藥物分析(人衛(wèi)版)第11章A課件

第十一章抗生素類藥物的分析進(jìn)入返回主目錄思考與練習(xí)第一節(jié)概述第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類抗生素

第三節(jié)氨基糖苷類抗生素第四節(jié)四環(huán)素類抗生素第五節(jié)抗生素類藥物中高分子雜質(zhì)的檢查基本要求基本要求一、掌握抗生素類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與分析方法之間的關(guān)系。二、掌握抗生素類藥物的鑒別原理與方法。三、掌握抗生素類藥物法定含量測(cè)定方法的原理、測(cè)定方法與計(jì)算。四、熟悉抗生素類藥物雜質(zhì)檢查的方法。五、了解抗生素類藥物中高分子聚合物檢查。返回2.微生物學(xué)法與理化法的比較微生物檢定法理化法以抗生素對(duì)微生物的殺傷或抑制程度為指標(biāo)衡量抗生素的生物效價(jià)

根據(jù)抗生素結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，利用其特有的理化性質(zhì)測(cè)定其含量已知或新發(fā)現(xiàn)的抗生素、精致品或粗制品均能測(cè)定

測(cè)定化學(xué)結(jié)構(gòu)已知、已提純的抗生素靈敏度高、樣品需用量小、反映抗生素的醫(yī)療價(jià)值，但操作步驟多、費(fèi)時(shí)、誤差大

迅速、準(zhǔn)確、專屬性高、樣品需用量小、操作簡(jiǎn)單、省時(shí)3.抗生素的活性以效價(jià)單位來(lái)表示：每ml或每mg中含有某種抗生素的有效成分的多少，用單位（u）或μg表示。

1mg青霉素G鈉鹽定為1667單位

1mg青霉素G鉀鹽的單位（u）=1667×356.4/372.5=1595u/mg分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）：β–內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類林可霉素類、其他抗生素類返回第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類抗生素

青霉素類NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）AB青霉素（青霉素鉀、鈉）阿莫西林

（羥氨芐青霉素）頭孢氨芐頭孢拉啶頭孢羥氨芐頭孢噻吩鈉酸性結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基

易溶于水

（二）手性C

頭孢菌素類

C6C7青霉素類C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡

（三）共軛體系

頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無(wú)明顯UV多數(shù)有苯環(huán)取代基

UV青霉素類某些氧化劑酸、堿、青霉素酶（某些金屬離子）（溫度）降解失效頭孢菌素類酸、堿、胺類-內(nèi)酰胺酶降解失效（一）呈色反應(yīng)1.羥肟酸鐵反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類呈色羥肟酸衍生物Fe3+/3H+鑒別試驗(yàn)二、NaOH?2HClNOHH-b內(nèi)酰胺類H+Fe3+/3（紅、棕、褐）2.茚三酮反應(yīng)α-氨基-氨基茚三酮藍(lán)紫色4.與重氮苯磺酸反應(yīng)橙黃色重氮苯磺酸--56OHHC（偶合）酚羥基頭孢哌酮5.與變色酸-硫酸反應(yīng)活潑“-CH2-”青霉素阿莫西林氨芐西林△（分解）變色酸顯色1.K+、Na+的火焰反應(yīng)（二）各種鹽的反應(yīng)

焰色→鮮黃色+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼鈉+Ac→↓白

K+2.沉淀反應(yīng)（青霉素鹽）遇酸→↓在過(guò)量HCl或有機(jī)溶劑中溶解白青霉素青霉素鈉

青霉素鉀

緘+H3.重氮化-偶合反應(yīng)

重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基4.與三硝基苯酚反應(yīng)

△二芐基乙二胺mp三硝基苯酚光譜法（三）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物Cu2+頭孢氨芐λmax=262nm青霉素V鈉A280nm/A264nm=1.30～1.50pH3.8分子重排2、IR法3180cm-1N-Hβ–內(nèi)酰胺C=O1780cm-13470cm-1O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1C-O以阿莫西林為例色譜法（四）1、TLC法對(duì)照品對(duì)照法2、HPLC法三、雜質(zhì)檢查

藥物

檢查項(xiàng)目

檢查方法

頭孢他啶聚合物HPLC法

頭孢曲松鈉

頭孢哌酮鈉

頭孢噻肟鈉

頭孢呋辛酯有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體HPLC法

頭孢氨芐有關(guān)物質(zhì)反相TLC法

青霉素鉀（鈉）吸收度紫外分光光度法

1.頭孢他啶聚合物的測(cè)定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（40~120μm）

流動(dòng)相A：3.5%硫酸銨的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液

流動(dòng)相B：0.01%十二烷基硫酸鈉

對(duì)照品溶液：頭孢他啶對(duì)照品100μg/ml

1）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍(lán)色葡聚糖2000、流動(dòng)相A測(cè)定；重復(fù)性用對(duì)照品溶液、流動(dòng)相B測(cè)定。

N不低于900，拖尾因子0.75~1.5，峰面積的RSD應(yīng)小于5.0%。

2）測(cè)定方法

進(jìn)樣供試液，用流動(dòng)相A；進(jìn)樣對(duì)照液，用流動(dòng)相B。以外標(biāo)法計(jì)算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計(jì)不得超過(guò)0.3%。2.頭孢呋辛酯中有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體的檢查

固定相：ODS

流動(dòng)相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38）

1）頭孢呋辛酯Δ2-異構(gòu)體的制備：頭孢呋辛酯對(duì)照品+流動(dòng)相頭孢呋辛酯Δ2-異構(gòu)體。

2）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：各異構(gòu)體之間的R>1.5，以頭孢呋辛酯A異構(gòu)體計(jì)算n>1500。

3）異構(gòu)體：t‘R1

相對(duì)保留時(shí)間r12=-----1----被測(cè)物

t’R22----標(biāo)準(zhǔn)物異構(gòu)體相對(duì)保留時(shí)間判斷B異構(gòu)體0.85供試液譜圖中A異構(gòu)體的峰面積A異構(gòu)體1.0與A、B異構(gòu)體峰面積和之比應(yīng)為0.48~0.55。3.頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查---反相TLC法

固定相：活化后的硅膠G板置5%（V/V）正十四烷的正己烷溶液中，展至頂部，涼干展開(kāi)劑：0.1mol/L枸櫞酸-0.2mol/L磷酸氫二鈉-丙酮（120：80：3）

供試液：本品50mg/ml

對(duì)照液（1）：本品0.5mg/