2023版高三一輪總復(fù)習(xí)生物人教版選擇性必修3 第10單元 科學(xué)探究系列6電泳鑒定及應(yīng)用

1．核酸凝膠電泳一般用瓊脂糖凝膠電泳分離、鑒定和純化DNA或RNA片段。電場強(qiáng)度越大、電泳分子所攜帶的凈電荷數(shù)量越多，其遷移速率也就越快，反之則較慢。在一定的電場強(qiáng)度下，電泳分子的遷移速率取決于核酸分子的大小和構(gòu)象以及凝膠的濃度等。在生理?xiàng)l件下，核酸分子的糖—磷酸骨架呈離子狀態(tài)，即DNA和RNA多核苷酸鏈稱為多聚陰離子。因此，當(dāng)核酸分子被放置在電場中時，它們就會向正電極的方向遷移。由于糖—磷酸骨架結(jié)構(gòu)上的重復(fù)性質(zhì)，相同數(shù)量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷，因而它們能以同樣的速度向正電極方向遷移，從而分離出相應(yīng)的DNA片段。2．蛋白質(zhì)凝膠電泳一般用十二烷基硫酸鈉(SDS)—聚丙烯酰胺凝膠電泳對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離、純度鑒定等。SDS是一種陰離子去污劑，可與蛋白質(zhì)結(jié)合，使蛋白質(zhì)變性并帶上負(fù)電荷。待分離蛋白質(zhì)樣品在電泳中的遷移速率與蛋白質(zhì)本身性質(zhì)、凝膠孔徑和電泳條件(如電流、電壓)等密切相關(guān)，蛋白質(zhì)結(jié)合大量的SDS后，各組分子間的形狀和電荷差異被抵消，此時蛋白質(zhì)在電場中遷移速率的快慢，僅與各自分子量的大小有關(guān)，從而分離出相應(yīng)的蛋白質(zhì)。1．用XhoⅠ和SalⅠ兩種限制性內(nèi)切核酸酶分別處理同一DNA片段，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。下列敘述錯誤的是()圖1酶切位點(diǎn)圖圖2電泳結(jié)果示意圖A．電泳是指帶電的分子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程B．泳道①中是用XhoⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物C．若用XhoⅠ和SalⅠ兩種酶同時處理該DNA片段后電泳，其泳道可能只有5條D．電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系鑒定B[電泳是指帶電的分子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程，A正確；限制酶SalⅠ有三處切割位點(diǎn)，切割后產(chǎn)生4個DNA片段，泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物，B錯誤；限制酶SalⅠ有三處切割位點(diǎn)，切割后產(chǎn)生4個DNA片段，限制酶XhoⅠ有2處切割位點(diǎn)，切割后產(chǎn)生3個DNA片段，結(jié)合題圖可知，若用XhoⅠ和SalⅠ兩種酶同時處理該DNA片段后電泳，可能存在相同長度的DNA片段，其泳道可能只有5條，C正確；不同生物的DNA切割后長度不同，切割后再進(jìn)行電泳，可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定，D正確。]2．用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因植株是否成功導(dǎo)入目的基因時，得到以下電泳圖譜，其中1號為DNA標(biāo)準(zhǔn)樣液(Marker)，10號為電泳緩沖液。進(jìn)行PCR時加入的模板DNA如圖所示。據(jù)此做出分析不正確的是()A．PCR產(chǎn)物的分子大小在250～500bp之間B．3號樣品為不含目的基因的載體DNAC．9號樣品對應(yīng)植株不是所需的轉(zhuǎn)基因植株D．10號的電泳結(jié)果能確定反應(yīng)體系等對實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒有干擾B[PCR過程中，可以通過設(shè)計(jì)特定的引物來擴(kuò)增特定的DNA片段，4～9號是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因，結(jié)合2號野生型和10號電泳緩沖液組的結(jié)果，推測包含目的基因的片段大小應(yīng)為250～500bp，A正確；3號PCR結(jié)果包含250～500bp片段，應(yīng)包含目的基因，B錯誤；9號PCR結(jié)果不包含250～500bp片段，所以不是所需的轉(zhuǎn)基因植株，C正確；10號加入電泳緩沖液，可排除反應(yīng)體系等對結(jié)果的干擾，D正確。]3．對凝膠電泳的相關(guān)認(rèn)識錯誤的是()A．蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率只取決于分子的大小B．蛋白質(zhì)在SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率完全取決于分子的大小C．SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳不僅用于蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的測定，還可用于蛋白質(zhì)混合組分的分離D．凝膠中加入SDS可以消除凈電荷對遷移率的影響A[蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率決定于分子的大小和所帶電荷等，A錯誤；由于加入帶負(fù)電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”，蛋白質(zhì)在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率完全取決于分子的大小，B正確；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳用于蛋白質(zhì)混合組分的分離的原理就是不同蛋白質(zhì)其相對分子質(zhì)量不同，因