消毒劑對(duì)醫(yī)療器械的消毒模擬現(xiàn)場試驗(yàn)

消毒劑對(duì)醫(yī)療器械的消毒模擬現(xiàn)場試驗(yàn)2.1.2.2.1

目的

鑒定消毒劑對(duì)人工污染于醫(yī)療器械上細(xì)菌芽孢的殺滅作用作用，以驗(yàn)證對(duì)醫(yī)療器械處理的實(shí)用劑量。2.1.2.2.2

試驗(yàn)器材

(1)枯草桿菌黑色變種(ATCC9372)芽孢(下簡稱芽孢，其懸液的制備按2.1.1.2.3(2)規(guī)定進(jìn)行)(2)磷酸鹽緩沖液(PBS，0.03mol/L，pH7.2)

(3)中和劑溶液(經(jīng)按2.1.1.5規(guī)定方法鑒定合格者)

(4)含中和劑的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基

（5）模擬現(xiàn)場試驗(yàn)用樣本(將醫(yī)用止血鉗截?cái)?，取其由軸至齒端部分，參照2.1.1.2.4(2)規(guī)定方法進(jìn)行脫脂處理。經(jīng)壓力蒸汽滅菌后，烤干備用)。

(6)塑料試管(1.8cm×18cm)。2.1.2.2.3操作程序(1)以載體浸泡定量殺菌試驗(yàn)進(jìn)行消毒效果的測定。按產(chǎn)品使用說明書的劑量，選定本試驗(yàn)擬用濃度和和作用時(shí)間。

(2)染菌時(shí)，用無菌鑷子將止血鉗樣本齒面朝上，并固定在無菌支撐物上。用0.1ml無菌吸管或定量無菌移液器，將0.02ml芽孢懸液滴染于齒部，用無菌L型鉑金絲涂勻，置37℃恒溫箱內(nèi)干燥備用。

(3)取無菌平皿，按每個(gè)載體10ml用量加入消毒液，置20℃±2℃水浴中保溫5min。

(4)將30個(gè)染菌樣本浸沒于消毒液中進(jìn)行消毒處理。

(5)作用至規(guī)定時(shí)間，取出樣本，分別移入含10ml中和劑溶液的塑料試管內(nèi)。在手掌上振敲200次，分別取樣液1.0ml傾注接種兩個(gè)無菌平皿，放37℃恒溫箱培養(yǎng)72h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)，作為試驗(yàn)組。

(6)以無菌蒸餾水代替消毒液，將3個(gè)染菌樣同樣條件處理，然后與試驗(yàn)組樣本同法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)，作為陽性對(duì)照組，其菌量應(yīng)在5×105cfu/樣本～5×106cfu/樣本。

(7)試驗(yàn)結(jié)束后，將用過的同批次中和劑、采樣液、稀釋液接種培養(yǎng)基，進(jìn)行培養(yǎng);另將未用過的同批培養(yǎng)基亦放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，作為陰性對(duì)照。2.1.2.2.4評(píng)價(jià)規(guī)定在規(guī)定作用時(shí)間內(nèi)，陽性對(duì)照組均有菌生長，活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)達(dá)到規(guī)定的數(shù)量，陰性對(duì)照均無菌生長時(shí)，以對(duì)試驗(yàn)組30個(gè)樣本上人工污染芽孢的殺滅率對(duì)數(shù)均值≥3.00，可判為消