干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)課件

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死

TheeffectsofMSCstransplantationforacutemyocardialinfarction

天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院

TheSecondTeachingHospitalofTUTCM徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死

Theeffectsof1Background干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Background干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)2MirandaD.Grounds,etal.TheJournalofHistochemistry&Cytochemistry2002,50(5):589–610干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)MirandaD.Grounds,etal.The3干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)4干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)5干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)6ESCandASCESCASC來自胚泡的內(nèi)細(xì)胞群來源于骨髓、外周血、角膜、視網(wǎng)膜、腦、骨骼肌、齒髓、肝、皮膚、胃腸道粘膜層和胰腺等發(fā)育全能性，可誘導(dǎo)分化為機(jī)體分化較局限，部分成體干細(xì)胞（造血干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞）有一定跨系、跨胚層的“可塑性”無限的自我更新能力病理?xiàng)l件下才顯出一定的自我更新潛能增殖能力強(qiáng)，便于應(yīng)用增殖能力較弱，故不能完全取代胚胎干細(xì)胞細(xì)胞可不斷增殖，“永生化”，移植后有形成腫瘤的可能性成瘤的可能性很小不能自體移植自體移植可避免免疫排斥有倫理問題分離和使用不存在倫理問題干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)ESCandASCESCASC來自胚泡的內(nèi)細(xì)胞群來源于骨7BMC(bonemarrowcell)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)BMC(bonemarrowcell)干細(xì)胞移植治療急性8Nature/Vol428/3April2004/664-8

145例HSC移植入正?；蛘邠p傷的成年小鼠心臟的實(shí)驗(yàn)研究，沒有發(fā)現(xiàn)由干細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來的心肌，并且干細(xì)胞移植組相對(duì)于假移植組心肌細(xì)胞數(shù)量沒有明顯的增加，為心肌修復(fù)的臨床研究提供一個(gè)警示。心臟功能上的改善可能是由于移植對(duì)左心室重塑的影響或者是產(chǎn)生了新生血管，而不是心肌再生。過去兩年來，開展了一些使用骨髓祖細(xì)胞進(jìn)行心臟修復(fù)臨床試驗(yàn)。在目前研究中，HSC不能轉(zhuǎn)化形成新的心肌對(duì)這些試驗(yàn)的理論基礎(chǔ)提出了質(zhì)疑。

ProblemsofHSC干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Nature/Vol428/3April2004/6649HSC（CD34+）TransplatitionforAMIJThoracCardiovascSurg2005;130:1631-8干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)HSC（CD34+）TransplatitionforA10干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)11是骨髓中除造血細(xì)胞以外的中胚層來源的細(xì)胞，其細(xì)胞特性穩(wěn)定，在連續(xù)傳代培養(yǎng)和凍存后仍具有多向分化潛能。在特定的誘導(dǎo)條件下，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以分化為間充質(zhì)組織中的各類細(xì)胞，包括：骨、軟骨、脂肪、肌腱、韌帶等細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcell,MSC）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)是骨髓中除造血細(xì)胞以外的中胚層來源的細(xì)胞，其細(xì)胞特性穩(wěn)定，在12

（K.D.Bunting,R.G.Hawley.BiologyoftheCell2003,95:563–578）MSC(mesenchymalstemcell)DIFFERITION干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)（K.D.Bunting,R.G.Hawley13梗死的心臟注入富含鼠的骨髓干細(xì)胞后，40%的心肌層得到恢復(fù)。

——Olic.Nature.2001,410:701-705用人的骨髓來源的干細(xì)胞使心肌梗死鼠30%～40%的心功能得到改善。

——Kocher.NatMed.2001,7:430-436

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)梗死的心臟注入富含鼠的骨髓干細(xì)胞后，40%的心肌層得到恢復(fù)。14Currentproblem----evidence骨髓干細(xì)胞究竟能否分化成心肌細(xì)胞卻始終有爭(zhēng)議，目前仍無法完全證實(shí)MSC可分化為心肌細(xì)胞。？？？干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Currentproblem----evidence骨髓干15NewFocus----microenvironment

急性心肌梗死后局部微環(huán)境發(fā)生的一系列炎癥反應(yīng)，對(duì)干細(xì)胞的存活、分化、遷移等都有很大影響。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NewFocus----microenvironment16MSC原代傳代前細(xì)胞形態(tài)（100×）貼壁細(xì)胞增殖融合，鋪滿瓶底90%左右，未貼壁細(xì)胞是造血干細(xì)胞及組織碎片干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)MSC原代傳代前細(xì)胞形態(tài)（100×）貼壁細(xì)胞增殖融合，鋪滿17p1（100×）

p4（100×）

p3（100×）

p2（100×）

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)p1（100×）p4（100×）p3（100×）p2（18流式細(xì)胞鑒定CD106、CD90表達(dá)陽性，CD31、CD45表達(dá)陰性干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)流式細(xì)胞鑒定CD106、CD90表達(dá)陽性，CD31、CD19DiL標(biāo)記結(jié)果（200×）

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)DiL標(biāo)記結(jié)果（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)20AMINormal復(fù)方丹參滴丸對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)AMINormal復(fù)方丹參滴丸對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性21NormalAMI干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NormalA22NBT干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NBT干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)23NORMALAMI干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NORMAL24AMIGroup左室后壁增厚，運(yùn)動(dòng)幅度變小

CDDP＋MSCGroup左室后壁厚度均勻，運(yùn)動(dòng)幅度正常干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)AMIGroupCDDP＋MSCGroup干細(xì)胞移植治療25對(duì)AMI大鼠心臟射血分?jǐn)?shù)的影響孫蘭軍等，中華醫(yī)學(xué)臨床雜志，2008，6（2）：4＊＊干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)對(duì)AMI大鼠心臟射血分?jǐn)?shù)的影響孫蘭軍等，中華醫(yī)學(xué)臨床雜志，226心肌梗死面積測(cè)定結(jié)果模型組MSCs＋復(fù)方丹參滴丸組＊＊干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)心肌梗死面積測(cè)定結(jié)果模型組MSCs＋復(fù)方丹參滴丸組＊＊干細(xì)胞27A，培養(yǎng)MSC用DiI（紅色）和Hoechst33258（藍(lán)色）染色的照片；B，心臟切片用Hoechst33258染色的照片，箭頭顯示部分移植的MSC；C，對(duì)照組心臟幾乎沒有MSC定位；干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)A，培養(yǎng)MSC用DiI（紅色）和Hoechst33258（藍(lán)28MSC移植后成活和增殖

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)MSC移植后成活和增殖干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)29極少量移植地細(xì)胞能表達(dá)α-actinin，說明開始向心肌細(xì)胞分化，但這種分化是不完全的，因?yàn)闆]有橫紋的出現(xiàn)。相對(duì)較多的細(xì)胞表達(dá)血管性血友病因子(vWF)，說明移植的MSC能夠向內(nèi)皮細(xì)胞分化。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)極少量移植地細(xì)胞能表達(dá)α-actinin，說明開始向心肌細(xì)胞30CX-43染色在同一視野看到Dil標(biāo)記的植入的紅色熒光的MSCs和二抗FITC標(biāo)記的相應(yīng)綠色熒光的

CX-43陽性表達(dá)CDDP+MSC組（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)CX-43染色在同一視野看到Dil標(biāo)記的植入的紅色熒光的MS31CX-43染色MSC組（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)CX-43染色MSC組（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死32TroponinⅠ染色CDDP+MSC組（200×）在同一視野看到Dil標(biāo)記的植入的紅色熒光的MSCs和二抗FITC標(biāo)記的相應(yīng)綠色熒光的

TroponinⅠ陽性表達(dá)，干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)TroponinⅠ染色CDDP+MSC組（200×）在同33TroponinⅠ染色MSCsGroupTroponinⅠ表達(dá)（200×）

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)TroponinⅠ染色MSCsGroupTroponi34對(duì)心臟膠原沉積的影響HEPicrosiriusredHEPicrosiriusred

normalMSCs+CDDPMSCsmodel干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)對(duì)心臟膠原沉積的影響HE35各心梗組大鼠的膠原含量無顯著差異。但是，MSC和CDDP+MSC移植使心肌梗死區(qū)I/III型膠原比值分別降低了77％和84％。說明細(xì)胞移植能增加III型膠原含量，改善心肌順應(yīng)性，可能會(huì)對(duì)心功能有益。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)各心梗組大鼠的膠原含量無顯著差異。但是，MSC和CDDP+M36**BalcalininducedmigrationofMscs干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)**Balcalininducedmigrationo37Real-timequantitativeRT-PCRanalysisofVEGF,SCF,SDF-1αandMCP-1mRNAchange*p<0.05,**p<0.01,comparedtomodel.(n=6),

******干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Real-timequantitativeR38***干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)***干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)39ConclusionsCDDP可能通過多種途徑和機(jī)制干預(yù)誘導(dǎo)植入梗塞大鼠心肌干細(xì)胞的分化成活，并使植入細(xì)胞表達(dá)心肌特異性蛋白，說明植入細(xì)胞已分化為心肌樣細(xì)胞，同時(shí)可抑制膠原沉積，改善微環(huán)境。

有望成為中醫(yī)藥治療心血管疾病的一個(gè)新的發(fā)展方向，作為現(xiàn)代治療方法的補(bǔ)充手段，為臨床帶來廣闊的應(yīng)用前景。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)ConclusionsCDDP可能通過多種途徑40Isstemcelltherapyforcardiac

repairreadyforpatients?干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Isstemcelltherapyforcardi41RandomizedClinicalTrialsofStemCellTherapyforMI

StudynCellType/TreatmentModeofDelivery

EndPoint

P

Janssensetal67BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.36BOOST60BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.0026ASTAMI100BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.05*REPAIR-AMI204BMMNCsIntracoronaryLVejectionfraction0.021Zohlnhoeferetal114G-CSFSubcutaneousInfarctsize0.79STEMMI62G-CSFSubcutaneousLVsystolicwallthickening1.00BMMNCsindicatesbonemarrowmononuclearcells;G-CSF,granulocytecolony-stimulatingfactor;andSTEMMI,StemCellsinMyocardialInfarction.*LVejectionfractionwashigherinthecontrolgroup.Circulation.2006;114:353-358.

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)RandomizedClinicalTrialsof42Arrhythmias

Restenosis,AcceleratedAtherosclerosis,andCoronaryObstruction

AbnormalCellularDifferentiation

Inaddition，SafetyConcerns干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Arrhythmias

Restenosis,Ac43Isstemcelltherapyforcardiacrepairreadyforpatients?

Notready干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Isstemcelltherapyforcardi44

作為一項(xiàng)新生事物，干細(xì)胞移植可能是治療缺血性心臟病令人激動(dòng)的新選擇。尤其是那些有大面積心肌梗死患者，因其預(yù)后不佳，更有可能從細(xì)胞移植治療中獲益。但迄今為止，臨床試驗(yàn)結(jié)果相互矛盾，仍然處于實(shí)驗(yàn)性治療階段。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)作為一項(xiàng)新生事物，干細(xì)胞移植可能是治療缺血45謝謝！謝謝！干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)謝謝！謝謝！干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)46干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死

TheeffectsofMSCstransplantationforacutemyocardialinfarction

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TheSecondTeachingHospitalofTUTCM徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死

Theeffectsof47Background干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Background干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)48MirandaD.Grounds,etal.TheJournalofHistochemistry&Cytochemistry2002,50(5):589–610干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)MirandaD.Grounds,etal.The49干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)50干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)51干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)52ESCandASCESCASC來自胚泡的內(nèi)細(xì)胞群來源于骨髓、外周血、角膜、視網(wǎng)膜、腦、骨骼肌、齒髓、肝、皮膚、胃腸道粘膜層和胰腺等發(fā)育全能性，可誘導(dǎo)分化為機(jī)體分化較局限，部分成體干細(xì)胞（造血干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞）有一定跨系、跨胚層的“可塑性”無限的自我更新能力病理?xiàng)l件下才顯出一定的自我更新潛能增殖能力強(qiáng)，便于應(yīng)用增殖能力較弱，故不能完全取代胚胎干細(xì)胞細(xì)胞可不斷增殖，“永生化”，移植后有形成腫瘤的可能性成瘤的可能性很小不能自體移植自體移植可避免免疫排斥有倫理問題分離和使用不存在倫理問題干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)ESCandASCESCASC來自胚泡的內(nèi)細(xì)胞群來源于骨53BMC(bonemarrowcell)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)BMC(bonemarrowcell)干細(xì)胞移植治療急性54Nature/Vol428/3April2004/664-8

145例HSC移植入正?；蛘邠p傷的成年小鼠心臟的實(shí)驗(yàn)研究，沒有發(fā)現(xiàn)由干細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來的心肌，并且干細(xì)胞移植組相對(duì)于假移植組心肌細(xì)胞數(shù)量沒有明顯的增加，為心肌修復(fù)的臨床研究提供一個(gè)警示。心臟功能上的改善可能是由于移植對(duì)左心室重塑的影響或者是產(chǎn)生了新生血管，而不是心肌再生。過去兩年來，開展了一些使用骨髓祖細(xì)胞進(jìn)行心臟修復(fù)臨床試驗(yàn)。在目前研究中，HSC不能轉(zhuǎn)化形成新的心肌對(duì)這些試驗(yàn)的理論基礎(chǔ)提出了質(zhì)疑。

ProblemsofHSC干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Nature/Vol428/3April2004/66455HSC（CD34+）TransplatitionforAMIJThoracCardiovascSurg2005;130:1631-8干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)HSC（CD34+）TransplatitionforA56干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)57是骨髓中除造血細(xì)胞以外的中胚層來源的細(xì)胞，其細(xì)胞特性穩(wěn)定，在連續(xù)傳代培養(yǎng)和凍存后仍具有多向分化潛能。在特定的誘導(dǎo)條件下，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以分化為間充質(zhì)組織中的各類細(xì)胞，包括：骨、軟骨、脂肪、肌腱、韌帶等細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcell,MSC）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)是骨髓中除造血細(xì)胞以外的中胚層來源的細(xì)胞，其細(xì)胞特性穩(wěn)定，在58

（K.D.Bunting,R.G.Hawley.BiologyoftheCell2003,95:563–578）MSC(mesenchymalstemcell)DIFFERITION干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)（K.D.Bunting,R.G.Hawley59梗死的心臟注入富含鼠的骨髓干細(xì)胞后，40%的心肌層得到恢復(fù)。

——Olic.Nature.2001,410:701-705用人的骨髓來源的干細(xì)胞使心肌梗死鼠30%～40%的心功能得到改善。

——Kocher.NatMed.2001,7:430-436

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)梗死的心臟注入富含鼠的骨髓干細(xì)胞后，40%的心肌層得到恢復(fù)。60Currentproblem----evidence骨髓干細(xì)胞究竟能否分化成心肌細(xì)胞卻始終有爭(zhēng)議，目前仍無法完全證實(shí)MSC可分化為心肌細(xì)胞。？？？干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Currentproblem----evidence骨髓干61NewFocus----microenvironment

急性心肌梗死后局部微環(huán)境發(fā)生的一系列炎癥反應(yīng)，對(duì)干細(xì)胞的存活、分化、遷移等都有很大影響。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NewFocus----microenvironment62MSC原代傳代前細(xì)胞形態(tài)（100×）貼壁細(xì)胞增殖融合，鋪滿瓶底90%左右，未貼壁細(xì)胞是造血干細(xì)胞及組織碎片干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)MSC原代傳代前細(xì)胞形態(tài)（100×）貼壁細(xì)胞增殖融合，鋪滿63p1（100×）

p4（100×）

p3（100×）

p2（100×）

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)p1（100×）p4（100×）p3（100×）p2（64流式細(xì)胞鑒定CD106、CD90表達(dá)陽性，CD31、CD45表達(dá)陰性干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)流式細(xì)胞鑒定CD106、CD90表達(dá)陽性，CD31、CD65DiL標(biāo)記結(jié)果（200×）

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)DiL標(biāo)記結(jié)果（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)66AMINormal復(fù)方丹參滴丸對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)AMINormal復(fù)方丹參滴丸對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性67NormalAMI干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NormalA68NBT干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NBT干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)69NORMALAMI干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)NORMAL70AMIGroup左室后壁增厚，運(yùn)動(dòng)幅度變小

CDDP＋MSCGroup左室后壁厚度均勻，運(yùn)動(dòng)幅度正常干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)AMIGroupCDDP＋MSCGroup干細(xì)胞移植治療71對(duì)AMI大鼠心臟射血分?jǐn)?shù)的影響孫蘭軍等，中華醫(yī)學(xué)臨床雜志，2008，6（2）：4＊＊干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)對(duì)AMI大鼠心臟射血分?jǐn)?shù)的影響孫蘭軍等，中華醫(yī)學(xué)臨床雜志，272心肌梗死面積測(cè)定結(jié)果模型組MSCs＋復(fù)方丹參滴丸組＊＊干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)心肌梗死面積測(cè)定結(jié)果模型組MSCs＋復(fù)方丹參滴丸組＊＊干細(xì)胞73A，培養(yǎng)MSC用DiI（紅色）和Hoechst33258（藍(lán)色）染色的照片；B，心臟切片用Hoechst33258染色的照片，箭頭顯示部分移植的MSC；C，對(duì)照組心臟幾乎沒有MSC定位；干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)A，培養(yǎng)MSC用DiI（紅色）和Hoechst33258（藍(lán)74MSC移植后成活和增殖

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)MSC移植后成活和增殖干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)75極少量移植地細(xì)胞能表達(dá)α-actinin，說明開始向心肌細(xì)胞分化，但這種分化是不完全的，因?yàn)闆]有橫紋的出現(xiàn)。相對(duì)較多的細(xì)胞表達(dá)血管性血友病因子(vWF)，說明移植的MSC能夠向內(nèi)皮細(xì)胞分化。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)極少量移植地細(xì)胞能表達(dá)α-actinin，說明開始向心肌細(xì)胞76CX-43染色在同一視野看到Dil標(biāo)記的植入的紅色熒光的MSCs和二抗FITC標(biāo)記的相應(yīng)綠色熒光的

CX-43陽性表達(dá)CDDP+MSC組（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)CX-43染色在同一視野看到Dil標(biāo)記的植入的紅色熒光的MS77CX-43染色MSC組（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)CX-43染色MSC組（200×）干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死78TroponinⅠ染色CDDP+MSC組（200×）在同一視野看到Dil標(biāo)記的植入的紅色熒光的MSCs和二抗FITC標(biāo)記的相應(yīng)綠色熒光的

TroponinⅠ陽性表達(dá)，干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)TroponinⅠ染色CDDP+MSC組（200×）在同79TroponinⅠ染色MSCsGroupTroponinⅠ表達(dá)（200×）

干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)TroponinⅠ染色MSCsGroupTroponi80對(duì)心臟膠原沉積的影響HEPicrosiriusredHEPicrosiriusred

normalMSCs+CDDPMSCsmodel干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)對(duì)心臟膠原沉積的影響HE81各心梗組大鼠的膠原含量無顯著差異。但是，MSC和CDDP+MSC移植使心肌梗死區(qū)I/III型膠原比值分別降低了77％和84％。說明細(xì)胞移植能增加III型膠原含量，改善心肌順應(yīng)性，可能會(huì)對(duì)心功能有益。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)各心梗組大鼠的膠原含量無顯著差異。但是，MSC和CDDP+M82**BalcalininducedmigrationofMscs干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)**Balcalininducedmigrationo83Real-timequantitativeRT-PCRanalysisofVEGF,SCF,SDF-1αandMCP-1mRNAchange*p<0.05,**p<0.01,comparedtomodel.(n=6),

******干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Real-timequantitativeR84***干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)***干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)85ConclusionsCDDP可能通過多種途徑和機(jī)制干預(yù)誘導(dǎo)植入梗塞大鼠心肌干細(xì)胞的分化成活，并使植入細(xì)胞表達(dá)心肌特異性蛋白，說明植入細(xì)胞已分化為心肌樣細(xì)胞，同時(shí)可抑制膠原沉積，改善微環(huán)境。

有望成為中醫(yī)藥治療心血管疾病的一個(gè)新的發(fā)展方向，作為現(xiàn)代治療方法的補(bǔ)充手段，為臨床帶來廣闊的應(yīng)用前景。干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)ConclusionsCDDP可能通過多種途徑86Isstemcelltherapyforcardiac

repairreadyforpatients?干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死-徐強(qiáng)Isstemcelltherapyforcardi87RandomizedClinicalTrialsofStemCellTher