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批準:翁益平質(zhì)量Pillar審核:沈洪武、康黎東編寫:李貞編號:Q/SBJ4(品)-2.04.2010版本:第1頁共3頁名稱麥汁和啤酒的a-氨基氮檢測方法保密日期:2010年7月12日ABInB麥汁和啤酒的a-氨基氮檢測方法目的1.1用分光光度法比色測定麥汁和啤酒的a-氨基氮。范圍2.1本方法適用于所有種類的麥汁和啤酒。原理3.1茚三酮氧化劑與氨基酸反應被還原成水合茚三酮,氨基酸被氧化脫羧,產(chǎn)生醛、二氧化碳和氨,然后氨水合茚三酮和還原型水合茚三酮反應,生成蘭紫色絡合物,產(chǎn)生的顏色深淺與游離a-氨基氮含量成正比,在波長570nm下有最大吸收值,可用來比色測定。安全及預防4.1穿戴PPE,如隔熱手套;身體勿靠近沸水,以免濺出;具塞試管的玻璃塞應蓋緊,以免飛濺。4.2操作必須嚴防任何外界痕跡量的氨基酸引入,因此有關(guān)玻璃儀器都必須仔細洗滌,洗滌后只能接觸其外部表面,移液管必須用吸球吸。4.3測定中加入果糖等作為還原性發(fā)色劑,碘酸鉀在稀釋液中使茚三酮保持氧化態(tài),以阻止進一步發(fā)生不希望的生色反應。試劑5.1顯色劑:10gNa2HPO4?12H2O(磷酸氫二鈉)6gKH2PO4(磷酸二氫鉀)0.50g水合茚三酮0.30g果糖0.30g批準:翁益平質(zhì)量PillarABIn^^審核:沈洪武、康黎東編寫:李貞編號:Q/SBJ4(品)-2.04.2010版本:第2頁共3頁名稱麥汁和啤酒的a■氨基氮檢測方法保密日期:2010年7月12日將以上試劑用水溶解后稀釋至100mL(此溶液在低溫棕色瓶子可保存2周,PH應為6.6?6.8)。稀釋溶液:稱2g碘酸鉀(KIO3)溶于600mL水中,再加96%乙醇400mL,貯存于冰箱。標準溶液:溶0.1072g甘氨酸于100mL水中,在冰箱貯藏。儀器設備6.1紫外可見分光光度計UV-2450;6.225mL具塞試管;6.3移液槍:電爐(1000W-2000W);200mL容量瓶;6.6恒溫水浴鍋(精度0.5°C);步驟7.1取過濾后的麥芽汁2.00mL,置于200mL容量瓶中,用蒸餾水定容至刻度,搖勻。7.2吸取標準液2.00mL,置于各個200mL容量瓶中,用水定容至刻度,搖勻。7.3依次吸取2.00mL蒸餾水,稀釋后的標準液,稀釋后的麥芽汁溶液于試管架的試管中(每吸取一樣品,移液槍應用該樣品潤洗3次),并在各試管中加入1.00mL顯色劑,混勻,在恒沸水浴中準確加熱16分鐘,取出在20C水浴中恒溫20分鐘。7.4在各試管中加入5.00ml碘酸鉀稀釋液并搖勻,于30分鐘內(nèi)在570nm波長處用10mm比色皿測定其吸光度,測定時以裝蒸餾水試管為空白,裝標準液為標準,以后依次為麥汁。
批準:翁益平質(zhì)量PillarABInBev審核:沈洪武、康黎東編寫:李貞編號:Q/SBJ4(品)-2.04.2010版本:第3頁共3頁名稱麥汁和啤酒的a■氨基氮檢測方法保密日期:2010年7月12日8.結(jié)果的表示和方法的可靠性樣品溶液的吸光度a-N(mg/L麥芽汁)=x200標準溶液的
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