束時間捕獲數(shù)量（只）成蜱若蜱幼蜱合計天氣：風速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：填表人：填報日期：年月日表7新記錄種、新種登記表生境及地點日期種名采集方法數(shù)量采集人鑒定人、復核人科屬種拉丁文名稱天氣：風速：m/s溫度：℃濕度：％海拔高度米監(jiān)測單位：填報人：填報日期：年月日附件3口岸醫(yī)學媒介生物樣品前處理、保存和送樣規(guī)范一、口岸醫(yī)學媒介生物鑒定檢測樣品前處理規(guī)范（一）鼠類及體表寄生蟲1準備工作1.1穿戴防護用具：防蚤工作服、乳膠手套、防生口罩、帽子、防護鏡。1.2器械：白色方盤、固定板、鑷子、手術剪、紗布、消毒試管和廣口瓶、小塑料樣品袋、3%的來蘇爾、75%酒精、棉球、標簽、標本采集專用工具等。2鼠類樣品采集：2.1無菌及生物安全要求2.1.1無菌操作：采集血液和組織樣品過程要求鼠體表消毒并需使用已消毒或一次性無菌器材，血液和組織樣品需保存在無菌容器內(nèi)。2.1.2生物安全防護：鼠類解剖、采集血液和組織樣品時需作好個人生物安全防護，整個解剖過程應在生物安全柜（II—2A及以上級別）中進行（無生物安全柜的單位，應在良好通風的實驗室進行，并保持實驗操作人員處于上風位置）做到防叮咬、防刺傷、防氣溶膠傳播等，如穿防蚤隔離衣、鞋、膠手套、防生口罩，實驗室需配備硬質(zhì)防穿刺的廢物容器。2.2活鼠樣本處理2.2.1外觀檢測：將鼠標本置方形手術盤的解剖板上，檢測鼠體體重（g）、體長（mm）、尾長(mm)、耳高(mm)、后足長(mm)、性別(♀♂)、鑒定鼠種，填寫記錄表。2.2.2血樣采集：在密封塑料袋內(nèi)放置適量氯仿或乙醚棉球，將裝有活鼠的鼠袋放入，經(jīng)過一定蒸熏時間，使鼠類處于淺昏迷還有心跳的狀態(tài)后取出；采血方法參見《病媒生物感染病原體采樣規(guī)程鼠類》（GB/T28940-2012）2.2.3血清處理:采血后編號登記，先置放室溫1個小時，然后3000轉/分鐘離心15分鐘，取上清液。2.2.4臟器采集：臟器采集：按皮下、腹腔、胸腔的順序解剖，采取膀胱、肝、脾、肺和心臟等，腹腔和胸腔臟器采集時應更換無菌剪、鑷。2.3死亡的鼠類：2.3.1鼠體外觀檢測：同2.2.1；2.3.2血樣采集：將鼠類從鼠袋中取出，釘在解剖板上（解剖板放在手術盤內(nèi)，下墊紗布及3%的來蘇爾浸泡液），用75%酒精棉球將鼠體消毒清洗一遍，然后沿著腹正中線剪開（皮下至肌肉組織），找到心臟后剪開，立即用消毒試驗濾紙片沾心臟血，沾血面積應不少于1cm×4cm，然后放入消毒試管，編號登記；2.3.3臟器采樣：同2.2.4；若動物腐敗或鼠尸殘缺不全時，通常采取股骨髓檢查。先剝?nèi)ス峭饧∪猓竞蠹魯喙晒?，用白金耳取骨髓。每個臟器存放一個小塑料袋內(nèi)，封口后編號和登記。3.鼠體表寄生蚤、螨、蜱類標本采集：鼠類采血和解剖采樣前應先撿蚤、螨、蜱類。打開經(jīng)過氯仿或乙謎蒸熏昏迷的鼠的鼠袋，將鼠倒進白色的深搪瓷盆內(nèi)。先把鼠袋慢慢翻開，隨翻隨撿，將寄生蟲放進指形管中；然后一只手用大鑷子夾持鼠體，另一手用梳子梳鼠體蚤、螨、蜱，由鼠頭部往后梳，再由尾部向前梳，特別要注意頸部、腋窩和股骨內(nèi)側。將刷出的鼠體外寄生蟲蚤、螨、蜱，用毛筆沾75%酒精或鑷子分類撿入指形管（內(nèi)裝75%酒精）；再將用鉛筆書寫的標簽放至指形管中，用脫脂棉塞口。將其存放于內(nèi)裝75%酒精的大磨口瓶中。（二）蚊類和蜱類1.分類鑒定用蚊、蜱的標本采集：采用氯仿、乙醚、冷凍滅活，按不同類別媒介分別置于干凈的白色方盤上分類。蜱類根據(jù)標本完整性要求，挑選較理想的標本分別按時間、地點分類撿入指形管內(nèi)（內(nèi)裝75%酒精），再將用鉛筆書寫的標簽放至指形管中，用脫脂棉塞口。將其存放于內(nèi)裝75%酒精的大磨口瓶中。蚊類用雙針法插于標本盒（或指形管）內(nèi)，加貼標簽和登記，室溫干燥保存(盒內(nèi)放置樟腦丸)。2.病原檢測用蚊、蜱樣品采集：2.1蚊樣本采集：蚊樣本于-25℃冷凍30分鐘，取出后放于冰上分類鑒定，按采集批次、地點和蚊種分組，30只/組（不足30只也歸于一組），-70℃或液氮保存2.2蜱樣本采集：蜱樣本采集分類鑒定，立即密閉分裝冷凍處死，-70℃或液氮保存?zhèn)錂z。二、醫(yī)學媒介生物標本制作規(guī)范參見《醫(yī)學媒介生物標本采集、制作及保存規(guī)程》（SN/T1876-2007）三、口岸醫(yī)學媒介生物鑒定類樣品保存運送規(guī)范參見《口岸醫(yī)學媒介生物鑒定檢測樣品保存運送細則》四、口岸醫(yī)學媒介生物檢測類樣品保存運送規(guī)范醫(yī)學媒介生物攜帶病原體的檢測樣本運送必須遵守《病原微生物實驗室生物安全管理條例（中華人民共和國國務院令第424號）》和《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定（中華人民共和國衛(wèi)生部令第45號）》的要求。運送樣本的容器或包裝材料應當達到國際民航組織《危險物品航空安全運輸技術細則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標準（圖13-2），符合防水、防破損、防外泄、耐高溫、耐高壓的要求，在外包裝的外表面應按《危險貨物包裝標志（GB190-2009）》的要求貼上統(tǒng)一的標識，運送疑似鼠疫等高致病性病原微生物樣本時應按《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》加貼標識。1.鼠樣本送檢1.1活鼠送檢：活鼠連同鼠籠置于捆扎袋口的鼠袋內(nèi)，由專人送檢。1.2鼠尸送檢：新鮮鼠尸如不能采集血液和組織樣品需立即送檢，用隔水防滲材料密封，置于生物安全運輸箱中由專人送檢（不能與冰凍冷媒直接接觸，避免鼠尸冰凍）；如已無法采集血液或腐敗的鼠尸需立即低溫冰凍處理后，用隔水防滲材料密封，用浸有消毒液的棉花包裹，裝入特制的容器內(nèi)，置于生物安全運輸箱中由專人低溫送檢。1.3鼠血清及組織樣本送檢：血清及組織樣本必須經(jīng)隔水防滲密封處理，用浸有消毒液的棉花包裹，裝入特制的容器內(nèi)，管口朝上，不可倒置，使用液氮罐或生物安全運輸箱（較短時間）低溫送檢，跨省運送時推薦使用干冰，并確保樣品送到實驗室時干冰仍覆蓋樣品。2.蚊樣本送檢：置于液氮罐或生物安全運輸箱（較短時間）低溫送檢，跨省運送時推薦使用干冰，并確保樣品送到實驗室時干冰仍覆蓋樣品。3.蜱樣本送檢：置于液氮罐或生物安全運輸箱（較短時間）低溫送檢，跨省運送時推薦使用干冰，并確保樣品送到實驗室時干冰仍覆蓋樣品。詳見《醫(yī)學媒介生物（病原體檢測用）樣本保存及運送細則》醫(yī)學媒介生物（病原體檢測用）樣本保存及運送細則一、媒介生物樣本保存（一）蚊類采集到的蚊類標本，直接放入—20℃或者—30℃冰箱中冷凍25-30分鐘（切勿使用乙醚、氯仿等麻醉劑，以保證樣本病原體檢測的準確性），取出標本放在冰塊（可用淺底白瓷盤預先冷凍冰塊）上（解剖鏡下）進行分類鑒定。分裝原則為：中華按蚊等中大型蚊蟲每30只；淡色庫蚊、白蚊伊蚊等小型蚊蟲每30-100只裝入1.5mL或者2.0mL離心管中；放入液氮或—80℃低溫冰箱中保存。液氮中標本的保存時間不超過6個月；—80℃（二）鼠類采集鼠類的標本包括心臟、肝臟、脾臟、肺臟、膀胱、血液。每種臟器標本（黃豆大小體積即可）應分裝在不同的1.5mL離心管中或者0號封口袋中。血液標本采集為血清或血紙條方式。鼠體寄生蟲的采集應在活鼠經(jīng)過乙醚或者氯仿麻醉致死后采集。原則上單個鼠臟器標本分裝單個試管，可以保存在液氮或者—80℃（三）蜱類可以采集鼠體及其他動物體表寄生的蜱類（每只動物采集蜱類樣本單獨保存），以及野外游離蜱類，分類鑒定并做好相應記錄后將蜱類標本放入液氮或—80℃二、標本編號原則所有標本的編號均可依照下列方式：地名拼音的縮寫加上采樣日期后加編四級號碼，比如在北京朝陽口岸采集的蚊類第一個標本可以編號為（2014年4月23日三、樣本的運送（一）針插標本可以使用指管固定后直接發(fā)送快件，酒精浸泡后蜱類和其他標本（低溫保存的）可以倒掉酒精后使用干冰快遞（條件不足時，也可以使用冰袋保存運送，但應在2天內(nèi)送到實驗室）。（二）鼠類的形態(tài)標本制作后，和頭骨（使用小的瓶子或者有機玻璃盒子單獨盛放）一起用報紙包裝后快遞即可。注意保存完成的采樣記錄和編號。（三）擬進行醫(yī)學媒介生物攜帶病原體檢測的標本，應使用冷鏈運送方式送達相應的實驗室。四、醫(yī)學媒介生物攜帶病原體核酸檢測樣本的保存和運送方法所有媒介標本病原體分子生物學的檢測主要包括2個方面。RNA為模板的檢測（包括大部分病毒的）和DNA為模板的檢測（包括細菌、立克次體等），主要是樣本的保存方式的不同，涉及到RNA模板的檢測，樣本一定要在4小時以內(nèi)保存到液氮或者—80℃低溫冰箱中保存，在6個月內(nèi)送檢；涉及DNA模板的檢測，樣本盡可能保存在液氮或者—80℃低溫冰箱中，也可以使用—需檢測病原體名稱樣本保存方式樣本運送方式對應的備檢樣本鼠疫菌、伯氏疏螺旋體、瘧原蟲—20℃冷鏈運送（使用冰袋運送應該2天內(nèi)到達實驗室）鼠疫菌鼠血清、肝、肺、脾、骨髓、寄生蚤。伯氏疏螺旋體鼠肝、蜱、膀胱；游離蜱、寄生蜱。瘧原蟲蚊蟲標本（按蚊）。漢坦病毒、甲病毒屬、黃病毒屬、布尼亞病毒屬、森林腦炎病毒液氮或者—80℃盡量使用液氮或干冰運送（干冰以完全覆蓋送檢樣本為準，3天內(nèi)到達實驗室）漢坦病毒鼠肺、肝、脾。甲病毒屬蚊蟲標本黃病毒屬蚊蟲標本森林腦炎病毒游離蜱。五、醫(yī)學媒介生物攜帶病原體的其他檢測方法的樣本的保存和運送方法使用血清學或免疫學方法檢測醫(yī)學媒介生物攜帶病原體的標本，根據(jù)其所使用的檢測方法，選擇相應的標本保存和運送方法。檢測鼠疫抗體（含使用膠體金方法）：樣本為鼠血清，采集分離鼠血清后，應將樣本保存在-20℃檢測鼠疫抗原：采集鼠類血清和臟器后，應將樣本保存在在-20℃附件4口岸醫(yī)學媒介生物攜帶病原檢測方法1.鼠類攜帶病原體檢測1.1鼠疫菌1.1.1生物安全：鼠疫是一種自然疫源性疾病，是以發(fā)病急、傳播快、病死率高、傳染性強為特征的烈性傳染病，是《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定的甲類傳染病。開展鼠疫檢測工作應按照《國境口岸鼠疫檢驗規(guī)程》（SN/T1280-2003）附錄A要求，嚴格執(zhí)行生物安全操作。1.1.2血清學監(jiān)測：按照《國境口岸鼠疫疫情監(jiān)測規(guī)程》（SN/T1188-2003）6.2.5要求開展間接血凝試驗檢驗鼠疫F1抗體，不明原因死鼠和腐敗材料應做反向血凝試驗檢驗鼠疫F1抗原。1.1.3核酸檢測：可按照《國境口岸鼠攜帶鼠疫菌和漢坦病毒快速檢測方法》（SN/T2616-2010）要求對捕獲鼠類進行核酸檢測。1.2漢坦病毒1.2.1鼠肺抗原和血清抗體檢測：免疫熒光法檢測鼠肺漢坦病毒抗原，或可按照《》（SN/T2616-2010）用雙抗原夾心ELISA檢測鼠漢坦病毒抗體。1.2.2核酸檢測和序列測定：對免疫熒光陽性鼠肺標本，可按照《》（SN/T2616-2010）進行核酸檢測。1.2.3病毒分離：有條件的實驗室可開展病毒分離，或送到中國檢科院、廣東局衛(wèi)檢實驗室進行病毒分離。1.3伯氏疏螺旋體1.3.1血清學檢測：鼠血清用間接免疫熒光抗體法（IFA）或酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測抗伯氏疏螺旋體抗體。1.3.2病原學檢測：鼠臟器（心、腎）用BSK培養(yǎng)基分離培養(yǎng)，單克隆抗體鑒定。1.3.3核酸檢測：可按照《蜱類攜帶森林腦炎病毒、伯氏疏螺旋體、貝氏柯克斯體PCR檢測方法》（SN/T3395-2012）檢測鼠臟器（膀胱、心、腎）中伯氏疏螺旋體核酸。2.蚊類攜帶病原體檢測先檢測蚊類攜帶黃病毒屬和甲病毒屬情況，檢測結果若為陽性再通過檢測確定具體攜帶病原體種類2.1黃病毒屬和甲病毒屬的檢測根據(jù)實驗室儀器配置情況，使用RT-PCR方法檢測，陽性樣本送省局或廣東局P3實驗室或中國檢科院進行病毒分離。2.1.1引物黃病毒屬引物：上游引物FlaP1：TACAACATG