艾滋病常見的幾種篩查試驗(yàn)的探討

艾滋病常見的幾種篩查試驗(yàn)的探討實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是作為是否感染艾滋病的最重要的依據(jù)，所以艾滋病的檢測(cè)，在疾病的判斷治療中，顯得尤為重要，而艾滋病的檢測(cè)方法，分為很多種，下面就各種艾滋病篩查的檢測(cè)方法適用范圍及特點(diǎn)，和大家一起探討一下。一、檢測(cè)的樣本HIV感染的常用檢測(cè)標(biāo)志物為：抗體HIV-1/2,抗原P24以及HIV的RNA。艾滋病檢測(cè)最常用的樣品有血液，包括血清、血漿和全血以及濾紙干血斑，唾液或尿液有時(shí)也可作為測(cè)試樣品。不同的標(biāo)志物，在體內(nèi)產(chǎn)生的時(shí)間不同，所以要選用合適的標(biāo)志物，以便準(zhǔn)確確定感染的情況。二、檢測(cè)方法艾滋病的檢測(cè)分為篩查試驗(yàn)和補(bǔ)充試驗(yàn)。篩查試驗(yàn)包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)（CIA/IFA），快速檢測(cè)（RT）及其它試驗(yàn)，補(bǔ)充試驗(yàn)包括確診試驗(yàn)及核酸試驗(yàn)，在2015年《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》中，將核酸試驗(yàn)也納入到后期的補(bǔ)充試驗(yàn)中，以對(duì)篩查陽性的樣品進(jìn)行進(jìn)一步的檢測(cè)，其中確證試驗(yàn)主要包括免疫印跡試驗(yàn)（WB），條帶/線性免疫試驗(yàn)（RIBA/LIA）。核酸試驗(yàn)包括核酸定性和核酸定量試驗(yàn)。1、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（ELISA）ELISA有幾種類型，主要為雙抗原夾心法測(cè)抗體，雙抗體夾心法測(cè)抗原，間接法測(cè)抗體，競(jìng)爭(zhēng)法、捕獲包被法。試驗(yàn)可使用血液（包含血清、血漿和濾紙干血斑）、尿液樣品，多為HIV抗體檢測(cè)試劑，HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑可同時(shí)檢測(cè)血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體，HIV抗原/抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶標(biāo)記的HIV抗原/抗體，加底物顯色，用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果。2、化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)（CIA/IFA）試驗(yàn)采用發(fā)光或熒光底物，可使用血液(包含血清和血漿)、尿液樣品，既可檢測(cè)抗體，也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體。HIV抗原/抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標(biāo)記的HIV抗原/抗體，加發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果。3、快速檢測(cè)（RT）快速檢測(cè)作為一種方便的方法，現(xiàn)在越來越多的應(yīng)用于實(shí)際工作及個(gè)人的自測(cè)中，這種試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便快速，適用于應(yīng)急檢測(cè)、門診、急診檢測(cè)、VCT及檢測(cè)點(diǎn)等，有著不可替代的優(yōu)勢(shì)。常用的類型為明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA），免疫滲濾試驗(yàn)（膠體金或膠體硒），免疫層析試驗(yàn)，。明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）：將重組HIV-1抗原(HIV-1/gp41和HIV-1/P24)和HIV-2抗原（HIV-2/gp36)包被在人工載體明膠粒子上，這些致敏粒子和血中的HIV-1抗體或HIV-2抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，由此可以檢測(cè)出血清和血漿中的HIV-1/2的抗體。免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)：均以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原點(diǎn)狀或線狀固定在膜上，加待檢樣品，利用微孔濾膜的可濾過性，使抗原抗體反應(yīng)。陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)或條帶，有效試驗(yàn)的質(zhì)控點(diǎn)必須顯色，反應(yīng)時(shí)間在10分鐘以內(nèi)。免疫層析試驗(yàn)：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品沿著固相載體遷移，陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶，有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色，反應(yīng)時(shí)間在30分鐘以內(nèi)。三、檢測(cè)試劑在試驗(yàn)中，經(jīng)常說到的是檢測(cè)試劑為三代或四代之類的，這個(gè)艾滋病檢測(cè)的試劑已經(jīng)從第一代發(fā)展到第四代，目前基本上大都是使用三、四代的試劑，下面以ELISA試劑為例做個(gè)具體的說明。第一代HIV診斷試劑原理為間接ELISA法，所用的包被抗原為體外培養(yǎng)的HIV裂解物，含有很多雜抗原，主要的HIV結(jié)構(gòu)和表達(dá)的蛋白濃度不能保證，靈敏度和特異性都不高，會(huì)出現(xiàn)很多的假陰性和假陽性。第二代使用的是基因重組和合成多肽抗原，利用間接ELISA原理，窗口期比第一代縮短20天，靈敏度和特異性有所提高，可以同時(shí)檢測(cè)HIV-1/2抗體。第三代利用雙抗原夾心法檢測(cè)標(biāo)本中的抗體，酶標(biāo)記物改為特異性HIV抗原，檢測(cè)HIV-1/2抗體。第四代試劑是一種HIV-1/2抗體及P24抗原的聯(lián)合檢測(cè)方法。ELISA試 窗口期檢測(cè)物抗原來源檢測(cè)原理劑 （天）第一代IgG抗體病毒裂解產(chǎn)物間接法35～45基因重組抗原第二代IgG抗體間接法25～35合成肽igM/igG抗基因重組抗原雙抗原夾第三代20～30體合成肽心法基因重組抗原雙抗原夾P24抗原，合成肽心法第四代igM/igG抗15～20P24抗原的單克雙抗體夾體隆抗體心法四、篩查報(bào)告及流程HIV抗體篩查試驗(yàn)報(bào)告使用格式化的HIV抗體篩查檢測(cè)報(bào)告。篩查試驗(yàn)無反應(yīng)報(bào)告